向仁伸武汉大学大学生创新创业训练计划申报书RPPT课件.ppt

课题成员 向仁伸曾宇阳高雷刘嘉彬指导老师 陈洪雷副教授 miR 210调控肺腺癌基质caveolin 1的表达及分析 立项背景 肺腺癌 肺癌 男女性死亡率均居全球癌症首位 发病率位列前三 早期诊断不足 预后差 肺腺癌 肺原发肿瘤的主要组织学类型 占肺癌比例逐年上升 立项背景之caveolin 1 Cav 1的结构与一般活动 立项背景之肿瘤微环境 肿瘤基质作为 土壤 逐渐成为研究的热点 立项背景之miRNA 生物合成途径 立项背景之miRNA miRNARoadmap Complexanddiverse mi 210 Cav 1与CAF 立项依据及设计思路 肺腺癌 基质Cav 1 miR 210 提出假设 miR 210结合基质Cav 1的mRNA 降低肺腺癌基质Cav 1的表达 促进肺腺癌的侵袭转移 实验内容 组织实验验证基质Cav 1在肺腺癌间质中的表达情况 细胞实验 1探究CAFs中miR 210与Cav 1之间的表达关系 细胞实验 2探究CAFs中miR 210调控Cav 1表达对A549侵袭转移的影响 实验内容 组织学实验 基质caveolin 1在肺腺癌中表达降低 实验内容 细胞实验 正常肺成纤维细胞 肺腺癌相关成纤维细胞 肺腺癌A549细胞 anti miR 210转染 实验组 对照组 实验组 对照组 实验组 量子点偶联靶向多肽标记后共培养 q PCR方法检测各组Cav 1的mRNA和miR 210的表达 WB方法检测各组中Cav 1蛋白表达 transwell方法观察各组肺腺癌A549细胞的侵袭性 实验组 对照组 学生t检验 miR 210降解cav 1蛋白mRNA的表达 致使基质Cav 1表达降低 实验组A549细胞侵袭性较低 实验总内容 miR 210结合基质Cav 1的mRNA 降低肺腺癌基质Cav 1的表达 促进肺腺癌的侵袭转移 正常肺旁组织标本约20例 量子点免疫荧光组织化学法检测基质Cav 1的含量 统计分析 组织芯片的构建 肺腺癌旁组织标本约100例 正常肺成纤维细胞 肺腺癌相关成纤维细胞 肺腺癌A549细胞 anti miR 210转染 实验组 对照组 实验组 对照组 实验组 量子点偶联靶向多肽标记后共培养 q PCR方法检测各组Cav 1蛋白mRNA和miR 210的表达 WB方法检测各组中Cav 1蛋白表达 transwell方法观察各组肺腺癌A549细胞的侵袭性 实验组 对照组 学生t检验 创新性 本课题首次研究miR 210和基质Cav 1在肺腺癌中的表达关系 本课题首次检测CAFs中miR 210和Cav 1在肺腺癌中的表达水平及关系 本课题首次分析miR 210调节基质Cav 1对肺腺癌侵袭转移的影响 本课题首次进行了肺腺癌CAFs与A549细胞共培养实验 创新性 miR 210转染CAFs 可行性分析 miR 210在前列腺癌等癌基质细胞出现异常表达 参与调节前列腺癌等的发病 侵袭 转移等 现阶段已阅读了大量相关文献 且已经完成部分试剂订购和材料准备工作 前期相关实验也取得了不错效果 申请人掌握了一定的基础知识和实验技术 学习成绩优异 对科研有着浓厚的兴趣 基础医学院有荧光显微镜 Westernblot仪 实时定量PCR仪 凝胶成像系统等实验仪器 完全能满足本课题的需要 前期准备 图1 200X 图2 200X 图3 200X 图一 基质caveolin 1在CAFs表达情况 图二 a SMA在CAFs中表达情况 图三 基质Cav 1与a SMA在CAFs中共表达 实验进度与分工 2016年3月 5月 完成试剂订购和材料准备 2016年6 12月 探究CAFs中miR 210与Cav 1之间的表达关 2016年1月 2017年4月 探究CAFs与A549细胞共培养对其侵袭