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布病作业指导书范文 布病作业指导书微生物操作方法 一、平板凝集试验（PAT） 1、备一方形洁净的玻璃板，划成25个方格（或更多），横数5格、纵数5格，第一列各格写下血清号码。 2、用0.1毫升吸管按下列剂量加受检血清于任何一行的各格中第一格0.08毫升，第二格0.04毫升，第三格0.02毫升，第四格0.01毫升。 如吸管不多，可于分注每份血清完毕后，在2-3个盛有生理盐水的杯中清洗六次以上，然后可用于吸注另一份血清。 3、加平板凝集反应抗原0.03毫升于各血清格中，用牙签或细铁丝混合，由血清量最小的格混起。 第份血清用一根牙签，用后集中烧毁。 若用细铁丝时，每份血清混合后用酒精棉球擦净，然后再用作另一份血清。 4、混匀后将玻璃板置于酒精灯火焰或凝集反应箱上，均匀加温，使其达到30左右，5分钟内记录反应结果。 5、每次试验用阴、阳血清各1份作对照。 6、按下列标准用加号记录反应强度+出现大的凝集片或小的粒状物，液体完全透明，100%凝集。 +有明显的凝集片，液体几乎完全透明，75%凝集。 +有可见的凝集片，液体不甚透明，50%凝集。 +液体混浊，只有少量粒状物，25%凝集。 -液体均匀混浊。 二、试管凝集试验（SAT） 1、血清稀释及加入抗原每份血清用10支小试管，第一管加入2.3毫升生理盐水，第二管不加，第三管至第九管各加0.5毫升。 用1毫升吸管吸取受检血清0.2毫升，加入第一管中，并混匀。 以该吸管吸取混合液分别加入第二和第三管，每管0.5毫升。 经该吸管将第三管混合液混匀，并吸取0.5毫升加入第四管，混匀，从第四管吸取0.5毫升加入第五管，依次加到第九管。 从第九管吸取0.5毫升弃去。 第十管作抗原对照。 从第二管起血清稀释度分别为112. 5、 125、 150、 1100、 1200、 1400、 1800、11600.。 2、加入抗原方法是先以生理盐水将抗原原液作110稀释，从第二管起每管加0.5毫升，血清稀释度从第二管起依次为 125、 150、 1100、 1200、 1400、 1800、 11600、13200.。 3、全部试验管充分振荡后置37度温箱中20-22小时，取出后放室温2小时，然后判定结果。 4、结果判定+等于完全凝集，上层液100%清亮。 +等于几乎完全凝集，上层液75%清亮。 +等于显著凝集，液体50%清亮。 +等于有凝集出现，液体25%清亮。 -等于无凝集，液体不清亮。 三、平板和试管凝集反应的关系0.08毫升血清量出现反应相当于试管法125的血清稀释度，0.04毫升相当于150，0.02毫升相当于1100，0.01毫升相当于1200。 四、判定平板凝集试验（PAT）0.02
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