化学因素对微生物的影响.ppt

水生态工程实验室 YJH 化学因素对微生物的影响 水生态工程实验室 YJH 目的要求 了解常用化学消毒剂对微生物的作用 学习测定石炭酸系数的方法 水生态工程实验室 YJH 基本原理 常用化学消毒剂 重金属及其盐类 有机溶剂 酚 醇 醛 卤族元素及其化合物 染料 表面活性剂 水生态工程实验室 YJH 各种化学消毒剂的杀菌能力常以石炭酸为标准 以石炭酸系数 酚系数 来表示 将某一消毒剂作不同程度稀释 在一定时间内及一定条件下 该消毒剂杀死全部供试微生物的最高稀释倍数与达到同样效果的石炭酸的最高稀释倍数的比值 即为该消毒剂对该微生物的石炭酸系数 石炭酸系数越大 说明该消毒剂杀菌能力越强 水生态工程实验室 YJH 器材 菌种 大肠杆菌 白色葡萄球菌 培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 牛肉膏蛋白胨液体培养基 溶剂或试剂 各种化学消毒剂仪器或其他用具 无菌培养皿 无菌滤纸片 试管 吸管 三角涂棒等 水生态工程实验室 YJH 操作步骤 滤纸片法石炭酸系数的测定 user 水生态工程实验室 YJH 滤纸片法 1 倒平板2 标记3 细菌涂布4 放滤纸片5 培养及结果观察 水生态工程实验室 YJH 石炭酸系数测定 稀释配制石炭酸溶液稀释配制待测消毒剂溶液配制分装培养基消毒剂作用细菌培养计算石炭酸系数值 水生态工程实验室 YJH 倒平板 在微波炉中加热将灭好菌的固体培养基融化 待冷却至55 60 C时 右手持装有培养基的三角瓶置酒精灯火焰旁 用左手将瓶塞轻轻拔出 瓶口对着火焰 用右手小指和手掌边缘或小指与无名指夹住瓶塞 左手拿培养皿并将皿盖在酒精灯火焰附近打开一缝 迅速倒入培养基约15mL 加盖后轻轻摇动培养皿 使培养基均匀分布 水生态工程实验室 YJH 标记 将平板底皿划分成4 6等份 每一份内标明一种消毒剂名称 消毒剂1 消毒剂2 消毒剂3 消毒剂4 消毒剂5 消毒剂6 消毒剂7 消毒剂8 生理盐水 生理盐水 水生态工程实验室 YJH 细菌涂布 用无菌吸管吸取0 2ml菌液接种在作好标记的琼脂平板上 再用无菌刮铲将菌液在平板上涂抹均匀 水生态工程实验室 YJH 放滤纸片 用无菌镊子将已经灭菌的小园滤纸片 5mm 分别浸入各种消毒剂溶液中 无菌操作取出浸湿的小滤纸片 并在试管内壁沥去多余药液 注意保证滤纸片上各种消毒剂溶液量基本一致 无菌操作将滤纸片贴在上述平板的相应区域 水生态工程实验室 YJH 培养及结果观察 将上述贴好滤纸片的平板置于37 培养箱中培养 24hr后取出观察抑 杀 菌圈的大小 抑 杀 菌圈的大小测定 水生态工程实验室 YJH 稀释配制石炭酸溶液 将石炭酸溶液稀释成1 50 1 60 1 70 1 80 1 90等5种浓度 每个浓度各取5mL装入试管 作好标记 水生态工程实验室 YJH 稀释配制来苏尔溶液 将来苏尔溶液稀释成1 150 1 200 1 250 1 300 1 500等5种浓度 每个浓度各取5mL装入试管 作好标记 水生态工程实验室 YJH 配制分装培养基 取盛有牛肉膏蛋白胨液体培养基的试管15支 标记石炭酸的5种浓度 每个浓度标记3支 分别标记5 10 15min三个作用时间 另取盛有牛肉膏蛋白胨液体培养基的试管15支 标记来苏尔的5种浓度 每个浓度标记3支 分别标记5 10 15min三个作用时间 水生态工程实验室 YJH 消毒剂作用细菌 在上述盛有不同浓度的石炭酸和来苏尔溶液的试管中各加入0 5mL大肠杆菌菌液摇匀 加入大肠杆菌后分别于5 10 15min用接种环自每管内取一环混合液接种到分装并作好标记的牛肉膏蛋白胨液体培养基试管内 水生态工程实验室 YJH 培养 将上述接种药液处理过的大肠杆菌的试管置于37 培养箱中培养48hr后观察并记录大肠杆菌生长状况 细菌生长试管内培养液混浊 以 表示 不生长试管内培养液澄清 以 表示 水生态工程实验室 YJH 计