强直性脊柱炎患者治疗前后免疫功能和细胞因子的变化及意义(新).docx

强直性脊柱炎患者治疗前后免疫功能和细胞因子的变化及意义摘要目的：分析强直性脊柱炎患者治疗前后免疫功能和细胞因子的变化及意义 方法 选取2015年7月至2017年6月期间在我院进行治疗的80例强直性脊柱炎患者进行研究，所有患者采用益赛普和西乐葆治疗。通过BASDAI和BASFI的VAS评分比较患者治疗前后的症状体征，并测定患者治疗前后血清中IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、SIgA、IgM水平。结果 与治疗前相比，治疗后患者的BASDAI和BASFI的VAS评分均显著，降低差异有统计学意义（P 0.05）。患者治疗后的IL-4、IL-10均高于治疗前，差异具有统计学意义（P 0.05），治疗后的IL-6、IL-8均低于治疗前，差异有统计学意义（P 0.05）。患者治疗后的 IgG1、IgG3、IgA高于治疗前，差异具有统计学意义（P0.05）。患者的 IL-4 与 BASDAI 呈负相关（P0.05），IgG1和IgG3与BASDAI、BASFI 均呈正相关（P0.05），其余指标与 BASDAI和BASFI 均无相关关系。结论 强直性脊柱炎患者存在细胞因子异常和免疫球蛋白失调，治疗后有所改善，部分指标与其症状体征具有相关性。【关键词】强直性脊柱炎；免疫功能；免疫球蛋白；细胞因子Changes and significance of immune function and cytokines in patients with ankylosing spondylitis before and after treatment Abstract Objective To analyse the changes and significance of immune function and cytokines in patients with ankylosing spondylitis before and after treatment Methods 80 cases of ankylosing spondylitis patients treated in our hospital from July 2015 to June 2017 were studied , and all patients were treated with etanercept and celebrex treatment. The symptoms and signs of the patients before and after treatment were compared by the VAS scores of BASDAI and BASFI.The serum levels of IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, SIgA, IgM in serum before and after treatment were measured.Results Compared with before treatment, the BASDAI and BASFI scores of VAS patients were significantly lower, the difference was statistically significant (P 0.05). The IL-4 and IL-10 of the patients after treatment were higher than before treatment, the difference was statistically significant (P 0.05), the IL-6 and IL-8 after treatment were lower than before treatment, the difference was statistically significant (P 0.05). The IgG1, IgG3 and IgA of the patients after treatment were higher than before treatment, the difference was statistically significant (P0.05). The IL-4 of patients was negatively correlated with BASDAI (P0.05), IgG1 and IgG3 were positively correlated with BASDAI and BASFI (P0.05), and the other indexes were not related to BASDAI and BASFI.Conclusion Patients with ankylosing spondylitis have abnormal cytokines and immune globulin disorders, which have improved after treatment, and some of the indicators are related to their symptoms and signs.Key words Ankylosing spondylitis; immune function; immunoglobulin; cytokine强直性脊柱炎是一种慢性进展性炎症性骨关节病，主要表现为外周关节炎、骶髂关节炎以及侵犯中轴关节1。该病多发于青壮年男性，其患病率较高。目前对于强直性脊柱炎的发病机制尚不明确，而目前的研究结果表明，其发病机制的中免疫过程与患者T细胞活性、功能的变化有着密切的相关性，其中炎症及细胞因子在AS的发病中发挥了重要作用，抑制细胞因子的释放对强直性脊柱炎具有治疗价值2。本研究选取在我院接诊的强直性脊柱炎患者进行研究，分析其治疗前后免疫功能和细胞因子的变化及意义，现报道如下。1 材料与方法1.1 一般资料选取2015年7月至2017年6月期间在我院进行治疗的80例强直性脊柱炎患者进行研究。纳入标准：符合美国风湿病协会关于强直性脊柱炎的诊断标准3；符合CT 骶髂关节破坏，单侧级或双侧级等放射学标准；均为初诊患者且未接受过抗风湿药物及生物制剂等治疗。排除标准：合并其他脊柱、关节疾病者；有严重心、肝、肾疾病者；有重大疾病或者家族遗传病者；妊娠或哺乳期妇女。患者包括男64例，女37例；年龄2348岁，平均（35.07.2）岁；病程2月12年，平均（4.41.7）年。所有参与研究者对本研究知情并自愿参加，本研究在我院伦理委员会的许可下开展。1.2 方法所有患者采用益赛普（上海中信国健药业有限公司生产，国药准字S20050059，规格25 mg /支/盒）治疗，于大腿皮下注射，每次25mg溶解于1ml注射用水，每周二次，每次间隔3-4天。在此基础上口服西乐葆（Pfizer Pharmaceuticals LLC 生产，国药准字J20140072，规格0.2g*6粒/盒），每次1粒，每日睡前口服，4周后改为隔日服用一次，8周为一个疗程。分别于治疗前、后测定患者血清中IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、SIgA、IgM的含量。测定方法：患者晨起后采集空腹静脉血 10 ml，放置于2个抗凝管并在室温下静置2 h，以3 000 r/min的速度离心15 min，分离出血清后集中放于-20 的冰箱贮存。所有指标均采用 ELISA 试剂盒进行测定，按照试剂盒说明书的相关操作计算出样品浓度，与稀释倍数相乘即得出实际浓度。1.3观察指标（1）通过BASDAI和BASFI的VAS评分比较患者治疗前后的症状体征。BASDAI指数：用 VAS 测定患者对关于疲乏、脊柱痛、关节肿痛、局部触痛、晨僵及时间等5个症状的问题得分，0分表示最好，10分表示最差，得分4为疾病缓解，4分为疾病活动。BASFI指数：用VAS测定患者完成以下活动的难易程度：独立穿袜子或贴身衣服、弯腰拾物、从较高处取物、从没有扶手的椅子上及仰躺着的地板上站起来、站立10 min、登上1215 级台阶、向后看、完成体力活动及一整天的家务和工作，0分表示最好，10 分表示最差。（2）比较患者治疗前后的IL-4、IL-6、IL-6、IL-10、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、SIgA、IgM等指标。1.4 统计学分析选择Spss19.0软件进行数据统计，计量资料以（s）表示，采用t检验的方法比较，计数资料以n（%）表示，采用2检验的方法比较，P0.05时，认为差异有统计学意义。2 结果2.1 BASDAI和BASFI的VAS评分变化与治疗前相比，治疗后患者的BASDAI和BASFI的VAS评分均显著，降低差异有统计学意义（P 0.05）。具体数据见表1。表1 患者治疗前后BASDAI和BASFI的VAS评分的变化（s）指标治疗前治疗后tPBASDAI4.791.563.011.162.12450.0371BASFI4.442.012.581.303.12680.01852.2细胞因子的变化患者治疗后的IL-4、IL-10均高于治疗前，差异具有统计学意义（P 0.05），治疗后的IL-6、IL-8均低于治疗前，差异有统计学意义（P 0.05）。具体数据见表2。表2 患者治疗前后的细胞因子的变化（s）指标治疗前治疗后tPIL-4280.1186.17347.8591.941.20150.0405IL-64.922.162.881.012.10370.0285IL-81112.24152.245505.8093.274.00000.0031IL-10216.8566.91320.1497.663.14770.01982.3 免疫球蛋白的比较患者治疗后的 IgG1、IgG3、IgA高于治疗前，差异具有统计学意义（P0.05），具体数据见表3。表3 患者治疗前后的免疫球蛋白的变化（s）指标治疗前治疗后tPIgG165.0122.1033.0914.173.52220.0271IgG221.047.9520.408.161.12500.5685IgG313.572.456.102.004.02430.0199IgG433.1210.2823.569.150.87140.4055IgA13.995.969.153.683.02260.0310SIgA30.2514.0728.5111.381.15390.4953IgM16.568.1414.057.111.87050.21452.4 患者症状体征与细胞因子、免疫球蛋白的相关性患者的 IL-4 与 BASDAI 呈负相关（P0.05），IgG1和IgG3与BASDAI、BASFI 均呈正相关（P0.05），其余指标与 BASDAI和BASFI 均无相关关系，具体数据见表4。表4 患者症状体征与细胞因子和免疫球蛋白的相关性（s）指标BASDAIBASFIIL-4-0.20*-0.26IL-60.13-0.13IL-8-0.26-0.14IL-100.130.09IgG10.31*0.23*IgG20.050.06IgG30.38*0.29*IgG40.080.02IgA0.15-0.05SIgA-0.010.01IgM0.030.04注：*P0.05。3 讨论强直性脊柱炎是一种脊柱关节的强直疼痛伴随慢性关节炎，临床症状通常包括腰部疼痛、僵硬、活动受限、驼背等，具有较高的致残性。该病对患者的腰椎、胸椎以及骶髂关节产生了严重的不良影响，降低了患者的生活质量。一般认为强直性脊柱炎的发病机理与免疫失调及遗传因子有关，但尚无定论4。强直性脊柱炎的治愈难度较高，通常需要长期乃至终身治疗，目前尚无治疗该病的特效药，临床上一般采用磺胺药物和非甾体抗炎药等缓解症状和疼痛，改善腰背部僵直及骶髂关节病5。益赛普是一种完全人源化TNF- 受体抗体融合蛋白，常用于强直性脊柱炎的治疗。TNF-是类风湿性关节炎、强直性脊柱炎等一类骨科疾病的主要炎性介质，TNF-参与调控的炎症反应可致使关节的病理性改变6。益赛普作用机制即通过与TNF-结合，阻断TNF-和细胞表面的TNF受体结合，降低其活性。西乐葆是一种COX-2 抑制剂，可降低患者前列腺素 E2 水平，缓解疼痛，改善症状7。益赛普联合西乐葆的治疗方案，不仅保证了临床治疗效果，还降低了医疗费用。本研究结果表明采用该治疗方案降低了患者的BASDAI和BASFI的VAS评分，证明了该方法的有效性。细胞因子是一种水溶性多肽或信号蛋白，具有传导细胞间信号、调节免疫和炎症反应等作用，效果与激素接近8。研究表明，强直性脊柱炎患者血清中存在多个细胞因子的异常表达，这些细胞因子与其特异的细胞表面受体结合，影响基因的转录过程，致使体内细胞因子网络失衡，引起异常免疫反应，从而导致强直性脊柱炎 8。IL-4是一种Th2型细胞因子，可保护软骨的降解，抑制NK细胞CD69 的表达和IFN-的分 9。单独的IL-4可以维持Th2的增殖，拮抗IFN- 的前炎效应并抑制 Th1 细胞的增生。IL-10可以降低血清及关节液内炎性细胞因子的含量，抑制免疫细胞炎性细胞因子的产生。目前关于IL-4、IL-10等细胞因子在强直性脊柱炎中的详细作用机制的报道较少，在本研究中，强直性脊柱炎患者治疗后的IL-4、IL-10均显著高于治疗前，这证实了IL-4、IL-10的增高对于强直性脊柱炎的发展有一定抑制作用。IL-6 是一种多功能糖蛋白，有助于促进急性期蛋白的合成，激活T淋巴细胞，并诱导B淋巴细胞的终末期分化，使其成为具有分泌免疫球蛋白功能的免疫活性细胞。大量研究表明，IL-6 与强直性脊柱炎具有相关性，IL-6水平的升高与病情严重程度正相关9。本研究中的患者治疗后的IL-6显著下降的结果与此观点吻合。IL-8 是一种CXC族趋化因子，与白细胞的趋化作用相关。在炎症发生时，中性粒细胞通常首先到达炎症部位，并释放一系列的蛋白酶、反应性氧化介质，分泌各类细胞因子和趋化因子10。在本研究中，患者治疗后的IL-8显著低于治疗前，表明IL- 8水平可能与强直性脊柱炎的发病形式。有研究报道提示出现外周关节炎的强直性脊柱炎患者血清 IL- 8 的水平升高更显著，在一定程度上支持了本研究结果11。免疫球蛋白是人体内重要的免疫抗体，对强直性脊柱炎诊断和治疗有重要意义。体液免疫始于B细胞的活化，B淋巴细胞受到抗原的刺激之后增殖、分化成为浆细胞，进而产生免疫球蛋白，其中IgG、IgM和IgA等发挥了主要作用12。血清中含量最高的免疫球蛋白是IgG，它包括 IgG1、IgG2、IgG3 和 IgG4等四个亚类，它们的生物学活性有所差异。其中IgG3亚类的生物活性最高，普遍认为IgG3参与了免疫复合物在中性粒细胞表面上形成的过程，而且其通过激活补体来参与系统性病理生理过程的发生13。许多结缔组织病患者都表现为IgG水平升高，但IgG亚型的变化却不尽相同，变化通常表现为IgG1显著升高，IgG2 显著降低甚至缺乏14。强直性脊柱炎患者常表现为持续性的血清中 IgA浓度升高，且其浓度与C-反应蛋白水平有显著的相关性。IgM是机体发育过程中最早合成和分泌的抗体，也是抗原刺激诱导的体液免疫应答中最早出现的抗体，但目前对于IgM的研究报道比较缺乏15。本研究观察了强直性脊柱炎患者治疗前后的免疫球蛋白水平变化，结果显示治疗后的 IgG1、IgG3、IgA高于治疗前，其余指标无显著差异。此结果表明IgG1的升高体现出自身免疫性抗体的增多，也符合临床上常见的 IgG1 升高者常伴有自身免疫性疾病的表现，IgG3的升高原因可能是强直性脊柱炎患者机体内免疫系统受到长期抑制，导致 IgG3水平显著降低，IgA的升高可以推测微生物抗原的存在在血清阴性脊柱关节病发病机制中起重要作用。此外，本研究还表明，强直性脊柱炎患者的IL-4与IgG1和IgG3等细胞因子和免疫球蛋白与患者的症状体征存在一定的相关性，提示应加强对患者细胞因子和免疫球蛋白的重视，其正常水平可改善患者的症状体征。综上所述，强直性脊柱炎患者存在细胞因子异常和免疫球蛋白失调，治疗后有所改善，部分指标与其症状体征具有相关性。参考文献：1 张皖东,曹云祥,葛瑶等.强直性脊柱炎中医辨证分型与免疫炎症指标的相关性研究J.中国中医基础医学杂志,2014,20(10):1384-1387.2聂蕊,李涯松.强直性脊柱炎异位骨化机制研究进展J.中国骨质疏松杂志,2016,22(10):1350-1354.3叶文芳,刘健,万磊等.新风胶囊对强直性脊柱炎患者疗效及血清免疫球蛋白亚型、外周血淋巴细胞自噬的影响J.中国中西医结合杂志,2016,36(03):310-316.4朱元悦,孙柔,陈广洁.Th17细胞和Treg细胞比例失衡在AS发展中作用的研究进展J.现代免疫学,2016,36(01):58-61.5 Appel H, Maier R, Bleil J, et al. In Situ Analysis of Interleukin-23-and Interleukin-12-Positive Cells in the Spine of Patients With Ankylosing SpondylitisJ. Arthritis & Rheumatism, 2013, 65(6): 1522-15296 金艳华,张志国,周凌等.强直性脊柱炎患者外周记忆性T细胞亚群及功能初探J.现代免疫学,2015,35(03):177-181.7叶文芳,刘健,汪四海等.强直性