细胞原血红素分析技术生物学效果评价PPT课件.ppt

细胞原血红素a b c分析技术生物学效果评价 1 临床检验结果准确 具有跨时空的可比性 是防病治病和提高人类健康水平的基本需要 也一直是检验医学界的工作目标 2 检测结果可靠性的含义是准确度 国际上准确度的定义为 检测结果和被检测物 分析物真值间的一致性 但是 对每个标本只作一次测定时 检测结果必然存有差异 差异不仅包括分析过程的不准确度 也包括了分析过程的不精密度 3 在临床实践中 实验室检测结果的准确度受到多种因素的影响 除检测过程外 还包括患者采样前的准备 标本的采集和处理 参考区间的使用等 患者的饮食 用药 生活习惯 生理变化等都可直接影响检验结果的准确性 人体生理 病理状态的变化存在较大的波动性 因此 对检验方法的准确度要求也需在合理的范围内 4 临床实验室的检验结果的准确性涉及两方面的问题 检验结果数据的准确性和依据检验结果对人体健康状况 如是否患病 进行判定的准确性 前者是计量学关心的问题 后者是临床应用问题 准确性 accuracy 正确性 trueness 精密度 precision 其他测量能力 线性范围 灵敏度 特异性 5 无论诊断试验在对疾病的诊断中所起的作用如何重要 它的任务都仅仅是为临床医师作出对疾病的诊断提供证据 有时虽然某项诊断试验的结果为阳性 但不一定就被诊断为患某病 所以 无论诊断试验的结果如何 它都不等于诊断 而只能提供受检查者患某病的证据和可能性 6 从临床应用角度考核检验试剂的可靠性 是以其能否区分健康与疾病的能力作为依据的 目前还很难找到100 可靠的试验 任何试验都会出现假阳性或假阴性 7 根据卫生部 医院管理评价指南 2008年版 第七条 三级综合医院评价指标参考值 之规定 临床主要诊断 病理诊断符合率 60 8 著名病理学家 博士生导师纪小龙教授统计资料显示 门诊误诊率是50 住院误诊率是30 他感慨道 医生永远是无奈的 因为他每天都面临着失败 9 评价检验结果的精准度取决于通常的计量学溯源 量值溯源的一致性是国际间相互承认结果的前提条件 中国合格评定国家认可委员会 简称CNAS 将量值溯源视为测定结果可信性的基础 10 通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链 使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准 通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性 引自VIM 1993 定义6 10 溯源性 traceability 11 通常情况下 溯源性只解决 正确度 问题 对检验方法性能的其他方面 如精密度 线性 抗干扰力等 溯源 则显得苍白无力 实验室检验结果的准确度 取决于测定方法的综合性能 对临床实验室来说 由于其检验结果或数据是临床医学的辅助信息 测定方法的精密度与再现性有时显得更为重要 12 定性检测不可能实现量值溯源 而是具有叠加态坍缩特性 叠加态是有n个本征方程线性叠加而来 用波函数来描述 但是我们最后观察到的只有一种情况 也就是我们解方程最后只能有一个解 解方程的过程就是测量 获得什么解就要看不同本征态的概率怎么样了 这是所谓的坍缩 13 定性检测结果的寓意 阳性与阴性的叠加态 真阳性与假阳性的叠加态 真阴性与假阴性的叠加态 获得某一征态的 解 征态的概率 另一征态顺势坍缩 14 真阳性征态早期 线粒体释放 原血红素a c b 中晚期 线粒体释放 原血红素a c b 肿瘤出血 原血红素b 假阳性征态合并症出血 原血红素b 脓毒血症 妊娠期 烧伤 孤独症等 原血红素a c b 真阴性征态非肿瘤病变假阴性征态取材漏检 试剂漏检 原血红素1ng ml 癌症上皮防御 15 日本学者藤田在2017年的 naturecellbiology 中报道 新出现的癌细胞通常会被周围正常的上皮细胞排挤并消灭 这个过程被称为癌症上皮防御 epithelialdefenceagainstcancer EDAC 癌症上皮防御 与 瓦博格效应 极为相似 细胞内均会发生线粒体功能障碍和葡萄糖摄取升高两种代谢变化 由于两者的监管机制不同 在癌症的发展中表现出了截然相反的结果 瓦博格效应促进肿瘤发展 而癌症上皮防御机制限制了早期肿瘤细胞的生存 16 普遍认为 瓦博格效应促进了癌症发展 而研究人员却发现这种类似瓦博格效应的新陈代谢变化反而会限制早期肿瘤细胞的生存 尽管瓦博格效应的典型特征也是线粒体下调和糖酵解增加 但是由于分属于不同的监管机构 因此在癌症的发展中表现出了截然相反的结果 藤田说道 17 18 20 人体中的血红蛋白包括有三部分 第一部分是存在于人体细胞线粒体内的血红素蛋白 这部分占人体血红素蛋白总量的1 这部分的量虽然少 但它广泛分布在人体各种细胞中 它又分为两种 分为细胞色素 参与细胞氧化 磷酸化反应中的承担电子传递功能能量 和以血红素为辅基的酶 参与细胞能量代谢的多种生物化学反应 信号传递功能 产生过氧化物 超氧化物 维持体内自由基平衡 21 第二部分是血红蛋白 占人体血红素蛋白总量的90 它是分布在红细胞内 承担氧及二氧化碳运输功能 第三部分是肌红蛋白 占人体血红素蛋白总量的9 它是分布在肌肉纤维细胞内 承担氧及二氧化碳储存功能 本技术检测的是从第一部分原血红素蛋白分离出来的原血红素 22 本技术检测的是在细胞恶变过程中的早期出现时 恶变细胞将从原血红素蛋白中分离出来的原血红素排出体液中 早期细胞恶化的组织渗液中含有的是从细胞线粒体内分离出来的游离的原血红素 我们通过检测体液是是否含有原血红素 来诊断是不是发生细胞的恶变 因此 本技术是通过检测组织渗液中是不是含有从细胞线粒体内分离出来的游离的原血红素 来发现是不是细胞恶变的可能 23 本技术检测时 由于是游离的原血红素 那么检测阶段是要避免其它细胞内中的原血红素分离出来 否则 就会造成误诊 但是 在这个早期阶段内 也有可能由于其它疾病 合并症 等造成在组织体液样本内产生部分的红细胞 这些红细胞也有可能会释放原血红素或血红素 就会造成假阳性 造成误判 为了避免这种情况的发生 保存液需要维持红细胞的完整性 尽量减少红细胞的裂解 可以减少假阳性的概率 所以 我们在技术设计上不破坏红细胞 24 但是 到了肿瘤晚期 肿瘤组织本身就会出现肿瘤接触性出血甚至肿瘤坏死出血 样本中将有较多的肿瘤组织的红细胞出现 这是肿瘤组织释放的红细胞 而不是其它疾病 合并症 出现的红细胞 此时检测到的肿瘤细胞原血红素是细胞线粒体内的原血红素和肿瘤出血红细胞含有的原血红素的混合物 是阳性反应而不是假阳性了 在上次答辩文件中出现的 检测肿瘤组织及组织渗液中红细胞所含的原血红素 是正确的 但是没有分清肿瘤病变的早期和晚期原血红素产生机制的区别 早期的假阳性和晚期真阳性的区别 是造成误解的原因之一 25 血红素蛋白分类细胞色素 含原血红素酶血红蛋白肌红蛋白活性基原血红素a b c原血红素b原血红素b真阳性线粒体内膜释放肿瘤性出血肿瘤浸润坏死假阳性非肿瘤性出血组织炎症 损伤肌肉损伤出现时间早期中 晚期晚期 26 原血红素与组织细胞恶性变的相关性 蛋白质构象改变血红素a c b 接触性出血血红素b c a 肿瘤出血血红素b c a 早期 中晚期 肿瘤筛查试验 肿瘤诊断试验 27 敏感度是指由金标准确诊有病的实验组内所检测出阳性病例数的比率 即实验诊断的真阳性率 其敏感性越高 假阴性率也就越低 假阴性率等于漏诊率 因此 敏感性高的实验诊断用于疾病诊断时其值越高 漏诊的机会就越少 本技术的敏感度为90 6 漏诊率为9 4 28 特异度指由金标准确诊为无病的对照组内所检测出阴性人数的比率 即诊断实验的真阴性率 特异性越高 其假阳性率也就越低 假阳性率等于误诊率 因此 特异性越高的检验诊断方法用于疾病诊断时 其发生误诊的机会就越少 本技术的特异度为80 7 误诊率为19 3 29 准确性是指临床诊断检测出的真阳性和真阴性例数之和 占病例数的比例 准确性反映了实验诊断的基本特性 即 敏感性和特异性 准确度高的实验诊断方法 其敏感性和特异性之和也一定较高 假阳性和假阴性之和也就最小 本技术的准确性是84 7 30 阳性预测值 positivepredictivevalue 由诊断试验检测为阳性的样本中 真正患病者所占的比例为阳性预测值 阳性预测值主要受患病率的影响 患病率越高 则阳性预测值也高 临床医师根据某病的患病率和诊断试验的阳性结果就能预测就诊者某病的可能性大小 当患病率一定时 特异性越高 阳性预测值越准确 本技术阳性预测值是76 6 31 阴性预测值 negativeprdeictivevalue 由诊断试验检测为阴性的样本中 真正无病者所占的比例为阴性预测值 当患病率一定时 诊断试验的敏感性越高 则阴性预测值越高 本技术的阴性预测值是92 5 32 阳性似然比是指用诊断试验检测经诊断金标准确诊的患病人的阳性率与以金标准排除诊断的受试者中试验阳性即假阳性率之间的比值 真阳性率愈高 则阳性似然比愈大 本技术阳性似然比是4 96 33 阴性似然比指假阴性在金标准诊断患病人群中的比例与真阴性在无病人群中的比例的比值 也可表示成 1 敏感性 除以特异性 阴性似然比表示在诊断试验为阴性时 患病与不患病机会的比值 本技术阴性似然比是0 12 34 约登指数 Youdenindex 是评价筛查试验真实性的方法 假设其假