液相色谱测定双酚A.doc

液相色谱测定双酚A 摘要：由于双酚A在水样中通常为微量甚至痕量级，且水样基体复杂，干扰物多，往往难以直接测定，必须经过样品富集处理（包括萃取、洗脱、净化、浓缩、定容等步骤）后才可进行分析， 本实验采用了高效液相色谱法对水样中双酚A的测定。 关键词： 双酚A； 高效液相色谱； 水样。 双酚A(BPA)是一种重要的有机化工原料主要用于生产环氧树脂 、聚碳 酸酯 、聚砜树脂的单体 ；又可用作酚醛树脂 、可塑性树脂的生产原料和橡胶 、塑料 、农药 、油漆 、油墨等的抗氧化剂及稳定剂 ；在食具 、食品包装材料 、塑料制品 、防腐涂料 、外科修补术用的填充物 、输配水及贮水材料 等方面应用广泛。 BPA在一定条件下会因溶出 、迁移 、排放及事故等原因进入水体 。研究表明BPA不仅对水生生物有急性毒性 ，而且还具有雌激素的特性 ，是环境内分泌干扰物之一 ，可影响人或动物的中枢神经系统和生殖免疫系统 ，降低人或动物的生殖繁衍能力 ，并被怀疑诱发生殖系统和心血管系统的癌变等 。 因此 ，水样BPA的测定具有十分重要的意 义 。目前，水样中BPA的常规测方法主要有气相色谱一质谱联用法(GCMS) 、液相色谱一质谱联用法(LCMS) 、液相色谱一多级质谱联用法(LCMSMS)以及高分辨色谱一高分辨质谱法(HRGCLC HRMS)No等，Gomes 、任仁 、赵利霞等先后对此进行了评述 。基于色谱或色 一质联机的BPA检测方法灵敏度高 、选择性好，因此，本实验采用高效液相色谱法测定水中的双酚A。高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。高效液相色谱有高效液相色谱法有“四高一广”的特点：高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在1530分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在L数量级。应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。色谱柱还有可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。1. 实验部分1.1 仪器及试剂主要仪器：Agilent1200液相色谱，固相萃取装置 ，天平，旋转蒸发仪，氮气吹干仪，PH计，冷冻干燥机 。 试剂： BPA标准品，乙腈、甲醇、正己烷、二氯甲烷、四氯化碳、均为色谱纯，高纯水。1.2 标准溶液的配制称取0.1 g的BPA，配制成500 mgL-1BPA甲醇储备液，保存于4冰箱待用。实验时逐级稀释配制成低浓度的BPA水溶液。1.3 环境样品的采集水样采集后立即放入2-8保温箱中保存。1.4 液相色谱分析条件色谱柱： 30m0.25mm(内径) 0.25m(膜厚)，HP-5MS固定相；柱温：80(保持1min)，以20/min，至300(保持3 min)；进样口温度：250；色谱/质谱接口温度：280；载气：氦气，纯度99.99%， 柱流量1.0mL/min；流速：1ml/min 进样量：5L 比例相：901.5 工作曲线称取0.1009g BPA固体粉末溶解于甲醇中，定容至100mL作为储备液后用流动相逐级稀释，配制成一系列浓度的双酚A对照溶液，进行测定。以峰面积对浓度作图，得到工作曲线如下表。线性方程为 y = 4.5138x +12.7962，线形相关系数为：R2 =0.99993。 2.水样的前处理水样采用液-液萃取法。将水样过045m滤膜，量取1L倒入分液漏斗中，分次加入30、30、20 mL CH2C12，摇匀，合并萃取液，后用旋转蒸发仪浓缩到约0.5 mlmL，氮气吹干，用甲醇定容到1mL，4下保存，备用。3.环境样品中BPA含量的测定温度：25 流速：1ml/min 进样量：5L 浓度：1ppm比例相8085909395出峰时间5.0314.1473.6523.4393.363峰面积4953.24727.44635.64648.64680.8峰高752.5841.3842.6685.5636.3峰宽0.10080.08560.08420.10410.1098比例相：90 流速：1ml/min 进样量：5L 浓度：1ppm温度/20232425出峰时间3.6693.6523.633.652峰面积4619.14594.54570.34635.6峰高823.9818826.1842.6峰宽0.08640.08550.08450.0842比例相：90 进样量：5L 温度：25 浓度：1ppm流速(ml/min)0.50.81.0出峰时间7.1024.4593.652峰面积9004.35641.24635.6峰高967.2859.5842.6峰宽0.14620.10060.0842比例相：90 流速：1ml/min 温度：25 浓度：1ppm进样量/L35710出峰时间3.5913.6523.583.575峰面积2725.44635.663479048峰高546.2842.6893.71112.2峰宽0.07620.08420.11390.1289标准曲线：比例相：90 流速：1ml/min 进样量：5L 温度：25浓度/ppb1510501005001000出峰时间3.5593.563.563.5593.5583.5453.558峰面积10.328.151.9241.9474.223114504.8峰高1E03.56.833.667330.9841.1峰宽0.14420.11760.11280.10810.10660.11050.0825y = 4.5138x +12.7962 R2 =0.99993利用以上方法对水样进行检测，具有简便、快速、灵敏度高等特点，适用于水中痕量双酚A的快速测定。参考文献：1HEATHERM.STAPLETON,JOSEPHG.ALLEN, et al. Alternate and New Brominated Flame Retardants Detected in U.S. House DustJ.En