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文档简介
二 基因表达载体的构建 核心步骤 先用同一种限制酶分别切割目的基因和质粒 再用DNA连接酶将二者连接 形成重组DNA分子 三 将目的基因导入受体细胞 转化 常用的受体细胞 有大肠杆菌 枯草杆菌 酵母菌和动植物细胞等 1 受体细胞是植物细胞 农杆菌转化法 主要侵染双子叶植物 伤口分泌酚类化合物吸引农杆菌 基因枪法花粉管通道法 1 土壤农杆菌法 2 基因枪法 3 花粉管通道法 2 受体细胞是动物细胞 显微注射法注入动物受精卵 2020 3 16 9 可编辑 1982年 世界上第一例体型比普通小鼠大1 8倍的转基因超级小鼠诞生 3 受体细胞是微生物 将目的基因导入原核生物的好处是什么 繁殖快 多为单细胞 遗传物质相对较少要想使重组DNA顺利进入细菌细胞内 最大的难题是什么 一般用CaCl2处理 改变细胞膜的通透性 使得重组DNA能够进入细胞 四 目的基因的检测与鉴定 检测转基因生物的DNA是否插入目的基因检测目的基因是否转录出了mRNA检测目的基因是否翻译成蛋白质检测性状 分子水平 个体水平 1 检测目的基因 DNA分子杂交技术提取转基因生物的DNA制作分子探针 目的基因的一段单链序列 进行分子杂交 2 检测mRNA 分子杂
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