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第45讲DNA的粗提取与鉴定 考点DNA的粗提取与鉴定的原理及步骤高考再现 总纲目录 1 提取思路 利用DNA和其他物质在理化性质方面的差异 提取DNA 1 DNA粗提取与鉴定的原理 考点DNA的粗提取与鉴定的原理及步骤 2 DNA的性质 2 DNA粗提取与鉴定的实验过程 以鸡血细胞为例 材料的选取 选用DNA含量相对较高的生物组织破碎细胞 向鸡血细胞中加入蒸馏水 用玻璃棒搅拌后 用纱布过滤并收集滤液去除杂质 利用DNA在不同浓度NaCl中溶解度不同 通过控制NaCl溶液浓度去除杂质DNA的析出 将处理后的溶液过滤 加入与滤液体积相等的 冷却的 体积分数为95 的酒精溶液 DNA的鉴定 在溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺试剂 混合均匀后将试管在沸水中加热5min 溶液变成蓝色 1 用菜花代替鸡血作为实验材料进行 DNA粗提取与鉴定 的实验 其操作步骤相同 2 在提取DNA时 如果没有鸡血材料 可用猪血代替 3 进行DNA粗提取与鉴定实验时 加入洗涤剂后用力进行快速 充分的研磨 4 用不同浓度的NaCl溶液反复溶解和析出DNA可去除杂质 5 将丝状物溶解在2mol L的NaCl溶液中 加入二苯胺试剂即呈蓝色 6 利用鸡血进行 DNA粗提取与鉴定 的实验中 将丝状物溶解在2mol LNaCl溶液中 加入二苯胺试剂即呈蓝色 下图是 DNA粗提取与鉴定 实验的相关操作步骤 请仔细观察并分析 1 操作 都加入蒸馏水 其目的相同吗 2 操作 加入酒精的目的是 此时搅拌要注意 3 加入2mol LNaCl溶液的目的是 答案 1 不相同 使鸡血细胞吸水涨破释放核物质 是稀释NaCl溶液使其浓度接近0 14mol L 2 析出DNA 去除溶于酒精的杂质沿一个方向轻缓地搅拌 3 使DNA再次溶解 1 操作过程 方法及注意问题 2 特别提醒 1 加入酒精和用玻璃棒搅拌时 动作要轻缓 以免加剧DNA分子的断裂 2 尽量使用塑料器具 因为DNA易被玻璃制品吸附 影响最终提取量 提取用于鉴定时可用玻璃棒卷出 3 冷却的酒精溶液具有以下优点 抑制核酸水解酶活性 防止DNA降解 降低分子运动易于形成沉淀析出 低温有利于增加DNA分子的柔韧性 减少断裂 4 玻璃棒在DNA提取中的作用 第一次是沿同一个方向快速搅拌 加速鸡血细胞的破裂 利于释放DNA 防止打碎DNA分子 中间步骤是沿同一个方向缓慢搅拌 防止打碎DNA 避免提取的DNA分子过少 影响实验效果 最后一次是沿同一个方向缓慢搅拌并轻轻旋转 防止打碎DNA 利于絮状物缠在玻璃棒上 考向一DNA粗提取与鉴定的原理1 2018江苏南京 盐城一模 下列有关 DNA的粗提取与鉴定 实验的叙述 错误的是 B A 鸡血细胞是较理想的实验材料B NaCl溶液浓度越高 DNA的溶解度越大C 在用酒精析出DNA时 最好使用95 的冷酒精D DNA溶液中加入二苯胺试剂 沸水浴加热 检测结果呈蓝色 解析鸡血细胞含有细胞核 细胞核内含有DNA 且鸡血容易获得 因此提取DNA时常选用鸡血作为实验材料 A正确 当NaCl溶液的浓度低于0 14mol L时 随着NaCl溶液浓度的升高 DNA的溶解度逐渐降低 当NaCl溶液的浓度高于0 14mol L时 随着NaCl溶液浓度的升高 DNA的溶解度逐渐升高 B错误 DNA不溶于酒精溶液 95 的冷酒精凝集效果最佳 C正确 在DNA粗提取和鉴定实验中 DNA溶液中加入二苯胺试剂后需水浴加热呈蓝色 D正确 2 下列有关 DNA粗提取与鉴定 实验原理的叙述正确的是 B A DNA在NaCl溶液中的溶解度 随NaCl溶液浓度的降低而减小B 利用DNA不溶于酒精的性质 可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC DNA是大分子有机物 不溶于水而溶于某些有机溶剂D 温度在80 100 下 蛋白质会变性 而DNA不会 解析DNA在0 14mol LNaCl溶液中的溶解度最低 高于或低于这个浓度 溶解度上升 A错误 DNA不溶于酒精 利用此性质可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA B正确 DNA是大分子有机物 溶于盐溶液不溶于有机溶剂酒精 C错误 DNA在温度为80 100 以上时变性 D错误 归纳拓展4种试剂五种作用 考向二DNA粗提取与鉴定的步骤 3 2018江苏苏州质量调研 下列有关 花菜细胞中DNA的粗提取 实验的叙述 正确的是 C A 在研磨过程中加入洗涤剂的作用是为了瓦解细胞壁B 实验过程中两次加入蒸馏水的作用相同C 将滤液放在60 75 下保温的作用主要是除去滤液中的杂质D 在滤液中加入冷却的等体积分数酒精的原理是DNA可溶于酒精 解析在研磨中加入洗涤剂的作用是为了瓦解细胞膜 A错误 实验中两次加入蒸馏水 第一次的目的是使成熟的鸡血细胞吸水涨破释放出DNA 第二次的目的是稀释NaCl溶液 使DNA从NaCl溶液中沉淀析出 可见 实验过程中两次加入蒸馏水的作用不同 B错误 将滤液放在60 75 下保温 其原理是利用DNA和蛋白质对高温的耐受性不同 从而使蛋白质变性 与DNA分离 以除去滤液中的杂质 C正确 在滤液中加入冷却的等体积分数酒精的原理是DNA不溶于酒精 但细胞中的某些蛋白质可溶于酒精 利用这一原理 可将DNA与蛋白质进一步地分离 D错误 4 如图是 DNA粗提取与鉴定 实验中的两个操作步骤示意图 相关叙述错误的是 多选 图1图2 A 图1中溶液a是0 14mol L 1的NaCl溶液B 图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精 而蛋白质等杂质不溶C 图2所示实验操作中有一处明显错误 可能导致试管2中蓝色变化不明显D 图2试管1的作用是证明2mol L 1NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色 答案AB图1中溶液a是2mol L 1的NaCl溶液 A错误 图1所示操作的原理是DNA不能溶于酒精 而蛋白质等杂质能溶 B错误 图2所示实验操作中有一处明显错误 试管2中未将DNA溶于2mol L 1的NaCl溶液中 可能导致试管2中蓝色变化不明显 C正确 图2试管1的作用是证明2mol L 1NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色 D正确 技能提炼DNA粗提取与鉴定实验中的 2 4 4 1 加蒸馏水2次1加到鸡血细胞液中 使血细胞吸水涨破 2加到含DNA的2mol L 1NaCl溶液中 使NaCl溶液的物质的量浓度下降到0 14mol L 1 使DNA析出 2 用NaCl溶液4次1加2mol L 1NaCl溶液 溶解提取的细胞核物质 2加0 14mol L 1NaCl溶液 使DNA析出 3加2mol L 1NaCl溶液 溶解滤取的DNA黏稠物4用2mol L 1NaCl溶液 溶解丝状物用于鉴定DNA 3 4次过滤的比 高考再现 1 2018江苏单科 关于还原糖 蛋白质和DNA的鉴定实验 下列叙述正确的是 D A 在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂 温水浴后液体由蓝色变成砖红色B 在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂 液体由蓝色变成紫色C 提取DNA时 在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐 充分研磨 过滤并弃去滤液D 将DNA粗提物溶解在2mol LNaCl溶液中 加入二苯胺试剂 沸水浴后液体由无色变成蓝色 解析检测还原糖 用斐林试剂 需要水浴加热 出现砖红色沉淀 甘蔗茎中主要含蔗糖 蔗糖为非还原糖 一般不用于还原糖的检测 A错误 检测蛋白质 用双缩脲试剂 B错误 提取DNA时 加入适量洗涤剂可以破坏细胞膜 释放DNA DNA溶解在实验溶液中 经充分研磨 过滤并保留滤液 C错误 检测DNA 用二苯胺试剂 沸水浴后出现蓝色 D正确 2 2015江苏单科 图1 2分别为 DNA的粗提取与鉴定 实验中部分操作步骤示意图 下列叙述正确的是 多选 图1图2 A 图1 2中加入蒸馏水稀释的目的相同B 图1中完成过滤之后保留滤液C 图2中完成过滤之后弃去滤液D 在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质 答案BCD图1加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破 图2加入蒸馏水的目的是稀释NaCl溶液 A错误 图1中加入蒸馏水后 DNA存在于滤液中 B正确 图2中加入蒸馏水后 NaCl溶液浓度降低 DNA析出 所以弃去滤液 C正确 嫩肉粉主要成分是蛋白酶 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉可将蛋白质水解成小分子肽或氨基酸 除去蛋白质 D正确 3 2014江苏单科 下列关于 DNA的粗提取与鉴定 实验叙述 错误的是 C A 酵母和菜花均可作为提取DNA的材料B DNA既溶于2mol LNaCl溶液也溶于蒸馏水C 向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌 可见玻棒上有白色絮状物D DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热 冷却后变蓝 解析酵母菌和菜花细胞的细胞核都含有DNA 可作为提取DNA的材料 A正确 DNA能溶解在不同浓度的NaCl溶液中 且溶解度随着NaCl浓度的变化而改变 在利用渗透作用原理向生物材料中加入蒸馏水时 一方面促使细胞吸水涨破 另一方面释放出的DNA也就溶解在蒸馏水中 B正确 向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌 目的是加快细胞吸水涨破 释放其中的DNA 而DNA则溶解在蒸馏水中 因此玻棒上不可能有白色絮状物 C错误 DNA溶液与二苯胺试剂经沸水浴加热会变蓝 D正确 4 2013江苏单科 某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验 操作错误的是 A A 加入洗涤剂后用力进行快速 充分的研

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