肝爽颗粒的药学研究和设计PPT课件.ppt

肝爽颗粒的药学研究和设计 报告人 罗维贤指导教师 蒋雯雯 研究背景 随着的科技发展 时代的进步 疾病也越来越多的潜伏在大家的身边 肝硬化就是其中一种第一一些慢性肝病 主要见于乙型肝炎 丙型肝炎 或者丁型肝炎 这些慢性肝炎如果不很好的治疗会慢慢发展成肝组织纤维化肝硬化的 第二酒精中毒 长期大量的饮酒 乙醇以及其中间代谢的产物乙醛的毒性作用 也是引起肝硬化的最常见的原因 第三胆汁淤积 由于一些肝胆外科的疾病 肝内胆管结石 胆囊炎 胆管阻塞或者肝内胆汁积存在时 高浓度的胆汁酸和胆红素会直接损害到肝细胞 然后使肝细胞慢慢发生变性 坏死 逐渐可以发展成胆汁性肝硬化 第四循环系统障碍 多见于慢性充血性心力衰竭 肝脏静脉和下腔静脉堵塞 可以导致长期肝细胞淤血 肝细胞缺氧 肝细胞坏死 慢慢发展成心源性肝硬化 建议大家平时要戒烟戒酒 避免暴饮暴食 积极治疗慢性疾病 肝硬化在中医的病征 中医 中医典籍中 没有肝硬化之名 更无早期与晚期之分 根据本病的临床表现 演化过程及预后等方面 应归属于中医的 疒徵积 的范畴 所谓 疒徵积 即腹内结块 固定不移 结块由小变大 由软变硬 初觉胀痛 继则疼痛逐渐加剧 一般病程较长 病情较重 肝硬化本身就是血病 因气能行血 故病初起时行气可愈 而久病在血 在络 非化瘀不可 所以本病见症有的虽无瘀血脉证 但从久病亦可以淤血论治 故活血化瘀应是本病的治疗根本 本方是经由后人在古方逍遥散的基础上针对性的加入几味抗炎 利胆功效的重要而成 但是由于属于国家中药保护品种保护中的一级保密品种 对于它的相关的研究没有太多的文献报道 本文设计研究了该方的合成路线及其质量标准草案 剂型优势 由于该方组成为 党参 柴胡 白芍 当归 茯苓 白术 枳壳 蒲公英 虎杖 夏枯草 丹参 桃仁 鳖甲13味药材故不宜做成液体制剂 因为液体制剂需要不断地澄清所得的提取液以求得到澄清度合格的溶液 但在此过程中很多的效用成分会浪费掉 而颗粒剂在汤剂的基础上加入矫味剂发展而来 具有很好的依从性 该方来源于古方逍遥散 柴胡 当归 白芍 白术 茯苓 生姜 具有悠久的药用历史和优秀的疏肝健脾的效果 处方颗粒工艺研究设计 1针对该方13味中草药进行生药鉴定 包括形态和显微鉴定 含量鉴定由后续的最优制备工艺确定后 制备得样品以购买自陕西省步长制药生产的肝爽颗粒为对照品 采用HPLC法测定做指纹图谱对比分析主要参考国家药监局出台的 中药注射剂指纹图谱研究的技术要求 草案 以及国家药典委员会公布的 中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南 试行 药材炮制 该方中的药材需要进行炮制的有柴胡醋制 取柴胡生片加米醋拌匀 闷润至透 置炒药锅内 用文火加热炒干 取出放凉 柴胡片每100kg用米醋20kg 目的 生柴胡的升散作用较强 多用于解表退热 醋炙制能缓和升散之性 增强疏肝止痛作用 多用于肝郁气滞的胁痛 腹痛及月经不调等 白术 土炒白术 先将土置锅内 用中火加热 炒至土呈灵活状态时 投入白术片 炒至白术表面均匀挂上土粉时 取出 筛去土粉 放凉 白术片每100kg用灶心土25kg 麸炒白术 先将锅用中火烧热 撒入麦麸 待冒烟时 投入白术片 不断翻炒 炒至白术呈黄褐色 取出 筛去麦麸 放凉 白术片每100kg用麦麸10kg 目的 白术生用 以健脾燥湿 利水消肿为主 用于痰饮 水肿 以及风湿痹痛等 土炒白术 借土气助脾 补脾止泻力胜 用于脾虚食少 泄泻便溏等 麸炒白术能缓和燥性 借麸入中 增强健脾作用 用于脾胃不和 运化失常 食少胀满 倦怠乏力 表虚自汗 胎动不安等 枳壳 麸炒枳壳 取麸皮撒入热锅内 用中火加热 俟冒烟时 加人枳壳片 不断翻动 炒至淡黄色时取出 筛去麸皮 晾凉 枳壳每100kg用麸皮10kg 目的 生品较辛燥 作用较强 偏于理气宽中 用于气实壅满所致之脘腹胀痛或胁肋胀痛 瘀滞疼痛 近年还用于子宫下垂 脱肛 胃下垂等 麸炒可缓和峻烈之性 长于理气消食 用于食积痞满 胁肋疼痛 下利便血 皮肤瘙痒 亦用于产后子宫下垂或久泻脱肛 鳖甲 砂子置锅 用武火炒热 放人净鳖甲 拌炒至表面呈淡黄色时 取出筛去砂子 趁热投入醋液中淬之 捞出 干燥 捣碎 鳖甲每100kg用醋20kg 目的 生鳖甲质地坚硬 有腥臭气 养阴清热 潜阳息风之力较强 用于热病伤阴或内伤虚热 虚风内动等证 砂炒醋淬后 质变酥脆 易于粉碎及煎出有效成分 并能矫臭矫味 醋制还能增强药物入肝消积 软坚散结的作用 制鳖甲软坚散结之力较强 用于癥瘕积聚 阴虚潮热 月经停闭 提取工艺设计 查阅文献后发现药方中的药物分为两类 一类是水醇提取物都具有相应药效的中药材 而另一类则是只有水提取物才具有相应的功效 具体为 水醇提取 白术 丹参 柴胡 当归 枳壳 虎杖 水提取 党参 白芍 茯苓 蒲公英 夏枯草 桃仁 鳖甲 故初步设计提取设计如下 单因素实验 针对于提取流程设计单因素实验 单因素应考虑提取次数 加水量 水醇提取加热温度 提取时间 又以提取物中的大黄素 醇 和芍药苷 水 作为成分指标 故设计单因素实验表如下 色谱条件 大黄素 色谱柱HypersilBDSC18 4 6mm 200mm 5 m 流动相 甲醇 检测波长254nm 流速0 6mL min 柱温26 进样量20 L 保留时间5 211min 柱压2 2MPa 芍药苷 色谱柱 Nova PakC18 流动相 甲醇 水溶液 30 70 流速 0 8ml min 1 检测波长 230nm 柱温为25 方法学研究 精密度实验 精密量取0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0mL已配制好的2种标准溶液分置50mL容量瓶中 加入无水乙醇定容至刻度 摇匀 用0 45 m滤膜过滤 分别吸取20 L 注入高效液相色谱仪 进样3次 按色谱条件测定 记录色谱图并以平均峰面积积分值为纵坐标 溶液质量浓度为横坐标 绘制相应标准曲线 并计算其回归方程与相关系数 稳定性试验 分别在0 2 4 6 8 10 12h时取配制实验溶液 按色谱条件条件分别进样20 L 测定峰面积 计算其各自的RSD回收率实验 称取1 5g的样品膏各6份 分别加样标准对照品大黄素和芍药苷0 001g按供试液制备方法进行制备 同一色谱条件下进行测定并回归计算得出回收率 正交实验设计 设计考察了4个相关因素 但水平考虑3水平 则故设计L9 34 即是4因素三水平实验 权重比以出膏率和对照的大黄素和芍药苷比3 7 设计正交表格如下 S为综合评分 S y ymax 0 3 Y Ymax 0 7 100 方差分析 干燥工艺研究 生产上常用的干燥方法有真空干燥 喷雾干燥 冷冻干燥等 冷冻干燥特别适用于热敏性物质的干燥 能最大限度地保存产品质量的稳定 但由于成本高 耗时长等缺点 生产上较少采用 喷雾干燥为瞬间干燥 具有省时方便 生产效率高 生产能力大等特点 对热敏性物料具有良好的适用性 真空干燥具有操作简便 收率高 易收集 易粉碎等特点 适用于热敏性物料的干燥 但查阅文献研究发现 经真空干燥后所得产品黏性大 不易粉碎 原因是物料中含有大量的小分子糖类 而喷雾干燥由于瞬时干燥成粉的特性 可以解决这一问题 故选其作为干燥方法 干法制粒影响因素考察 以颗粒的性状和得率为指标 考察干法制粒工艺参数 查阅文献后固定压辊转速14 0rpm 制粒转速50rpm和辊轮压力6 0bar 考察进料速度在15 20 25 30 35rpm对制粒过程的影响 在得到进料速度的影响后 固定制粒转速50rpm和辊轮压力6 0bar 压辊转速分别设置为10 12 14 16 18rpm进行制粒 得到合适的压辊转速 肝爽颗粒质量标准研究设计 实验仪器 高效液相色谱仪 硅胶薄层板 相关的玻璃仪器 数控超声波清洗器 电热恒温水浴锅 电子分析天平 试药 购自步长制药的肝爽颗粒和芍药苷作为标准品 制得的颗粒作为样品 以芍药苷含量为计 不得3 0毫克 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 乙腈 0 1 磷酸溶液 11 89 为流动相 检测波长为230nm 理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000 对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量 精密称定 加甲醇制成每1ml含50 g的溶液 即得 供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物 研细 取1g 精密称定 置具塞锥形瓶中 精密加入甲醇20ml 密塞 称定重量 超声处理30分钟 放冷 再称定重量 用甲醇补足减失的重量 滤过 取续滤液 即得 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 l 注入液相色谱仪 测定 即得 本品每袋含白芍以芍药苷 C23H28O11 计 不得少于3 0mg 指纹图谱研究设计 1色谱条件色谱柱为ThermoC18色谱 4 6mm 250mm 5 m 流动相为乙腈 A 0 2 磷酸 B 梯度洗脱见表7 柱温30 检测波长 0 75min 345nm 75 84min 280nm 精密吸取供试品溶液10 L 注入液相色谱仪 测定 记录空白溶液和供试品溶液的色谱图 供试品制备相关因素的研究设计 提取剂 取本品颗粒约5g 共3份 分别置于具塞锥形瓶中 加入不同的提取溶剂 50 甲醇 70 甲醇 甲醇 95 乙醇 各50mL 密塞 超声处理30min 放冷 摇匀 滤过 取续滤液 即得 记录不同提取溶剂提取的同一份样品供试品溶液色谱图 得到最优的提取剂 提取方式 取本品颗粒约5g 共3份 分别置具塞锥形瓶中 各加入50mL甲醇溶液 密塞 分别超声处理 功率500W 频率40kHz 30分钟 回流提取1 0h和搅拌提取2 0h 放冷 摇匀后滤过 即得 方法学研究 精密度 稳定性 重复性考察 以选取某一色谱峰为参照峰 为最强信