微生物实验室质量控制及质量保证-副本.ppt

临床微生物实验室质量控制及质量保证 微生物实验室质量控制 为保证检测结果的准确性 可靠性 临床细菌室室内质控需要 对人员进行评估建立质量控制标准 选择和适的质控物对标本质量进行评价对试剂 培养基 仪器设备进行监测对检测过程进行监控对检测结果和结果的临床应用进行评估 临床微生物实验室质量控制环节 标本合格判定培养基 试剂仪器设备 结果报告 标本留取运送 分析前 分析后 分析中 人员 人员 具备相关教育背景 每年接受专业技术及知识培训 熟悉微生物实验室操作规程 消毒灭菌及生物安全知识 包括新员工培训 老员工的再培训以及员工工作能力评估 人员资质 包括其对诸如分析前 中 后特定阶段的专业经验和熟练试验技术 并直接参与质控工作 分析前质量控制 分析前质量控制 建立质量控制标准 SOP 制定自检测申请 标本采集开始到发出检测结果报告止的全过程的操作和管理程序微生物检验标本质量控制实验室应给标本采集者提供标本采集和运送的指导手册实验室应持续监测标本采集和运送过程实验室应对标本质和量进行评估不合格标本拒收 标本采集和运送 标本采集和运送是细菌培养成功的最最重要的环节但由于标本的采集和运送常有护士或医生或病人自己完成 所以也是最不容易控制的环节 造成的后果是 标本污染 阳性率低 标本收集基本原则 1 在抗菌药物使用前采集标本2 采样时严格执行无菌操作3 采样后立即送检4 棉拭子标本宜用运送培养基5 标本容器须灭菌处理 但不得使用消毒剂 6 送检标本应注明来源和检验目的 标本收集和运送的质量控制 向临床提供标本采集说明 sop 不同部位标本的采集方法采集最佳时间 次数标本采集量正确时间 部位 方法等对收集和运送标本的容器控制无菌 无防腐剂 足够大 安全严密 不易破碎 选择合适的运送培养基 标本收集和运送的质量控制 正确的运送方式标本因冷藏及pH改变或在氧气中暴露 可能减少很多种细菌的存活时间脑膜炎球菌 淋病奈瑟菌 流感嗜血杆菌 肺炎链球菌 沙门菌 志贺氏菌 霍乱弧菌 空肠弯曲菌及厌养菌定量评价细菌数量的培养 尿标本 运送时间 需进行微生物学检测的所有标本 应在收集后2小时内送到实验室 微生物检验标本的运送及贮存条件 有可靠的标本质量评价方法 有可靠的标本质量评价方法 不合格标本拒收 除非不能再采集的标本 否则不予检测 如果培养或检测 要对结果进行说明 样本拒收标准 1 样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不符 2 样本以不当的温度 运送培养基及容器运送 3 样本量不足 已被防腐剂固定或运送时间过长 4 样本外漏 容器破损及明显受污染的标本 5 样本的检验项目申请不适合进行 6 特殊的难以再次获得标本 与临床医师联系后再做相应处理 分析中质量控制 分析中质量控制 培养基主要试剂自制生化鉴定试剂染色液细菌 酵母菌鉴定系统药物敏感试验仪器设备 对临床微生物实验室室内质控的基本要求 只能满足分析中对主要培养基 试剂的质控需要 是试验室进行相应操作的应做到或至少要做到 培养基的质量控制 培养基的质量控制 购买有质量保证标准的商品培养基 保存制造商质量控制性能合格的证明文件 购买无质量保证标准的商品或自制培养基 每批号产品检测相应的性能 如无菌试验 生长试验 生长抑制试验等 最好使用标准菌ATCC美国典型菌株保藏中心NCTC英国国家典型菌种保藏中心 培养基质量控制 肉眼检查培养基的颜色 均一性 厚度 气泡等无菌试验100块则任意选取10块平板或管装培养基35 培养24小时 无菌生长为合格 生长试验生长抑制试验 必要时 常用培养基已知菌生长试验 常用培养基已知菌生长试验 常用生化反应培养基的质量控制标准 质控要求 每批试剂使用前应使用相应阴性和阳性反应 标准 菌株做质控 试剂质量控制 具体要求 每批次或使用当天用相应的标准菌株作阴 阳性对照控 氧化酶试验 血浆凝固酶试验 过氧化氢酶试验 内酰胺酶 过氧化氢酶 H2O2 阳性对照 金黄色葡萄球菌ATCC25923阴性对照 粪肠球菌ATCC29212 区别链球菌属 葡萄球菌属 少见G 菌 G 菌 血浆凝固酶试验 阳性对照 金黄色葡萄球菌ATCC25923阴性对照 表皮葡萄球菌ATCC12228 区别金黄色葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌 氧化酶 阳性对照 绿脓假单胞菌ATCC27853阴性对照 大肠杆菌ATCC25922 氧化酶试验G 菌区别 肠杆菌科 非发酵菌 弧菌科 少见G 菌等 内酰胺酶 阳性对照 金黄色葡萄球菌ATCC25923阴性对照 流感嗜血杆菌ATCC29247 判断苛养菌流感嗜血杆菌 卡他布兰汉菌和淋病奈瑟菌对青霉素 阿莫西林和氨苄西林的敏感性 染色液质控 革兰染色 G 金黄色葡萄球菌ATCC25923G 大肠埃希菌ATCC25922抗酸染色 阳性 Mube trculosisATCC25177阴性 大肠埃希菌ATCC25922 要求 每批试剂并每周 照片革兰氏抗酸 设备质量控制 新设备的检查 包括如安全性 配件 有无破损等新设备比对实验 与旧设备比对或与参考设备或方法比对 设备运行记录 维护保养记录 维修记录制定和执行标准操作规程培训操作人员 手工 半自动 自动鉴定系统 使用厂家规定的标准菌株对相应试剂进行质控 每批试剂至少1次使用厂家规定的标准菌株做质控 应符合预期结果当新仪器启用时 新批号试剂启用时 结果出现问题时都需要做质控 设备质量控制 天平 pH计 离心机 加样枪 温度计 生物安全柜 高压锅等需进行校准冷藏和培养等设备应进行温度监控并记录 药物敏感试验质量控制 纸片扩散法 每周至少1次 更换药物或培养基时要做质控 常见菌 大肠埃希菌ATCC25922 金黄色葡萄球菌25923 绿脓假单胞菌27853质控 手工法 稀释法 每周至少1次 最好每次试验做控 解释 常规试验通常使用微量肉汤稀释法 标准做法是每批试验标准菌株与临床分离株同时做 金黄色葡萄球菌29213 大肠埃希菌ATCC25922绿脓假单胞菌27853质控 药物敏感试验质量控制 药物敏感试验 仪器法 使用厂家规定的标准菌株对相应试剂进行质控 每批试剂至少1次 当试验结果异常 不稳定 或缺少经验的人员操作时 应增加质控的频率 纸片扩散法药敏试验质量控制条件及质控菌株 纸片扩散法药物敏感试验质量控制 连续质控检测1次 天共30天 获30个检测值如 1 3个值超出范围 可行每周一次质控2 4个值超出范围 继续做每天一次质控3 每当试剂 药敏纸片 培养基改变时 应重新行30天的质控4 每周一次质控时如某周出现一次失控 则应连续做5次质控 零失控时作每周一次质控 否则行连续30次质控 药物敏感试验质量控制 药敏纸片保存 药敏纸片应在有干燥剂的容器内低温 20 保存 少量日常工作用纸片4 保存 药敏纸片从冰箱取出后 应平衡至室温 从而减少暖空气与冷的纸片接触产生的冷凝 纸片应在有效期内使用 过期应该丢弃 药物敏感试验的规则 目前 我国绝大多数临床微生物实验室均参考美国国家临床实验室标准委员会 CLSI 出版的对各类细菌进行常规药敏试验和报告时的选药指南 CLSI CLSI clinicalandlaboratorystandardsinstitute 美国临床实验室标准化研究所 已被我国卫生部指定为部颁标准 每年有新版 实验室应该认真浏览CLSIM100内容 将新的推荐内容融入到实验室的常规测试中 使之形成可行的操作规范M100每年更新一次M02 M07每三年更新一次 2011年CLSI主要变化 修正 肠杆菌科 头孢唑啉折点 肠杆菌科 碳青霉烯类折点 铜绿 氨曲南和头孢菌素折点 再评价 附录A 罕见AST结果的核实增加 表格 溶血链球菌组可诱导克林霉素耐药 厌氧菌表格 肠杆菌科细菌天然耐药 肠杆菌科 头孢唑林折点的修订 头孢唑啉的新折点是建立在每8小时2克的给药剂量上 肠杆菌科 碳青霉烯类折点的修订 肠杆菌科 碳青霉烯类折点的修订 分析后质量控制 分析后质量控制 报告的核对与审核分级报告报告结果的保存加强与临床的沟通交流 报告的核对与审核 在发出报告前确保所有室内质控在控 一般检验的审核 检测项目与申请单内容是否一致 病人基本信息 检测项目与申请单内容是否一致 细菌的分离和鉴定流程是否符合标准 鉴定的细菌和临床标本是否相符 细菌的耐药情况是否合理 对于连续送检的患者 结果是否有变化 报告的核对与审核 异常检验结果的审核 如细菌鉴定结果与药敏实验结果相矛盾 与临床基本信息及诊断有矛盾 检验结果之间关系不合理 此次结果与近期测定结果不相符 应作如下分析 对检验过程进行审核 如标本编号是否正确 结果录入是否准确 分析是否可能存在标本采集 运输及保存中的问题 并及时与临床联系 分析是否可能存在与治疗及病程进展有关的问题 并及时与临床联系 如对以上情况无法确认应对标本进行必要的复检 所有重复或特殊处理均应在备注栏中标明 分级报告 一级报告 血液骨髓标本培养瓶发现报警后 立即涂片做革兰染色 将涂片结果电话通知临床医生 并询问医生用药情况 详细填写 危机报告单 包括阳性报警时间 革兰染色结果 记录报告具体时间 报告者及接收者等 二级报告 报告直接药敏结果及初步鉴定结果 三级报告 书面报告细菌鉴定结果 种属 正式药敏试验 结果解释或建议等 报告结果的保存 应保留所有检验申请单及检验流程单备查 检验申请单及检验流程单保留2年 原始结果的电子数据在指定电脑中保存 期限3年 加强与临床的沟通交流 1 提高自身能力 加强与临床医师 护士的沟通交流 做好标本的质量控制 2 加强与临床医生联系 提供良好的解释和咨询服务 使临床医生能正确理解和解