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实验二 微量吸管及计数板的使用 一 微量吸管的使用 目的 掌握微量吸管的使用方法 原理 利用微量吸管的虹吸作用吸取血液 器材 微量吸管 乳胶吸头 一次性棉签 试管 试管架 采血针 试剂 洗涤液 生理盐水 标本 采集末梢血 操作 1 准备吸管及试管 2 加稀释液取试管1支 加生理盐水2ml 3 持管吸血4 拭净余血用干脱脂棉沿吸管口方向拭净余血 并检查血量是否达到规定刻度 5 释放血液将吸管插入含生理盐水的试管底部 慢慢排出吸管内的血液 再用上清液冲洗管内余血3次 二 改良牛鲍计数板的使用 目的 掌握改良牛鲍计数板计数池的基本结构及使用方法 原理 一定倍数稀释的血液或体液 混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的改良牛鲍计数板中 在显微镜下对所选择区域中的细胞进行计数 再乘以稀释倍数 即可换算成单位体积内的细胞数 器材 1 改良牛鲍计数板及盖玻片2 其它试管 试管架 吸管 微量吸管 乳胶吸头 绸布 显微镜 标本 同上 操作 1 准备计数板先用流水冲洗计数板和盖玻片除去所有残留物 然后用乙醇洗涤 最后用绸布拭净 采用推压法从计数板下缘向前平推盖玻片 将其盖在计数池上 2 先用低倍镜 10倍物镜 观察 通过调节显微镜光栅减少光线进入量以便观察整个计数板的结构 大 中 小方格 及特征 再用高倍镜 40倍物镜 观察红细胞计数区域 3 充池充分混匀溶液 用微量吸管将稀释血液滴入计数板和盖玻片交界处 利用虹吸作用让液体顺其间隙充满计数池 同样方法再给另一侧计数板充池 4 静置计数板充池后应平置于桌面上静置3min 待细胞下沉后计数 5 计数原则需遵循一定的方向逐格进行 以免重复或遗漏 对压线的细胞采用数左不数右 数上不数下的原则 记录所数5个中方格的红细胞数和4个大方格的白细胞数 7 可编辑 血细胞计数板的构造 24 20 0 6mm 计数池划线 1mm 1mm 计数池划线 美国国家标准局 NBS 1941年规定 计数池大方格每边长度的误差应在 1 内 10 0 01mm 血盖片与计数池间缝隙深度应在 2 以内 0 1 0 002mm 计数池的参数 区域边长 mm 面积 mm2 深度 mm 体积 mm3 计数池390 10 9大方格110 10 1计WBC中方格0 250 06250 10 00625计RBC中方格
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