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文档简介

知识改变命运,学习成就未来高中生物选修教材知识集锦(下)19、基因的结构 真核细胞 非编码区 基因结构 编码区 内含子:非编码序列 外显子:能编码蛋白质内含子外显子 原核基因无外显子内含子之说 主要分布于微生物 剪刀:限制性内切酶 特异性(专一性) (200多种) 获得粘性末端 20、基因的操作工具 针线:DNA连接酶:扶手(磷酸二脂键)不是踏板(氢键) 条件复制保存多切点标记基因 种类:质粒、病毒 运输工具:运载体 染色体外小型环状DNA 存在于细菌、酵母菌 质粒特点 质粒是常用的运载体 最常用:大肠杆菌 对宿主细胞的生存无 基因工程 (基因拼接技术、DNA重组技术、转基因技术) 决定性作用 直接分离 常用鸟枪法 提取目的基因 人工合成(反转录法、根据已知AA序列合成DNA) 目的基因与运载体结合 同一种限制酶 21、基因操作步骤 将目的基因导入受体细胞细菌、酵母菌、动植物 CaCl2处理细胞壁 ( 受精卵好 繁殖速度快) 目的基因的检测和表达:标记基因、目的基因是否表达? 逆转录 碱基互补配对 mRNA 单链DNA 双链DNA 推测 推测 合成 氨基酸序列 mRNA序列 DNA碱基序列 目的基因 药(胰岛素、干扰素、白细胞介素、乙肝疫苗) 22、基因工程的成果 治病:基因诊断与基因治疗(基因替换) 新品种(转基因) 食品工业(食物) 环境监测(DNA分子杂交 探针) 生物固氮、基因诊断、基因治疗、单细胞蛋白(微生物菌体本身)、 单克隆抗体、生物导弹(单抗+抗癌药物)23、 间接联系 核心 核膜 高尔基体 内质网 细胞膜 线粒体膜 间接(具膜小泡) (内吞外排说明双向) 分泌蛋白:抗体、蛋白质类激素、胞外酶(消化酶)等分泌到细胞外 粗面内质网上的核糖体 内质网运输加工 高尔基体加工 成熟蛋白质 胞外 24、生物膜系统(不等于生物膜):细胞膜、核膜及由膜围绕而成的细胞器 离体营养物质+激素 适宜温度+无菌 植物组织培养 离体愈伤组织根芽(胚状体)植物体 选无病毒 尖(生长点) 紫草素 25、植物细胞工程 两种不同杂种细胞新植物体 植物体细胞 去掉细胞壁原生质体杂种细胞新植物体 杂交 种间存在生殖隔离 不能有性杂交 好处:克服远源杂交不亲和障碍 培育新品种 是其它动物细胞工程技术的基础 动物细胞培养 液体培养基:动物血清 26、 动 取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 物 用胰蛋白酶处理 细 原代培养传代培养(细胞株细胞系 遗传物质发生改变) 胞 灭活的病毒做诱导剂+物理、化学方法 工 动物细胞融合 最重要用途:制备单克隆抗体 程 理论基础:细胞膜的流动性 单克隆抗体指单个B淋巴细胞经克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体(优点:特异性强、灵敏度高)。每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体(共百万种) *杂交瘤细胞 *生物导弹 27、微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物 质粒(小型环状DNA)控制抗药性、固氮、抗生素生成 核区(大型环状DNA)控制主要遗传性状 有的细菌有荚膜、芽孢、鞭毛 碳源:无机/有机碳源 自养/异养28、 微生物生长 氮源:加不加额外的氮源 所需的营养物质 生长因子:(维生素、氨基酸、碱基构成酶和核酸) 水: 无机盐: 固体培养基:分离、鉴定、计数 物理性质 半固体培养基:运动、保藏菌种 液体培养基:工业生产 29、培养基 天然培养基:工业生产 化学性质 合成培养基:分类鉴定 选择培养基 青霉素选出酵母菌、霉菌等真菌 用途 NaCl:金黄色葡萄球菌 鉴定培养基:伊红美蓝大肠杆菌深紫色和金属光泽 自己设计实验:把混合在一起的圆褐固氮菌、硝化细菌、大肠杆菌区分开,并筛选纯种。 酶合成的调节 诱导酶:基因和诱导物控制 30、微生物代谢调节 酶活性的调节 结构改变 可逆 快速 准确 必需物质,一直产生 氨基酸、核苷酸、维生素 初级代谢产物 无种的特异性 多糖、脂类 31、代谢产物 非必需物质,一定阶段 抗生素、毒素 次级代谢产物 有种的特异性 四素 色素、激素 32、微生物群体生长曲线: 3 (1)调整期:代谢活跃,开始合成诱导酶 初级代谢产物收获的最佳时期 (2)对数期:形态和生理特性稳定,代谢旺盛;科研用菌种,接种最佳时期 (3)稳定期:次级代谢产物收获最佳时期,芽孢生成(种内斗争最剧烈) 及时补充营养物质,可以延长稳定期 (4)衰亡期:多种形态,出现畸形,释放次级代谢产物 生存环境恶劣 与无机环境斗争最激烈的是4衰亡期。 营养物质消耗有害代谢产物积累PH不适宜导致3.4时期的出现。 注意:前三个时期类似“S”型增长曲线,但是多了衰亡期33、影响微生物生活的环境因素 PH值:影响酶的活性、细胞膜的稳定性,从而影响微生物对营养物质的吸收 温度:影响酶和蛋白质的活性 O2浓度:产甲烷杆菌 34、高压蒸汽灭菌法:1/5、1/2、2/3、75% 由里向外、细密、不重复 溶化后分装前必须要 调节pH 细菌培养的过程:培养基的配制灭菌搁置斜面接种培养观察 实例:谷氨酸发酵(黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌) 概念: 菌种选育:诱变育种、基因工程、细胞工程 培养基的配制:成分、比例,pH适宜 35、发酵工程 内容 灭菌:去除杂菌 扩大培养和接种:菌种多次培养达到一定数量 发酵过程:(中心阶段)控制各种条件,生产发酵产品 分离提纯 菌体:过滤、沉淀(单细胞蛋白即微生物菌体本身) 代谢产物:蒸馏、萃取、离子交换 应用 医药工业:生产药品和基因工程药品 食品工业:传统发酵产品、食品添加剂、单细胞蛋白等 36、 C/N=4/1 菌体大量繁殖

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