反相高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量.doc

反相高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量.txt我们用一只眼睛看见现实的灰墙，却用另一只眼睛勇敢飞翔，接近梦想。男人喜欢听话的女人，但男人若是喜欢一个女人，就会不知不觉听她的话。反相高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩甙含量更新日期：2011-09-21 点击： 莫志江莫可元 提要目的：探讨双黄连口服液含量测定检测方法。方法：利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定双黄连口服液中黄芩甙含量。固定相为Nova-Pak C18反相柱；流动相为甲醇-水-磷酸(50500.2)；检测波长为276 nm。结果：该方法的线性范围为0.361.79 g(r=0.999 6)，平均回收率为102.62%，RSD=1.56%(n=5)。结论：本法简便，准确，灵敏度高，重现性好，可用于该制剂的含量测定。 关键词双黄连口服液；黄芩甙；反相高效液相色谱法(PR-HPLC) 中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号：1008-0805(2000)03-0196-01 Determination of Baicaline in Shuanghuanglian Oral Liquid by RP-HPLC MO Zhi-jiang, MO Ke-yuan (Hospital of Guangxi Autonomous Region, Nanning 530021, China) AbstractOBJECTIVE:The content of baicaline in Shuanghuanglian oral liquid was determined by RP-HPLC.METHOD: RP-HPLC analysis was carried out by using Nava-Pak C18column and methanol-water-phosphoric(50500.2) as the mobile, the detection wave length was 276 nm.RESULTS: The method was linear within the range of0.361.79 g(=0.999 6),the average recovery was 102.62%, the RSD=1.56%(n=5). CONCLUSION: The method was simple, accruate, highly sensitive and reproducible. It may be used for the quantitative determination of baicaline in Shuandhuanglian oral liquid. Key wordsShuanghuanglian oral liquid；Baicaline；RP-HPLC 双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘三味中药经提取精制而成，主要用于外感病的表里热证，用于治疗上呼吸道感染，扁桃体炎，咽炎，病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病。黄芩甙是其有效成分之一。其含量测定方法有紫外分光光度法1、薄层扫描法2及高效液相色谱法3，最常用的是薄层扫描法，中国药典亦规定使用薄层扫描法测定其中黄芩甙的含量。本文建立了不经提取分离而直接测定双黄连口服液中黄芩甙含量的高效液相色谱法。 1仪器与试药 1.1仪器：Waters高效液相色谱仪(美国)；510泵U6K进样器，486 UV检测器，746数据处理器；Mettler AE-240分析天平(1/10万)。 1.2试药：黄芩甙对照品(中国药品生物制品检定所，批号0715-9708)，甲醇(优级纯)，双黄连口服液(郑州众生制药厂)。 2方法与结果 2.1色谱条件：色谱柱为 Nova-Pak C18反相柱(4 m，250 mm4 mm，大连依利特科学仪器有限公司)；柱温40；流动相为甲醇-水-磷酸(50500.2)；流速0.8 ml/min；纸速0.5 cm/min；检测波长276 nm；灵敏度0.05 AUFS。 2.2供试液及空白对照液的制备：精密吸取双黄连口服液0.5 ml，置100 ml容量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，混匀即可作为供试液。另取处方中除黄芩外的其余药材，按规定工艺制备成双黄连口服液后，依供试液制备方法制成空白液。 按以上色谱条件测定，黄芩甙与其他组分均能达到基线分离，结果见图1。 图1 双黄连口服液的高效液相色谱图 A-黄芩甙对照品 B-供试品 C-空白对照品 a-黄芩甙 2.3线性关系：精密称取一定量的黄芩甙对照品，用50%甲醇配成0.071 7 mg/ml的标准溶液。精密吸取5，10，15，20，25 l进样测定峰面积，以黄芩甙量(g)为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，得回归方程Y=807 363X212 584， =0.999 6。结果表明黄芩甙在0.361.79 g间有良好的线性关系。 2.4加样回收率：精密吸取已知黄芩甙含量的双黄口服液0.5 ml，精确加入一定量的黄芩甙对照品，按上述方法测定，结果见表1。 表1加样回收率结果(n=5) 编号 投入量 m/mg 测得量 m/mg 回收率(%) 平均回收率 (%) RSD (%) 1 3.187 3.227 101.26 2 6.374 6.682 104.83 3 3.984 4.031 101.18 102.62 1.56 4 4.781 4.890 102.28 5 2.550 2.640 103.53 2.5样品的测定：分别吸取对照品溶液和供试品溶液20 l进样测定，按外标二点法计算样品中黄芩甙含量，结果见表2。 表2RP-HPLC测定双黄连口服液中黄芩甙含量结果(n=5) 批号 含量C/mg.ml-1 RSD(%) 9712104 10.68 1.58 9805135 10.40 2.01 9811053 9.70 3.28 9901032 9.97 1.97 2.6精密度试验：吸取对照品标准液20 l，重复进样5次，测定峰面积，结果得RSD=0.78%。 2.7重现性试验：取同一批号样品5份，分别按供试品溶液制备，测定，计算，结果得=10.41(mg/ml)，RSD=1.51%(n=5)。 3讨论 制备标准溶液及供试品溶液用50%甲醇作溶剂比用纯甲醇作溶剂所得的色谱峰要敏锐，且拖尾减少。也可使用水作为供试品的溶剂，色谱峰也相当好。此外，使用纯甲醇稀释样品可使溶液出现混浊、沉淀。 用本法测定双黄连口服液中黄芩甙的含量，有效成分分离较好，制剂中的其它成分基本不形成干扰。该方法简便，稳定，准确，重现性好，可作为该制剂含量测定的检测方法。 作者简介：莫志江(1964-)，男(汉族)，广西南宁市人，现任广西壮族自治区人民医院药剂科主管药师. 作者单位：莫志江（广西壮族自治区人民医院，广西 南宁530021） 莫可元（广西壮族自治区人民医院，广西 南宁530021） 参考文献： 1李茂森.一阶导数光谱法测定双黄连口服液中黄芩甙