人教版选修3 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 学案.doc

2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术目标导航1.结合图216及相关内容，归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。2.结合图221，归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景。重难点击1.动物细胞培养的过程、条件。2.通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。课堂导入方式一：2003年，四川少年小林点燃鞭炮，导致面部、四肢被严重烧伤并感染。为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求“割皮救儿”，烧伤整形科主任魏平最终同意进行这场罕见的亲体皮肤移植手术。为了全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染的创面，医生把取自父子俩的皮肤全部剪成指甲盖大小的皮块，儿子和爸爸的皮相隔相嵌，估计父亲的皮肤至少能在其儿子身上存活半年甚至更长时间，这就给儿子自身皮肤的生长带来了生机，孩子的痊愈指日可待。思考：1.小林在皮肤烧伤之后，很容易得病，为什么？2.选取植皮时，理论上选择谁的皮肤最好？为什么？3.自身的健康皮肤是有限的，能不能通过其他途径获得自身的皮肤？方式二：古代神话里孙悟空用自己的汗毛变成无数个小孙悟空的离奇故事，表达了人类对复制自身的幻想。1978年，美国科幻小说家罗维克(d.rorvick)写了一本名叫克隆人(the cloning of a man，内容是一位富商将自己体细胞核移植到一枚去核卵中，然后将其在体外卵裂成的胚胎移植到母体子宫中，经过足月的怀孕，最后生下了一个健康的男婴，这个男婴就是一个克隆人。现在，克隆人已经不是科幻小说里的梦想，而是呼之欲出的现实。由于克隆人可能带来复杂的后果，一些生物技术发达的国家，现在大都对此采取明令禁止或者严加限制的态度。克隆人，真的如潘多拉盒子里的魔鬼一样可怕吗？我们应该怎样正确看待克隆技术呢？一、动物细胞工程和动物细胞的培养1.动物细胞工程基础技术手段应用动物细胞培养技术动物细胞培养、动物体细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等(1)深入探索并改造生物的遗传特性(2)大量培养细胞(3)单克隆抗体的制备等2.动物细胞培养(1)概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。(2)过程动物组织块或器官单个细胞细胞悬液原代培养传代培养。(3)相关概念细胞贴壁：悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。原代培养：指动物组织消化后的初次培养。传代培养：贴满瓶壁的细胞，出现接触抑制后，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖的培养过程。(4)培养条件无菌、无毒的环境：培养液中添加一定量的抗生素，并定期更换培养液，以清除代谢产物，防止对细胞自身造成危害。营养温度和ph气体环境(5)应用生产生物制品：如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。应用于基因工程：动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞。应用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。用于生理、病理、药理等方面的研究，如筛选抗癌药物等。合作探究1.动物细胞培养为什么需要无菌、无毒的环境？答案细菌、真菌和病毒等均可造成细胞培养环境的污染，而离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力，一旦受到污染或自身代谢物质积累等，培养的细胞就会死亡。2.根据动物细胞培养的过程，思考下列问题：(1)培养前为什么要将动物组织分散成单个细胞？答案分散后细胞能与培养液充分接触，更易进行物质交换。(2)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶作用的对象有何不同？答案第一次是将组织块分散成单个细胞，第二次是将贴满瓶壁的细胞分散成单个细胞。3.为什么进行动物细胞培养时，通常要添加血清？答案血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等物质，而且还含有多种未知的促生长因子，能促进细胞的生长、增殖和贴附。4.进行动物细胞培养为何常选用幼龄动物组织或胚胎作培养材料？动物细胞培养需要脱分化吗？答案幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低，增殖能力强，更易于培养。动物细胞培养不需经过脱分化过程，因高度分化的动物细胞发育潜能变弱，失去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。5.动物细胞培养与植物组织培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养生物学原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体液体培养基成分蔗糖、氨基酸、水、矿物质、生长素、细胞分裂素、琼脂等葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、水、血清、血浆等培养结果新的植株或组织大量新细胞或细胞产物应用快速繁殖；培育无病毒植株；细胞产物的工厂化生产；制作人工种子生产病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；检测有毒物质；生理、病理、药理研究取材植物器官、组织或细胞动物早期胚胎、幼龄动物的器官或组织培养对象植物器官、组织或细胞分散的单个细胞过程脱分化、再分化原代培养、传代培养细胞分裂、生长、分化特点分裂：形成愈伤组织；分化：形成根、芽只分裂不分化；贴壁生长；接触抑制培养条件无菌、适宜的温度和ph1.判断正误(1)动物细胞培养时，需要对细胞进行一次脱分化处理和两次胰蛋白酶处理()(2)恒温条件下进行动物细胞培养，细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而改变()(3)动物细胞培养技术可用于检测有毒物质、构建人造皮肤、大量生产药物蛋白()(4)为了防止培养过程中发生微生物污染，应将培养箱抽成真空以消毒、灭菌()答案(1)(2)(3)(4)2.某研究小组为测定药物对肝肿瘤细胞的治疗效果，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。下列有关说法正确的是()a.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理b.细胞培养应在co2培养箱中进行，co2的作用是作为细胞代谢原料c.取甲细胞进行培养，传至1050代就会完全停止d.乙细胞在原代培养过程中，最终会出现停止增殖的现象问题导析(1)胃蛋白酶的最适ph大约为2，这一环境下细胞往往会受到破坏，不利于培养，所以一般用胰蛋白酶而不用胃蛋白酶处理细胞。(2)培养箱中co2的作用是调节培养液的ph。(3)在适宜条件下，肝肿瘤细胞可以无限增殖。(4)正常肝细胞在原代培养过程中会出现接触抑制现象，停止增殖。答案d二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1.概念将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体。2.分类包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，其中胚胎细胞核移植较易成功。3.过程4.体细胞核移植技术的应用应用前景畜牧业加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育保护濒危物种增加动物的存活数量医药卫生领域转基因克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白治疗人类疾病转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为异种移植的供体存在问题(1)体细胞核移植技术的成功率非常低(2)克隆动物存在健康问题，表现出遗传和生理缺陷等(3)克隆动物食品的安全性问题存在争议合作探究1.供体和受体细胞的选择和处理(1)为什么供体细胞要选择10代以内的细胞？答案因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。(2)为什么选择m中期的卵母细胞作为受体细胞？答案一方面细胞大，易于操作；且卵黄多，营养丰富，为发育提供充足的营养。另一方面此时具备受精能力，细胞质中含有能刺激融合后重组细胞进行分裂分化并形成重组胚胎的物质。(3)受体细胞去核的原因是什么？答案保证克隆动物的遗传物质最大程度地来自有重要利用价值的动物。2.为什么核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同？答案(1)克隆动物绝大部分dna来自于供体细胞核，但其核外线粒体中的dna来自于受体卵母细胞。(2)性状是基因与环境共同作用的结果。供核动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其性状也不可能和供核动物完全相同。(3)在个体发育过程中有可能发生基因突变，产生供核动物没有的性状。3.动物体细胞核移植属于哪种生殖方式？为什么？答案无性生殖。因为动物体细胞核移植最终得到的个体的细胞核中遗传物质完全来自一个个体，不是精卵受精得到的，因此属于无性生殖。3.判断正误(1)核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核遗传物质与供核个体的相同，属于无性生殖()(2)通过克隆技术形成重组细胞并发育成一个新个体，体现了动物细胞的全能性()(3)克隆动物细胞、组织或器官可以作为异种移植的供体()(4)克隆技术可以用于增加濒危动物数量，改善濒危物种的基因组成()答案(1)(2)(3)(4)4.下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答下列问题：(1)图中所示的结构名称是_。(2)图中所示的生物技术名称分别是_、_。(3)过程通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它_。(4)过程通常用作为受体细胞的原因是_。(5)图示方法与一般的异体核移植相比最大的优点是_，该种基因治疗所属类型为_。问题导析(1)是从供体(患者)体细胞中分离出的细胞核。(2)表示核移植技术，表示转基因技术。(3)核移植的受体细胞一般是m中期的卵母细胞，原因是它体积大、易操作，含有供胚胎发育的营养物质，它还含有促进细胞核全能性表达的物质。(4)早期胚胎中的细胞分化程度低，全能性高，可诱导分化成各种组织器官。(5)图示培育出的细胞(胰岛b细胞)核遗传物质来自患者本人，所以移植后不发生免疫排斥反应；图中所示基因治疗是体外转基因，故所属类型为体外基因治疗。答案(1)细胞核(2)核移植技术转基因技术(或基因工程、dna重组技术、基因拼接技术)(3)含有促进细胞核全能性表达的物质(4)早期胚胎细胞分化程度低，全能性高，可诱导分化为各种组织、器官(5)细胞移植无免疫排斥反应体外基因治疗一题多变(1)图中健康胰岛b细胞基因可采用_技术导入动物细胞中。(2)图中重组细胞a在培养液中培养成早期胚胎的过程中是否发生基因重组？答案(1)显微注射(2)否。1.动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是()a.动物细胞培养b.动物细胞融合c.动物组织培养d.胚胎细胞核移植答案a2.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于()a.培养基不同b.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行c.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能d.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株答案a解析动物细胞培养的培养基与植物组织培养的培养基不同，动物细胞一般用液体培养基培养，而植物组织培养一般用固体培养基，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养的培养基中还要加动物血清等；它们都是在无菌条件下进行的，故a项正确；b、c、d项的叙述有误。3.如图为某哺乳动物的生殖过程图，正确的叙述是()a.动物个体2为克隆动物，c为高度分化的体细胞b.动物个体2的遗传性状与提供b细胞的母体完全不同c.产生动物个体2的生殖方式为有性生殖d.e细胞为完成减数分裂的卵细胞答案a解析通过克隆技术培育的动物称为克隆动物，提供细胞核的是高度分化的体细胞，a项正确；考虑细胞质基因，应该是“有相同之处”，b项错误；动物的克隆实际上是无性生殖过程，c项错误；e细胞是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞，并没有完全完成减数分裂，d项错误。4.下列有关生物工程的说法正确的是()a.克隆技术发展的过程是：微生物的克隆个体水平的克隆遗传工程克隆b.动物细胞培养时，如果缺少氨基酸供应，细胞一般会停留在细胞周期的分裂期c.提高细胞克隆成功率，需在培养基中加入血清，使用co2培养箱调节phd.利用人工诱变手段可获得生产人干扰素的工程菌答案c解析克隆技术发展的过程是微生物的克隆遗传工程克隆个体水平的克隆；动物细胞培养时，如果缺少氨基酸供应，细胞一般会停留在细胞周期的分裂间期，因为间期需要氨基酸合成蛋白质；动物细胞克隆时加入血清可为细胞提供多种营养物质、激素及生长因子，co2的主要作用是维持培养液的ph；诱变育种方法的缺点是有利变异少，诱变的方向和性质不能控制，所以不能通过诱变获得生产人干扰素的工程菌，而通常采用的是基因工程技术。5.科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)，请结合图示回答下列相关问题：(1)在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用_酶处理。(2)用于核移植的供体细胞，一般选用传代10代以内的细胞，原因是_。(3)在进行原代培养时，细胞增殖的方式是_，此外，细胞增殖还表现出_和接触抑制等特点。(4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中，去除卵母细胞细胞核的目的是_。(5)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的犊牛，但也不是100%的复制，原因最可能是_。答案(1)胰蛋白(2)该种细胞代谢旺盛、分裂能力强，且遗传物质没有发生改变(3)有丝分裂贴壁生长(4)使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞(5)生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制；生物的性状还受环境因素的影响解析(1)实践中常用胰蛋白酶处理动物组织细胞使其分散开来。(2)传代10代以内的细胞代谢旺盛、分裂能力强，遗传物质没有发生改变，适于作核移植的供体细胞。(3)在进行原代培养时，细胞以有丝分裂的方式进行增殖，同时表现出贴壁生长和接触抑制的现象。(4)去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。(5)生物的性状是细胞核基因和细胞质基因共同作用的结果，同时，生物的性状还受环境的影响，因此，克隆动物不可能是供体奶牛100%的复制品。基础过关1.在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是()a.使动物组织分散为单个细胞b.去掉细胞壁，使其成为原生质体c.去掉细胞膜，暴露出原生质体便于细胞融合d.促进蛋白质水解为多肽答案a解析在进行动物细胞培养前，先用胰蛋白酶使组织块中的细胞相互分散开，以增加与培养液的接触面积，便于培养。2.进行动物细胞培养时，最好选用的培养材料是()a.衰老退化的动物组织细胞b.成熟动物个体的体细胞c.动物的受精卵细胞d.健康动物胚胎或幼龄动物个体的体细胞答案d解析健康动物胚胎或幼龄动物体的体细胞分裂能力强，而衰老退化的动物组织细胞、成熟动物个体的体细胞分裂能力差，一般不用。3.动物细胞培养过程的顺序是()原代培养传代培养用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液a. b. c. d.答案d解析动物细胞培养过程的顺序为选取幼龄动物或早期胚胎组织作培养材料用胰蛋白酶处理组织，制备细胞悬液原代培养传代培养。4.对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法正确的是()a.取单个肝肿瘤细胞进行培养，获得细胞群的方法不属于克隆培养法b.细胞培养过程中不需考虑细菌的污染问题c.该培养液也能用来培养乙肝病毒d.在原代培养过程中，培养的细胞最终也会出现停止增殖的现象答案d解析a选项的描述属于细胞层次的克隆；培养液受细菌污染后，其中的营养成分会发生改变，不利于细胞的培养，b错误；病毒的生存离不开细胞，用培养液不能培养病毒，c错误；原代培养过程中，细胞会出现接触抑制现象，将停止增殖，d正确。5.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是()a.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织b.将所取的组织先用胰蛋白酶等处理使其分散成单个细胞c.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成细胞悬液d.动物细胞培养只能传至50代左右，所培养的细胞都会衰老死亡答案d解析动物细胞培养传至50代左右，部分细胞的遗传物质可能发生改变，带有癌变的特点，能够在适宜培养条件下无限制地传代下去。6.用动、植物体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()a.都需用co2培养箱b.都须用液体培养基c.都要在无菌条件下进行d.都可体现细胞的全能性答案c解析动、植物体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行；动物体的体细胞离体培养用液体培养基，不能体现细胞的全能性；植物体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。故c正确。7.用于动物体细胞核移植的供体细胞一般都选用()a.受精卵b.传代10代以内的细胞c.传代1050代以内的细胞d.处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞答案b解析培养的动物细胞，当传代至1050代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在动物体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用10代以内的细胞。8.在克隆羊“多利”的培育过程中，没有运用的技术手段是()a.细胞培养b.体细胞核移植c.胚胎移植d.基因工程答案d解析克隆羊“多利”的培育过程：将一只母羊(a羊)卵细胞的细胞核吸出，获得去核卵母细胞。将另一只母羊(b羊)的乳腺上皮细胞细胞核注入去核卵母细胞中，形成一个同时含有b羊核遗传物质和a羊细胞质的重组卵细胞。融合后的卵母细胞经过体外细胞培养形成早期胚胎，然后把这个胚胎移植到第三只羊(c羊)的子宫中，继续发育。该过程既涉及体细胞核移植技术，又涉及胚胎移植技术，这两项技术操作都需细胞培养技术作为手段。故正确答案为d。能力提升9.一只羊的卵母细胞被另一只羊的体细胞核移植后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入到第三只羊的子宫内发育，结果产下了一只羊羔，这种克隆技术具有多种用途，但是不能()a.有选择地繁殖某一性别的家畜b.繁殖家畜中的优秀个体c.用于保存物种d.改变动物的基因型答案d解析目前的克隆技术是将动物的一个细胞的细胞核植入一个去核的卵母细胞中，经过试管培养一段时间后，再移入另一个体的子宫内发育、分娩的技术。通过该技术能够保持亲本的优良性状，保持性别不变，也能够用于保存物种，但不能改变动物的基因型。10.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一头野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是()a.将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育成新个体b.将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体c.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体d.将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体答案c解析野驴的体细胞的全能性已经受到限制，不能经过培养形成新个体；将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成的是带有野驴基因的家驴；野驴的体细胞核中具有发育成野驴的全部基因，因此通过核移植技术，可使野驴“复生”。11.回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不被染色，原因是_。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞_的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。答案(1)相互接触接触抑制单层(或一层)胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性降低减少(3)活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内着色)(4)中(5)冷冻(或超低温、液氮)酶新陈代谢(6)抗原解析(1)动物细胞培养过程中具有贴壁生长和接触抑制的特点，若要传代培养应先用胰蛋白酶处理，使其从瓶壁上分离下来。(2)在传代培养过程中，随着传代次数的增多，绝大多数细胞停止分裂，进而衰老甚至死亡，极少数细胞遗传物质发生改变，克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这种细胞黏着性降低，细胞膜表面的糖蛋白减少。(3)活细胞的细胞膜具有选择透过性，而死细胞的细胞膜则没有这种特性，所以大分子染料可以对死细胞染色而不能对活细胞染色。(4)若要观察染色体的数目，最好选择细胞分裂中期的细胞，因为分裂中期染色体螺旋程度最高，形态固定，数目清晰。(5)低温可以抑制酶的活性，从而降低细胞的新陈代谢速率。(6)皮肤移植后发生排斥现象，是因为机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击。12.现有a和b两个肉牛品种，a品种牛的细胞组成可表示为a细胞核、a细胞质；b品种牛则为b细胞核、b细胞质，请分析回答下列问题：(1)如果要获得一头克隆牛，使其细胞由a细胞核和b细胞质组成，基本步骤是：从a品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_注入b品种牛的_卵母细胞，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为_，将该胚胎移入代孕母牛的_中，通过培育可达到目的。(2)克隆牛的产生说明_具有全能性。克隆牛的性状主要表现_品种牛的特征。由a、b两品种杂交得到的牛和克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自_个亲本，细胞质主要来自_性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成_(填“相同”或“不同”)。答案(1)细胞核去核重组胚胎子宫(2)动物体细胞核a两雌不同解析(1)依据题意可知，要获得由a细胞核和b细胞质组成的重组细胞，需要提取a细胞核，然后与去掉b细胞核的b细胞质进行重组，得到重组细胞，进一步培养得到重组胚胎，再进行胚胎移植，移植到代孕母牛的子宫里进行培育。(2)克隆动物利用动物细胞细胞核的全能性，得到的新个体的性状主要由细胞核决定，与供核母牛的性状基本一致，杂交牛是由精子和卵细胞融合得到的受精卵发育来的，细胞核来自两个亲本，由于精子含有很少的细胞质，受精卵的细胞质主要来自卵细胞，所以杂交牛和克隆牛的遗传物质不同。13.美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛，年产奶量达30.8 t，我国奶牛产奶量年平均水平仅为34 t。某人用该高产奶牛的耳朵细胞，采用核移植技术获得高产奶牛(如图)，请据图回答下列问题：(1)目前完成的方法有_、梯度离心、紫外光短时间照射及化学物质处理等。(2)过程中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是_。(3)过程所利用的技术是_，其原理是_。(4)该实验的成功说明已分化的耳朵细胞的细胞核中含有与_一样的全套基因，这种繁殖方式属于_。(5)若研究发现该高产奶牛线粒体发达，故它的产奶量高，则小牛d成年后具有这一优良性状吗？_。你的依据是_。答案(1)显微操作去核法(2)卵母细胞体积大，易操作，营养物质丰富，且细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质(3)动物细胞培养细胞增殖(4)受精卵无性繁殖(5)不具有线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代，而小牛d的细胞质主要来自于牛a解析(1)去核的方法有显微操作去核法、梯度离心、紫外光短时间照射及化学物质处理等方法。(2)