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当前位置:课程学习第五章 兽医寄生虫病的实验诊断技术本章导学 主要讲述兽医寄生虫病的实验室诊断方法:粪便检查,螨病及原虫病的实验室诊断,蠕虫学剖解技术及蠕虫标本的采集。 学习重点:掌握常见蠕虫学的实验室粪便虫卵检查技术及幼虫培养技术学习难点:几种实验方法的有机结合应用 1、掌握常见实验室寄生虫学诊断技术.2、理解常见诊断技术的原理3、查阅与寄生虫学检验相关的最新文献资料.当前位置:课程学习第五章 兽医寄生虫病的实验诊断技术学习单元1 蠕虫病的实验诊断技术粪便内蠕虫虫卵检查法导言 粪便内蠕虫虫卵的检查,根据所采取的方法不同,可分为直接涂片法、漂浮法和沉淀法、以及锦纶筛兜淘洗法。直接涂片法 直接涂片法是检查虫卵的最简单方法,但如果粪便中虫卵数量少时则不易查到。 1、取12滴清水,滴在载玻片;2、然后用火柴梗或牙签取黄豆大小的粪便与载玻片上的清水混匀;3、除去较粗的粪渣;4、将粪液涂成薄膜,薄膜的厚度以透过涂片隐约可见书上的字迹为宜;5、盖上盖玻片,置于低倍镜下检查。 1、涂片的厚薄以在载玻片的下面垫上有字的纸时,纸上的字迹隐约可见为宜。2、该法简便、易行、快速、适合于虫卵量大的粪便检查,但对虫卵含量低的粪便检出率低,故此法每个样品必须检查35片。3、检查虫卵时,先用低倍镜顺序观察盖玻片下所有部分,发现疑似虫卵物时,再用高倍镜仔细观察。因一般虫卵(特别是线虫卵)色彩较淡,镜检时视野宜稍暗一些(聚光器下移)。漂浮法 漂浮法是利用比重比虫卵大的溶液稀释粪便,将粪便中比重小的虫卵浮集于液体表面。常用饱和盐水(即在1000m1沸水中加入380g食盐)做漂浮液,用以检查线虫和绦虫虫卵。此外,尚可采用其他饱和溶液,如饱和硫酸镁溶液等。 1、取粪便10g;2、加饱和盐水l00ml;3、用玻棒搅匀,通过60目铜筛过滤到另一胶杯中;4、静置半小时;5、用直经510mm的铁丝圈,与液面平行接触以沾取表面液膜,抖落于载玻片上,加盖玻片检查。 1、漂浮时间:饱和盐水漂浮法漂浮时间为30min左右较为适宜。时间过短(少于10min),漂浮不完全;时间过长(大于1h),易造成虫卵变形、破裂、难以识别。2、漂浮液保存:漂浮液必须饱和,盐类的饱和溶液须保存在不低于13的情况下,才能保持较高的密度,否则效果难以保证。3、漂浮液的选择:除饱和盐水漂浮液以外,其他一些漂浮液也可用于一些特殊虫卵的检查。如饱和硫酸锌溶液(饱和度为1 000mL水中溶解920g硫酸锌)漂浮力强,检查猪肺丝虫卵效果较好;饱和蔗糖溶液(饱和度为1 000 mL,水中溶解1 280g蔗糖)性温和,可适于多种虫卵和卵囊的漂浮。4、漂浮法检查多例粪便时,如用铁丝圈蘸取漂浮液面,则检查完一例,再蘸取另一例时,需先在酒精灯上烧过铁丝圈后再用之,避免相互污染,影响结果的准确性。5、静置滤液的容器选择:选用口径相当较小的类似三角瓶的器皿,如经济实惠的青链霉素瓶。6、如用载玻片或盖玻片蘸取虫卵,则使用的载玻片或盖玻片一定要干净无油腻,否则难以蘸取。漂浮法示意图沉淀法 沉淀法用于检查粪便中的吸虫卵,因为吸虫卵一般来说其比重大于水,可沉集于水底。 1、取粪便5g;2、加清水l00ml;3、用玻棒搅匀,通过60目铜筛过滤到另一胶杯中;4、静置半小时;5、倾去上层液,保留沉渣;6、再加水混匀;7、又静置半小时;8、再倾去上层液,保留沉渣;9、如此反复操作直到上层液体透明,最后倾去上层液;10、吸取沉渣检查。 1、注意此法粪量少,一次粪检最好多看几片,以提高检出率。2、可将离心沉淀法和漂浮法结合起来应用。如可先用漂浮法将虫卵和比虫卵轻的物质漂起来,再用离心沉淀法将虫卵沉下去;或者选用沉淀法使虫卵及比虫卵重的物质沉下去,再用漂浮法使虫卵浮起来,以获得更高的检出率。锦纶筛兜淘洗法 1、取粪便510g;2、加水搅匀;3、通过40或60目铜筛过滤;4、滤下液再通过260目锦纶筛兜过滤;5、在锦纶筛兜中继续加水冲洗,直到洗出液变清为止;6、挑取260目锦纶筛兜中的粪渣抹片检查。 此法适用于宽度大于60微米球虫卵囊。因通过260目锦纶筛兜过滤、冲洗后,直径小于40微米的细粪渣和可溶性色素均被洗去而使虫卵集中。虫卵计数法 虫卵计数法是测定每克家畜粪便中的虫卵数,而以此推断家畜体内某种寄生虫的数量方法,有时尚以使用驱虫药前后虫卵数量的对比,以检查驱虫效果。方法有多种,这里介绍目前常用的三种方法。 一、斯陶尔氏法(Stolls method)本法适用于大部分虫卵的计数。1、在一小玻璃容器上(如小三角烧瓶或大试管),在容量为56ml和60ml处各作一个标记;2、先取0.4(或0.1mol/L)的氢氧化钠溶液注入容器内到56ml处;3、再加入被检粪便使液体升到60ml处;4、加入一些玻璃珠,振荡使粪便完全破碎混匀;5、以1mL的吸管吸取粪液0.15mL,滴于23张载玻片上,覆以盖玻片;6、在显微镜下循序检查,统计其中虫卵总数;7、因0.15mL粪液中实际含原粪量是0.154/60=0.01g,因此,所得虫卵总数乘100即为每克粪便中的虫卵数(EPG)。斯陶氏法示意图 二、 麦克马斯特氏法(McMasters method)本法只适用于可被饱和盐水漂浮起的各种虫卵。计数室的构造:计数室是由两片载玻片制成,制作时为了使用方便,常将其一片切去一条,使之较另一片窄一些。在较窄的玻片上刻以lcm见方的划度2个,后选取厚度1.5mm的玻片切成小条垫于两玻片间,以环氧树脂粘合。麦克马斯特氏计数法示意图1、取粪便2g,置研钵中;2、先加入10ml水,搅匀,再加饱和食盐水50ml;3、充分振荡混匀;4、用60目铜筛过滤;5、将滤液振荡混匀后立即吸取粪液充满麦克马斯特计数板两个计数室;6、置于显微镜台上,静置23分钟;7、检计数两个计数室的虫卵数。该小室中的容积为1cmlcm0.15cm=0.15cm3,内含粪2(1050)0.15=0.005g,两个计数室则为0.01g。故数得的虫卵数乘以100即为每克粪便中的虫卵数(OPG值)公式:OPGa100,a代表两个计数室的虫卵数值片形吸虫卵的计数法片形吸虫卵在粪便中量少,比重大,因此,要求采用特殊的方法,而在牛羊又有所不同。对于羊,操作如下:1、取羊粪10g,置于300ml的容量瓶中;2、加入少量1.6的氢氧化钠溶液,静置过夜;3、次日,将粪块搅碎,再加入1.6的氢氧化钠溶液到300ml刻度处;4、摇匀,立即吸取此粪液7.5ml注入到一离心管内;5、在离心机内以每分钟1 000转速,离心2min;6、倾去上层液体,换加饱和盐水;7、再次离心后,再倾去上层液体;8、再换加饱和盐水,如此反复操作,直到上层液体完全清澈为止;9、倾去上层液体,将沉渣全部分别滴于数张载玻片上;10、检查全部所制的载玻片,统计其虫卵总数,以总数乘以4,即为每克粪便中的肝片形吸虫虫卵数。在进行牛粪便肝片形吸虫虫卵的计数时,操作步骤基本同上,但用粪量改为30g。加入离心管中的粪液量为5ml,因此,最后计得虫卵总数乘以2,即为每克粪便中虫卵总数。虫卵计数的结果,常可作为诊断寄生虫病的参考。在马,当线虫卵数量达到每克粪便中含卵500枚时,为轻感染;8001 000枚时为中感染;l 5002 000枚时为重感染。在羔羊,还应考虑感染线虫的种类,一般每克粪便中含2 0006 000虫卵时应认为是重感染,在每克粪便中含虫卵1 000枚以上,即认为应给以驱虫。在牛,每克粪便中含虫卵300600枚时,即应给以驱虫。在肝片形吸虫,牛每克粪便中的虫卵数达到100200枚时,羊达到300600枚时即应考虑其致病性。 1、做虫卵计数时,所取粪便应干净,不能掺杂砂土、草根等。操作过程中,粪便必须彻底粉碎,混合均匀。用吸管吸取粪液时,必须摇匀粪液,在一定深度吸取;2、采用麦克马斯特氏法计数时,必须调好显微镜焦距(计数室刻度线条可被看到)。计数虫卵时,不能有遗漏和重复。为了取得准确的虫卵计数结果,最好在每日的不同时间检查3次,并连续检查3天,然后取其平均值。将每克粪便虫卵数乘以24h粪便的总重量(g),即是每日所排虫卵的总数,再将此总数除以已知成虫每日排卵数(可查书得到),即可得出雌虫的大约寄生数量。如寄生虫是雌雄异体的,则将上述雌虫数再乘以2,便可得出雌雄成虫寄生总数。3、由于粪中虫卵的数目与宿主机体状况、寄生虫的成熟程度、雌虫数目及排卵周期、粪便性状(干湿)、是否经过驱虫及其他多种因素有关,所以虫卵计数只能是对寄生虫感染程度的一个大致推断。当前位置:课程学习第五章 兽医寄生虫病的实验诊断技术学习单元2 螨病的实验室诊断技术学习内容一、病料的采集螨的个体较小,常需刮取皮屑,于显微镜下寻找虫体或虫卵。首先详细检查病畜全身,找出所有患部,然后在新生的患部与健康部交界的地方,这里的螨较多。剪去长毛,取凸刃小刀在体表刮取病料,所用器械在酒精灯上消毒后,使刀刃与皮肤表面垂直,反复刮取表皮,直到稍微出血为止,此点对检查寄生于皮内的疥螨尤为重要。将刮到的病料收集到培养皿或其他容器内,取样处用碘酒消毒。在野外进行工作时,为了避免风将刮下的皮屑吹去,刮时可将刀子沾上甘油或甘油与水的混合液。这样可使皮屑黏附在刀上。将刮取到的病料收集到容器内带回准备检查与标本制作。 二、病料的检查方法1、直接检查法将刮下物放在黑纸上或有黑色背景的容器内,置温箱中(3040)或用白炽灯照射一段时间,然后收集从皮屑中爬出的黄白色针尖大小的点状物在镜下检查。此法较适用于体形较大的螨(如痒螨)。检查水牛痒螨时,可把水牛牵到阳光下揭去“油漆起爆”状的痂皮,即可看到淡黄白色的麸皮样缓慢爬动的痒螨。还可以把刮取的皮屑握在手里,不久会有虫体爬动的感觉。2、显微镜直接检查法将刮下的皮屑,放于载玻片上,滴加煤油,覆以另一张载玻片。搓压玻片使病料散开,分开载玻片,置显微镜下检查。煤油有透明皮屑的作用,使其中虫体易被发现,但虫体在煤油中容易死亡;如欲观察活螨,可用10%氢氧化钠溶液、液体石蜡或50%甘油水溶液滴于病料上,在这些溶液中,虫体短期内不会死亡,可观察到其活动。3、虫体浓集法为了在较多的病料中检出其中较少的虫体,而提高检出率,可采用浓集法。此法先取较多的病料,置于试管中,加入10%氢氧化钠溶液,浸泡过夜(如急待检查可在酒精灯上煮数分钟),使皮屑溶解,虫体自皮屑中分离出来。尔后待其自然沉淀(或以每分钟2 000转的速度离心沉淀5min),虫体即沉于管底,弃去上层液,吸取沉渣检查。也可采用上述方法的病料加热离心后,倾去上清液,再加入60硫代硫酸钠溶液,充分混匀后再离心23min,螨虫即漂浮于液面,再取表面溶液检查。4、温水检查法即用幼虫分离法装置,将刮取物放在盛有40左右温水的漏斗上的铜筛中,经0.51h,由于温热作用,螨从痂皮中爬出集成小团沉于管底,取沉淀物进行检查。也可将病料浸入4045的温水里,置恒温箱中,12h后,将其倾在表玻璃上,解剖镜下检查。活螨在温热的作用下,由皮屑内爬出,集结成团,沉于水底部。5、培养皿内加温法将刮取到的干的病料,放于培养皿内,加盖。将培养皿放于盛有4045温水的杯上,经1015min后,将皿翻转,则虫体与少量皮屑黏附于皿底,大量皮屑则落于皿盖上,取皿底检查。可以反复进行如上操作。该方法可收集到与皮屑分离的干净虫体,供观察和制作封片标本之用。6、蠕形螨的检查蠕形螨寄生在毛囊内,检查时先在动物四肢的外侧和腹部两侧、背部、眼眶四周,颊部和鼻部的皮肤上按摩,是否砂粒样或黄豆大的结节。如有,用小刀切开挤压,看到有脓性分泌物或淡黄色干酪样团块时,则可将其挑在载片上,滴加生理盐水12滴,均匀涂成薄片,上覆盖玻片,在显微镜下进行观察。 三、实验注意事项1、螨对寄生部位有一定的选择性,多数寄生于体表皮肤柔软而毛少的部位。根据其发育规律和生活习性,确定采集虫体的时间和部位。2、虫体和病料采取中应严防散布病原。当前位置:课程学习第五章 兽医寄生虫病的实验诊断技术学习单元3 原虫病的实验室诊断技术学习内容粪便内原虫检查法 寄生于消化道的原虫,如球虫、隐孢子虫、结肠小袋纤毛虫等都可以通过粪便检查来确诊。检查时,要求粪便新鲜、盛粪便的容器要干净,并防止污染及干燥。采用各种镜检方法之前,可以先对粪便进行观察,看其颜色、稠度、气味、有无血液等,以便初步了解宿主感染的时间和程度。 一、球虫卵囊检查法1、检查方法根据所采取的方法不同,粪便内球虫卵囊的检查方法分为直接涂片法、漂浮法、锦纶筛兜淘洗法等(操作方法同19.1.1.1粪便内蠕虫虫卵检查法)。2、注意事项 因大部分球虫卵囊直径小于40微米,若使用锦纶筛兜淘洗法时,虫卵可以通过260目网筛筛孔,故应取滤液,待其沉淀或离心后,吸取沉渣检查。 当需要鉴定球虫的种类时,可将浓集后的卵囊加2.5的重铬酸钾溶液,在25温箱中培养,待其孢子形成后进行观察。 在生产实践当中,为了推测动物体内球虫的感染强度、判断抗球虫药物的疗效、评价疫苗的免疫保护性,通常要进行卵囊的计数,即克粪样中球虫卵囊数值(OPG)。常用的方法有血球板计数,载玻片计数,麦克马斯特计数等等。血球板计数法:.取1g粪样,溶于10ml水中,制成10倍稀释液。.经充分搅拌均匀后,取其1滴置血球计数板中,在低倍显微镜下计数计数室四角4个大方格(每个大方格又分成16个中方格)中球虫卵囊总数,除以4求其平均值,乘104即为1ml液体的卵囊数,然后再乘10即为OPG值。.为了数据的可靠性,可以重复几次计数,算其平均(OPGa105,a代表4个大方格卵囊平均数值)。载玻片计数法:.取1g粪样,溶于10ml水中,制成10倍稀释液。.取0.05ml(50微升)置于载玻片上,盖上盖玻片后,计算整个卵囊数(OPGb200,b代表整个卵囊数值)。麦克马斯特法计数法(操作方法同粪便内蠕虫虫卵检查法) 二、隐孢子虫卵囊检查法隐孢子虫卵囊的采集与球虫相似,但其比球虫小,可采用饱和蔗糖溶液漂浮法收集粪便中的卵囊,油镜观察,或加以染色后再油镜镜检。1、饱和蔗糖溶液漂浮法取粪样510克,加5倍自来水搅匀,60目筛网过滤,滤液以25003000转/分钟速度离心10分钟,弃上清,按粪样量的10倍体积加饱和蔗糖液(蔗糖500g,蒸馏水320ml,石炭酸9ml),搅匀后以2000转/分钟离心10分钟,然后用小铁丝环蘸取漂浮液表层涂片,以10100倍油镜镜检。2、抗酸染色法取粪样510克,加5倍水搅匀,60目尼龙筛过滤,将滤液涂片,自然干燥或采用火焰快速干燥,在涂片区域滴加改良抗酸染色液第一液(碱性复红4g,95%酒精20ml,石炭酸8ml,蒸馏水100ml),以固定玻片上的滤液膜,510分钟后用水冲洗,再滴加第二液(98%浓硫酸10ml,蒸馏水90ml),510分钟后用水冲洗,滴加第三液(0.2g孔雀绿,蒸馏水100ml)1分钟后水洗,自然干燥后以油镜观察。卵囊染成橘红色,背景为蓝色。有些杂质可能也染成橘红色,应加以区分。 三、结肠小袋纤毛虫检查法当猪等动物患结肠小袋纤毛虫病时,在粪便中可查到活动的虫体(滋养体),但是粪便中的滋养体很快会变为包囊。检查时取新鲜的稀粪一小团,放在载玻片上加1-2滴温热的生理盐水混匀,挑去粗大的粪渣,盖上盖玻片,在低倍镜下检查时即可见到活动的虫体。也可以滴加碘液(碘2g,碘化钾4g,蒸馏水1000ml)进行染色,若粪样中有肠小袋纤毛虫,则其细胞质染成淡黄色,虫体内的含有的肝糖呈暗褐色,核则透明。血液内原虫检查法 寄生于血液中的伊氏锥虫、梨形虫和住白细胞虫,一般可采血检查。采血部位:牛、羊、猪,犬、猫和兔均可选用耳静脉,小白鼠取尾尖,禽类取翅静脉。检查方法有以下各种: 一、直接镜检法将采出的血液滴在洁净的载玻片上,加等量的生理盐水与之混合,加上盖玻片,立即放显微镜下用低倍镜检查,发现有运动的可疑虫体时,可再换高倍镜检查。为增加血液中虫体活动性,可以将玻片在火焰上方略加温。此法适用于检查伊氏锥虫。 二、涂片染色镜检法涂片 采血部位用酒精棉球消毒,再用消毒针头采血,滴于洁净的载玻片一端; 另取一块边缘光滑的载玻片,作为推片。先将此推片的一端置于血滴的前方,然后稍向后移动,触及血滴,使血均匀分布于两玻片之间,形成一线; 推片于载玻片形成3045度角,平稳快速向前推进,使血液循接触面散布均匀,即形成血薄片; 抹片后,自然干燥,滴加甲醇固定。染色(1)姬姆萨染色 姬姆萨染料配制:姬姆萨红染料(粉末)0.5g或7.5g甲醇33ml 或 500ml甘油33ml 或 500ml先将姬姆萨染料放入乳钵中,逐渐倒入甘油,并研磨均匀,置于56水温箱内, 90120 分钟,然后加入甲醇,摇匀后放置数天,过滤后或不过滤即可使用。此染液放置室温阴暗处,时间越长越好。染色过程:血片经甲醇固定后,放置姬姆萨使用液1530分钟(过夜效果更好),取出后,用洁净的水冲洗,自然干燥后,油镜镜检。(2)瑞氏染色 瑞氏染液配制:瑞氏染料(伊红和美蓝)0.2g,置棕色试剂瓶中,加入甘油3ml,盖紧瓶塞,充分摇匀后,再加入甲醇100ml,室温放置。 染色过程:取已干燥的血涂片(不需用甲醇固定),滴加瑞氏染液覆盖血膜,静置2分钟,加入等量缓冲液,用吸球轻轻吹动,使染液与缓冲液充分混匀,放置510 分钟。倾去染液,然后用水冲洗,血片自然干燥后即可镜检。涂片染色镜检法适用于各种血液原虫。(3)离心集虫法当血液中的虫体较少时,可先进行离心集虫,再行制片检查。其操作方法是:在离心管中加2的柠檬酸生理盐水34ml,再加血液67ml;混匀后,以500转/分钟离心5分钟,使其中大部分红细胞沉降;将含有少量红细胞、白细胞和虫体的上层血浆,用吸管移入另一离心管中,补加一些生理盐水,以2500转/分钟的速度离心l0分钟,取其沉淀制成抹片,染色检查。此法适用于检查伊氏锥虫和梨形虫。当前位置:课程学习第五章 兽医寄生虫病的实验诊断技术学习单元4 蠕虫学剖解技术及蠕虫标本的采集学习内容采集剖解家畜的全部寄生虫标本并进行鉴定和计数,根据工作要求的不同,可分为完全剖检法、个别器官寄生虫的剖解法和对某一寄生虫的采集法。 一、蠕虫学完全剖解技术及寄生虫的采集1、蠕虫学完全剖解技术完全剖解技术常作为寄生虫区系调查。在家畜死亡或宰杀前,先采血制作血片(方法见血液内原虫检查法)染色检查,观察血液中有无寄生虫。再仔细检测动物体表,观察有无体表寄生虫,如蜱、螨等,并搜集,并注意看皮肤有无结节,结节压片镜检。而后剥皮,观察皮下组织有无虫体寄生。禽类应剥取泄殖腔周围的皮肤,检查有无包囊,可能在包囊内发现隐孔科吸虫。在进行以上剖检前,最后先取粪便进行虫卵检查,初步确定该畜体内寄生虫的寄生情况,但也应注意,不要忽视了未在粪便中发现虫卵的虫体的寻找。剖开腹腔,先搜集胸水、腹水,沉淀后观察其有无寄生虫,然后依次将消化系统、呼吸系统、生殖系统、泌尿系统、心脏和大的动脉和静脉血管分开,劈开颅骨对脑进行检查,检查脊髓、检查眼和结膜腔,检查鼻腔和鼻窦,检查唇、颊和舌,采取全身具有代表性的肌肉进行检查。各类器官和检查方法实际可分为两类:一类如肠胃似有大量内容物的腔道,应在水中剖开,将内容物洗入液体中,而后对黏膜循序仔细检查,洗下的内容物则反复加水沉淀,待液体清澈无色为止,再取沉渣进行检查。另一类如肝肺等实质器官,则先将其剪成小块,置37度中并加入生理盐水或缓冲液,进行贝尔曼分离法,检查沉淀。为了检查沉渣中纤细的较小虫体,可以在沉渣中滴加浓碘液,使粪渣和虫体均染成棕黄色,然后用5的硫代硫酸钠脱色,但虫体着色后不褪色,仍保持棕黄色,而粪渣及纤维均被脱色,故可以辨认虫体。再按照以下方法对各个系统进行依次检查:(1)消化系统的检查先将肝、胰取下,再将食道、胃、小肠、大肠、盲肠分别结扎后分离(结扎时充分展开肠系膜,对光镜检有无血吸虫)。食道应剖开检查食道黏膜下是否有虫体寄生,应注意有无筒线虫和纹皮蝇幼虫,在食道浆膜面检查有无肉孢子虫。胃和各肠段应分别置于容器内,剖开,加水,将其内容物冲入水中。仔细检查洗净的胃及肠黏膜上是否附着虫体。并用小刀刮取肠胃黏膜,将刮下物置解剖镜下观察。洗下物应多加生理盐水反复洗涤沉淀,等液体清透后,分批少量沉渣,洗入大培养皿的清水中,先后放于白色和黑色的背景上寻找虫体。对于禽类应注意肌胃和腺胃的检查,分离肌胃角质膜,粘膜面可能发现华首科、裂口科线虫。腺胃粘膜内,检查有无紫红色斑点,这可能是四棱科线虫。肝和胰用剪刀沿胆管和胰管剪开,检查有无虫体,然后将其剪成小块,再用贝尔曼法分离,检查沉淀液有无虫体。(2)呼吸系统的检查用剪刀将鼻喉支气管切开,寻找虫体,用小刀刮气管的黏膜,刮下物在解剖镜下检查,肺组织按肝脏处理方法。(3)泌尿系统的检查切开肾,先对肾盂作肉眼检查,再刮取肾盂黏膜检查,最后将肾实质切成薄片,压于两玻片间,在镜下检查。剪开输尿管、膀胱、尿道,检查其黏膜,并注意黏膜下有无包囊。收集尿液,用反复沉淀法处理,检查有无猪有齿肾线虫。(4)生殖器官的检查切开并刮下黏膜,涂片镜检,怀疑为马媾疫或牛胎儿毛滴虫时,应涂片染色后油镜检查。对于禽类,剪开输卵管,检查有无前殖吸虫。(5)脑和脊髓切开颅腔,先用肉眼检查有无多头蚴,再切成薄片检查有无丝虫蚴虫。(6)眼结膜和结膜腔以冲洗法处理检查,剖开眼球,将前房水收集于器皿中,在镜下检查,禽类还要冲洗眼窝,可能发现嗜眼吸虫等。(7)心和主要血管剖开将内容物洗入生理盐水中,用反复沉淀法检查有无

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