最新中图版选修1第一章第1节微生物的分离和纯培养ppt课件.ppt

第一章微生物培养技术 第一章微生物培养技术 1 第1节微生物的分离和纯培养 2 学习导航1 了解有关微生物及其培养基的基础知识 2 理解消毒和灭菌的原理 方法 进行无菌技术的操作 重点 3 理解微生物接种的方法步骤 进行大肠杆菌的分离和纯培养 重 难点 3 一 培养基1 含义 由于微生物代谢方式的不同 因而对营养物质的需求也是有差异的 根据微生物 的需要 将各种营养物质混合在一起 配制成适合微生物生存的营养基质 生长繁殖和代谢 4 2 平板培养基将 后的固体培养基基质倒入 冷却凝固后制成的培养基 二 接种技术1 含义 把相应的研究对象移入 中的过程 溶化 无菌培养皿 培养基 5 2 方法在平板培养基上接种的方法有平板划线法 法 法等 平板划线法又包括连续划线法和交叉划线法 稀释涂布平板 稀释混合平板 6 判一判 1 微生物是指由细胞组成的一类个体微小的生物 2 在微生物分离和纯培养时 需要无菌操作 3 一般我们饮用的奶制品 多采用高温灭菌法 4 灭菌和消毒都能够杀死细菌的芽孢等休眠体 7 三 无菌技术1 目的和要求在微生物的分离和纯培养过程中 为了防止 污染 必须采用 进行操作 在实验过程中 要对所用的器材 培养基进行严格的灭菌 对工作场所进行消毒 外来杂菌 无菌技术 8 2 灭菌和消毒 强烈 所有 温和 高温灭菌 射线 化学药剂 9 四 大肠杆菌的分离和纯培养1 方法 2 步骤 平板划线分离法 牛肉膏蛋白胨琼脂 接种环 连续 交叉 菌落 倒置 10 想一想划线法为什么可以分离出大肠杆菌 提示 随着线的延长 菌数越来越少 最终可分离得到由一个细菌繁殖而来的菌落 11 要点一无菌技术1 概念 无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染 保持微生物的纯培养 而且在分离 转接时亦能防止其他微生物污染 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵 无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开 主要包括以下几个方面 12 1 对实验操作的空间 操作者的衣着和手 进行清洁和消毒 双手用肥皂洗净 擦干后用75 酒精消毒 2 将用于微生物培养的器皿 接种用具和培养基等进行灭菌 培养基用高压蒸气灭菌 接种环用火焰灼烧来灭菌 3 为避免周围环境中微生物的污染 实验操作应在酒精灯火焰附近进行 13 4 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 2 常见消毒灭菌方法及其适用范围 14 15 特别提醒无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外 还能有效避免操作者自身被微生物感染 16 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌锅 酒精 火焰灼烧等几种不同的处理 这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 A 接种环 手 培养基B 高压锅 手 接种环C 培养基 手 接种环D 接种环 手 高压锅 17 解析 此题考查学生对无菌技术的掌握 高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备 通常用于培养基的灭菌 用酒精擦拭双手是消毒的一种方法 火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌 适用于微生物的接种工具 如接种环 答案 C 18 变式训练下列操作错误的是 A 用酒精擦拭双手B 用氯气消毒水源C 实验室用紫外线进行消毒D 玻璃器皿 吸管 培养皿 用酒精直接擦拭即可达到彻底灭菌的目的 19 解析 选D 玻璃器皿 金属用具等耐高温 需要保持干燥的物品 应采用干热灭菌法进行灭菌 而用酒精直接擦拭达不到彻底灭菌的目的 20 要点二探究微生物的分离和纯培养1 菌落的含义及菌种的鉴定在固体平板培养基上 由单个微生物细胞或孢子繁殖而来的一个具有特定形状的子细胞群体 称为菌落 其各方面特征 如形状 大小 表面 边缘 隆起 透明度 颜色等均可作为菌种鉴定的依据 21 2 纯化培养纯培养过程中如果划线接种形成的菌落特征不一致 说明含杂菌 需要进一步划线挑菌 直至纯化 3 培养不同的微生物 需要不同的pH 22 1 在大肠杆菌培养过程中 除考虑营养条件外 还要考虑 和渗透压等条件 由于该细菌具有体积小 结构简单 变异类型容易选择 等优点 因此常作为遗传学研究的实验材料 23 2 在微生物培养操作过程中 为防止杂菌污染 需对培养基和培养皿进行 消毒 灭菌 操作者的双手需要进行清洗和 静止空气中的细菌可用紫外线杀灭 其原因是紫外线能使蛋白质变性 还能 24 3 若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数 要想使所得估计值更接近实际值 除应严格操作 多次重复外 还应保证待测样品稀释的 4 通常 对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状 大小等菌落特征对细菌进行初步的 25 5 培养大肠杆菌时 在接种前需要检测培养基是否被污染 对于固体培养基应采用的检测方法是 6 若用大肠杆菌进行实验 使用过的培养基及其培养物必须经过 处理后才能丢弃 以防止培养物的扩散 造成污染 26 解析 1 大肠杆菌具有体积小 结构简单 变异类型容易选择 易培养 生活周期短等优点 培养过程中 除考虑营养条件外 还要考虑温度 酸碱度和渗透压等条件 27 2 灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物 所以对培养基和培养皿要进行灭菌 而消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物 所以操作者的双手需要进行清洗和消毒 紫外线能使蛋白质变性 还能损伤DNA的结构 28 3 稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 进行培养 应保证样品稀释的比例合适 4 对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状 大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定 29 5 培养大肠杆菌时 在接种前需要检测培养基是否被污染 对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间 观察培养基上是否有菌落产生 6 因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素 并可能导致肠管出现严重症状 使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃 以防止培养物的扩散 造成污染 30 答案 1 温度酸碱度易培养