课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (5).doc

生物组 张黎 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案第 3 页 共 3 页一、筛选菌株的思路1、自然界中目的菌株的筛选（1）实例：PCR（ ）技术过程中用到的耐高温的DNA聚合酶的寻找。（2）过程：耐高温的DNA聚合酶_（3）说明：在寻找目的菌株时，根据它对 的要求，到相应的环境中去寻找。2、实验室中目的菌株的筛选（1）原理：人为提供有利于 生长的条件（包括 等），同时 其他微生物生长。（2）方法：利用 分离选择培养基：是指允许 微生物生长，同时 其他微生物生长的培养基选择分解尿素的细菌的培养基特点： 是唯一氮源，按功能归类为 _培养基。u 思考题1： 本课题使用的培养基 A.该培养基按物理性质划分为_培养基。b.该培养基中，为微生物提供碳源和氮源的物质分别是什么？ c.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，该培养基的配方是否对微生物有选择作用？如果有，如何选择？二、统计菌落数目1、常用方法： 。（1）统计依据当样品的 足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 ；通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。（2）计算公式_。（3）注意事项一般选择菌落数在 的平板进行计数。需培养计算出_或_以上的平板菌落求平均数。统计的菌落数往往比活菌的实际数目 ，原因是 .设置对照，目的是排除实验中 因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。2、其他方法：直接计数法（用显微镜直接计数）u 小组讨论：比较教材22页中两位同学的操作方法，哪位同学的结果接近真实值？你认为这两位同学的实验需要改进呢？如需要，如何改进？u 小组讨论：阅读教材23页上侧小字部分资料，如何设置对照实验，帮助A同学排除两个可能影响实验结果的因素？讨论1：A同学出现此结果的可能原因？讨论2：设置对照实验，帮助A同学排除上述两个可能影响实验结果的因素？3、 实验设计1、土壤取样（1）土壤取样的原因：土壤有“ ”之称，同其他生物环境相比，土壤中的微生物，数量 种类 。（2）取样部位：距地面约 的土壤层。2、样品稀释（1）稀释原因：样品的 直接影响平板上生长的 。（2）稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在 之间，便于计数。（3）稀释倍数测定土壤中细菌的数量，一般用 倍的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般用 倍稀释；测定真菌的数量，一般用 倍稀释。u 思考题2：为什么分离不同的微生物采用不同的稀释倍数？3、微生物的培养与观察（1）培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养 和培养 。（2）观察：本实验中，每隔 统计一次 数目，选取 的记录作为结果。4、细菌的计数课题延伸：菌种鉴定：细菌合成的 将尿素分解成 ，使培养基的碱性 。在以_ 唯一氮源的培养基中加入指示剂 培养细菌，若指示剂变 ，可以确定该种细菌能够分解尿素。练习题：1.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做( )A鉴别培养基 B加富培养基 C选择培养基 D基础培养基2.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目时，其结果与实际值相比( )A.比实际值要高 B.比实际值要低C.和实际值一样 D.比实际值可能高也可能低3.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是( )。A菌落数最多的平板 B菌落数量最少的平板C菌落数量适中的平板 D取若干个平板菌落数量的平均值4.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（ ）A一个细菌、液体培养基 B许多细菌、液体培养基C一个细菌、固体培养基 D许多细菌、固体培养基5.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养能分解尿素的细菌后，指示剂将()A变蓝色 B变红色 C变黑色 D变棕色6.下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：A.制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。B.为了得到更加准确的结果，选用_接种样品。C.适宜温度下培养。结果分析：（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是()A.一个平板，统计的菌落数是230B.两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C.三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D.三个平板，统计的菌落数分别是210、240和256，取平均值235（2）一同学在稀释倍