课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (18).ppt

方法指导课 教材版本 人教版 选修一适用年级 高二年级授课教师 李玉慧工作单位 洛阳市第二实验中学 1 情境激趣 2 温故知新 基本技术 1 制备培养基2 接种技术3 无菌技术 2 温故知新 制备培养基 定容 称量 溶化 分装 调pH 包扎 灭菌 倒平板 称量 计算 2 温故知新2 接种技术 平板划线法 2 温故知新2 接种技术 稀释涂布平板法 2 温故知新2 无菌技术 消毒 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂消毒法 紫外线消毒法 灭菌 灼烧灭菌 高压蒸汽灭菌 干热灭菌 2 理论指导1 生物科学社 校园土壤中真菌的分离与计数 2 理论指导1 生物科学社 校园中土壤真菌的分离与计数 2 理论指导1 筛选菌株 选择培养基 水 1000ml葡萄糖 10g蛋白胨 5gKH2PO4 1gMgSO4 7H2O 0 5g孟加拉红 1 3 3ml链霉素 1 0 3ml琼脂 20g pH自然 2 理论指导1 筛选菌株 选择培养基 一种氨基糖苷类药 其作用机制是作用于细菌体内的核糖体 抑制细菌蛋白质合成 并破坏细菌细胞膜的完整性 选择性抑菌剂 可抑制细菌的生长 并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长 孟加拉红又叫虎红 2 理论指导1 筛选菌株 选择培养基 概念 将允许特定种类的微生物生长 同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基 2 理论指导1 筛选菌株 选择培养基 方法a加入特殊物质 方法b改变营养物质 方法c改变培养条件 营养构成 碳源 氮源 水 无机盐生长条件 pH 特殊物质 气体要求 2 理论指导1 筛选菌株 目的菌株 方法 根据生存环境要求 到相应环境中寻找 美国黄石国家公园热泉 水生耐热细菌Taq 2 理论指导1 筛选菌株 原理 人为提供有利于目的菌株生长的条件 包括营养 温度 pH等 同时抑制或阻止其他种类微生物生长 3 理论指导2 生物科学社 2 2 106株 克 统计菌落数目 3 理论指导2 统计菌落数目 方法 稀释涂布平板法 当样品的稀释度足够高时 聚集的菌种被分散开来 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌 原理 3 理论指导2 统计菌落数目 菌落数目的选择 稀释度的确定 30 300 不同微生物采用不同稀释度第一次选择范围宽泛 3 理论指导2 统计菌落数目 数据处理 2 38 109株 克 平均数 238稀释倍数 106接种量 0 1ml 3 理论指导2 统计菌落数目 每克样品中的菌落数 C V M其中 C代表某一稀释度下平板生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 ml M代表稀释倍数 3 理论指导3 生物科学社 设置对照 2 2 106株 克 可信度 3 理论指导3 设置对照 空白对照 对比对照 证明未被污染 去除孟加拉红和链霉素 证明选择作用 3 理论指导4 生物科学社 培养与观察 真菌28 3天 3 理论指导4 生物科学社 培养与观察 3 理论指导4 生物科学社 培养与观察 教室空气中微生物总数的检测 3 理论指导4 生物科学社 培养与观察 大小 颜色 形态 突起 边缘 3 理论指导5 初步鉴定 预实验 阴性 阳性 对照 3 理论指导5 初步鉴定 原理 pH 6 6 黄色pH 8 4 红色 4 实验流程 准备工作 取样