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精品文档 果蝇杂交实验论文 【摘要】用果蝇作为实验材料,分三组独立实验。组亲本为18#野生型长翅2#红眼残翅纯合子;组亲本为2#红眼灰身残翅纯合子e#红眼黑身长翅纯合子;组亲本为18#野生型红眼22#突变型白眼纯合子。三组各进行正交和反交实验,分别得到两种杂合的F1代果蝇,然后F1代的果蝇进行自交,繁殖出F2代果蝇。通过统计F2代果蝇的表型性状比例,验证基因分离定律、基因的自由组合定律和伴性遗传。【关键词】果蝇 正交 反交 三大遗传定律 卡平方测验【前言】黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)属双翅目,具完全变态。果蝇作为遗传学实验材料,具有以下优点: 生长迅速、世代周期短; 繁殖力强、后代数量大,便于统计分析;个体小、饲养管理方便;突变类型多,便于观察和杂交组合;染色体数目较少(2n=8)1。果蝇的眼色由X染色体上的基因控制,翅形,体色由常染色体上的基因控制。在常染色体上的基因的正交、反交情况差别不大,但在性染色体上的基因正交和反交后代的性状表现是不同的,子代雄性个体的X染色体均来自母本,子代雌性个体的X染色体均来自父本,这是伴性遗传的一个重要特征。 根据孟德尔提出的遗传规律,一对基因在杂合状态下不互相影响,各自保持相对的独立性,在形成配子时互相分开分配到不同配子中;且一对基因的分离与其他基因分离也是独立的。本实验用长翅与残翅品系验证分离定律;用黑身突变体和残翅突变体验证自由组合定律;用红眼品系和白眼品系验证伴性遗传规律。【实验方案】1. 材料和用品实验材料:18#野生型纯合子果蝇、2#红眼灰身残翅纯合子果蝇、e#红眼黑身长翅纯合子果蝇、22#突变型白眼纯合子果蝇仪器和用具:恒温培养箱,培养瓶(内有实验室提供的培养基),麻醉瓶,白瓷板,毛笔,毛巾试剂:乙醚2. 实验步骤(1) 挑选和收集4种品系的处女蝇和雄性果蝇并麻醉(2) 取6个培养瓶平均分成3组,组为18#野生型长翅2#红眼残翅纯合子,18#2#为正交组合;组为2#红眼灰身残翅纯合子e#红眼黑身长翅纯合子,2#e#为正交组合;组为18#野生型红眼22#突变型白眼纯合子,18#22#为正交组合。每组各设正交反交两个组合(3) 按步骤二要求用毛笔往各个培养瓶扫入对应的处女蝇和雄性果蝇各34只,并贴上相应的标签(4) 把配好的各杂交组合放在25培养箱培养,7天后见到F1幼虫出现,立即处死亲本果蝇(成虫)(5) 再过7天,观察F1成虫性状,每个组合挑选35对成虫转入新的培养瓶中培养,并贴上相应的新标签(6) 7天后处死F1成虫(7) 再过7天F2成虫出现,把成虫分别转到空瓶中并麻醉,观察性状并统计,做卡平方实验。数据记录如下:组(单因子杂交)正、反交F2果蝇翅形结果长翅残翅残翅长翅长翅数残翅数长翅数残翅数观察结果3984914组果蝇两对基因杂交F2性状结果(正、反交合并)灰身长翅黑身长翅灰身残翅黑身残翅观察结果94283112组(伴性遗传)正交F2果蝇眼色结果红眼雄性白眼雄性红眼雌性观察结果71034组(伴性遗传)反交F2果蝇眼色结果红眼雄性白眼雄性红眼雌性白眼雌性观察结果1014715【实验结果】单因子杂交实验结果测验表观察结果长翅正交、反交合并残翅正交、反交合并合计实验观察数(O)8822110预期数(C)82.527.5110偏差(O-C)5.5-5.50(O-C) C0.371.11.47自由度n=2-1=1,=1.47。查表得知0.20P0.30,观察值和理论值无明显差异,符合分离定律的假设。两对基因杂交实验结果测验表观察结果灰身长翅黑身长翅灰身残翅黑身残翅合计实验观察数(O)94283112165预期数(C)92.830.930.910.4165偏差(O-C)1.2-2.90.11.60(O-C) C0.0160.2720.0030.2460.534自由度n=4-1=3,=0.534。查表得知P0.90,观察值和理论值无明显差异,符合自由组合定律的假设。伴性遗传实验结果测验表(上方为正交,下方为反交)红眼雄性白眼雄性红眼雌性合计观察结果(O)7103451预期数(C)12.7512.7525.551偏差(O-C)-5.75-2.758.50(O-C) C2.590.592.836.01自由度n=3-1=2,=6.01,查表得0.05P0.02,当P=0.05时=5.99,两者相差较小,推测为雄性个体较少导致的误差。 红眼雄性白眼雄性红眼雌性白眼雌性合计观察结果(O)101471546预期数(C)11.511.511.511.546偏差(O-C)-1.52.5-4.53.50(O-C) C0.200.541.761.073.57自由度n=4-1=3,=3.57,查表得0.50P0.30,观察值和理论值无明显差异,符合伴性遗传规律的假设。【分析与讨论】根据孟德尔的遗传定律和伴性遗传理论,无论正交、反交,单因子杂交实验和双因子杂交实验中的F1代果蝇均为显性性状,单因子杂交实验F2出现性状分离,分离比为3:1;双因子杂交实验F2性状分离比为9:3:3:1。这两个实验的卡平方测验表明实验值和观察值无显著差异,置信度较高。在伴性遗传实验中,F1代正交与反交所得的果蝇全部为显性性状,但F2结果不同,正交F2代不出现雌性白眼的突变型,而反交F2代四种性状均出现,证明了眼色遗传属于伴性遗传。反交的卡平方测验表明实验值和观察值无显著差异,但正交的实验结果与预期值不符,经讨论,产生误差的原因如下:1.统计正交培养出来的F2代果蝇,由于数量较少,导致数据的偏差较大2. 在实验中因个人的操作引起实验结果的误差。如,在观察性状和统计结果时统计错误3. .实验中温度、湿度、光照等原因导致果蝇在子代的各种表型的比例发生变化4.因操作失误导致培养基被污染,使免疫力较差的果

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