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文档简介
专题2 微生物的培养与应用 课题3分解纤维素的微生物的分离 学习目标 1 简述纤维素酶的种类及作用2 掌握从土壤中分离纤维素分解菌的操作技术 纤维素 一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子多糖类化合物 一 基础知识 1 某些微生物能分解纤维素 是因为它们能够产生纤维素酶 2 纤维素酶是一种复合酶 一般认为它至少包括三种组分 即c1酶 cx酶和葡萄糖苷酶 纤维素 纤维二糖 葡萄糖 纤维素酶水解滤纸实验 取二支20ml的试管 各加入一张滤纸条 分别加11ml 10ml0 1mol l的ph为4 8的醋酸 醋酸钠缓冲液 乙试管加入1ml纤维素酶 将试管放在140r min的摇床上振荡1h 3 纤维素分解菌的筛选1 方法 刚果红染色法2 原理 纤维素刚果红 红色复合物 纤维素 纤维素酶 红色复合物消失 出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 分解 小组合作交流 请根据实验流程图和提供的三个资料 思考有关问题 然后进行实验设计 并写出详细的实验方案 在小组内进行交流 1 土壤取样的环境是怎样的 作出这种选择的理由是什么 2 选择培养基培养基对微生物是如何进行选择的 3 选择培养用液体培养基还是固体培养基 为什么 4 刚果红染色法有几种方法 怎样操作 两种方法各有哪些优缺点 选择纤维素丰富的环境 因为在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高 土壤取样 选择培养 1 用什么样的培养基进行选择培养 以纤维素为唯一碳源的培养基 只有纤维素分解菌能够生长繁殖 其他微生物生长受到抑制 2 用液体培养基还是固体培养基 为什么 液体培养基 因为可以获得更多菌体 而且进行稀释涂布操作更简单 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 1 制备培养基 参照旁栏中的比例2 涂布平板 将稀释度为104 106的菌悬液各取0 1ml涂布在培养基上30 倒置培养 挑选产生透明圈的菌落 参照课本刚果红染色法 挑选产生透明圈的菌落 一般即为分解纤维素的菌落 刚果红染色法 方法一 先培养微生物 再加
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