生物安全实验室的个体防护.doc

生物安全实验室的个体防护生物安全实验室： 具有一系列特殊物理防护设施（屏障）、严格的管理制度和标准操作规程，能够安全地进行生物学实验的实验室。Physical protection（P1-P4）Biological safety laboratory（BSL1-4）生物安全防护三原则 安全设备 个体防护装备和措施 严格的管理制度和标准化的操作程序及规程确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境不受其污染 不注意安全易导致的意外事故针刺伤（穿刺）碎玻璃刺伤（不穿鞋，刺伤手）载玻片割伤（显微镜下计数细胞）溅入口腔，溅入眼睛（分装/冻存样品）离心管破裂，滑倒跌伤，酒精灯损坏负压泵接管损伤，过滤分装毒种过程美国CDC医务工作者感染HIV数据统计污染源情况暴露途径利器类型47 HIV+血液45 针刺或割伤41 中空针头1 HIV+带血体液5 黏膜暴露2 破玻璃1 HIV+其他体液1 针刺+黏膜1 解剖刀3 HIV+病毒液 （实验室）1 不清 1 不清*截止到97年6月，52HCWs职业事故感染，另加114未证实感染的报告发生事故后可以造成严重危害安全事故 受伤者感染 发病 死亡受伤人员的生活及工作环境压力 工作队伍的稳定性降低个体防护装备（ Personal Protective Equipment，PPE）是通过设立屏障保护工作人员免受工作场所生物危险的伤害。PPE不能替代优质工程，或严格的行政管理，或熟练的工作技能, 但应与之相互结合，以确保工作人员的安全和健康。个体防护装备项目包括： 管理人员、工作人员及生物安全部门的职责；危险性评估及个体防护装备的选择； 工作人员的培训； 保存必要的培训记录。 管理人员的职责管理人员对工作场所实施PPE负有主要责任，包括： 为工作人员提供合适的PPE； 确保工作人员接受过PPE正确使用、护理及清洁方面的培训； 保存PPE分配及培训记录； 监督工作人员确保其遵循PPE项目、正确使用和保养PPE； 寻求生物安全委员会帮助，进行危险性评估； 出现新的危险，或实验进程增加或更改时，要及时报告OHS； 确保缺损仪器设备及时更换。 工作人员的职责PPE使用者有责任遵循PPE项目的要求，包括：根据要求穿戴PPE；参加所要求的培训课程；按照要求护理、清洁及保养PPE；如有需要修理或替换的PPE，要及时报告管理人员。生物安全办公室的职责（Office of Health and Safety， OHS ）OHS负责启动、实施并管理PPE项目，包括： 指导工作场所危险性评估，确定是否必须使用PPE；根据管理人员和或OHS的要求，指导工作场所定期危险性评估；保存危险性评估记录；PPE经核准使用后，向管理人员提供关于其使用、保管及清洁方面的培训和技术指导；向管理人员提供选择和购买PPE的指导意见； 定期评估先前选择的PPE的适用性；考察、更新并评估PPE项目的全面效果。危险性评估及个体防护装备的选择OHS及管理人员负责：确定工作场所是否需要PPE；选择每次工作所需要的合适PPE；每一工作场所均需检查，列明检查结果及所需的具体防护装置。 OHS及管理人员共同负责指导对每一工作场所进行初步检查，确定危险源，包括撞击、刺伤、 压力、化学试剂、热、灰尘、电源、材料处理及光辐射。每次检查均应建档，包括所检查的工作场所、执行检查的人员、潜在危险源的检测结果 及检查日期。 一旦确定危险源， OHS将负责确定合适的PPE，确保防护水平大大高于保护工作人员免受伤害所需要的最低防护水平。 注意识别同时暴露于多种危险源的可能性。提供或建议购买对每一种危险因子最高水平的充分的防护装备。 眼及面部防护戴护目镜或眼部防护装置：工作人员、参观者、研究人员、承包商、或其他经过对眼部有伤害区域的人。 危险源：飞扬的颗粒, 熔化的金属, 酸或腐蚀性液体, 化学试剂, 气体, 或蒸汽, 生物气溶胶, 或潜在的有害的光辐射。 侧面防护器：飞扬物 护目镜及面部防护器：化学试剂的飞溅 带滤光镜的装备：光辐射戴近视远视眼镜者？戴隐形眼镜者？紧急洗眼设备在工作人员可能暴露于腐蚀性材料的所有场所均需提供紧急洗眼设备，且该设备应位于紧急情况下易接近的位置。呼吸防护设备头部防护使用人员：职员、建筑承包商、工程师、检验员、参观者及其他工作人员。 危险源：坠落物或某些确定的物体，或电击。防撞帽头盔：保护头皮免受尖锐物体划伤。但不能替代安全帽，因其不能承受高度撞击力或坠落物体的穿透力。脚部防护防撞击的防护鞋靴：搬运或处理可能会掉落的包裹、物体、零件或重的工具时；物体有可能砸到脚面时。防压力的防护鞋靴：使用滑轮车或使用可能翻滚到工作人员脚上的材料或设备时。防刺穿的防护鞋靴：行走时可能被钉子、金属丝、大头针、螺丝钉、大U形钉、金属片等尖锐物扎伤时。 手部防护戴手套：化学试剂、切割、划伤、擦伤、刺伤、烧伤、生物学伤害及极端温度伤害。手套的选择：性能（厚度、渗透性）、条件、耐用性及危险因子 One type of glove will not work in all situations. PPE的清洁及养护眼及面部防护装备的清洁尤其重要！定期检查、清洁、及养护PPE未清洁消毒之前，工作人员不能共用培训何时必须穿戴PPE 需要什么样的PPE 如何穿、脱、戴及调整PPE PPE的局限性 PPE的养护及处理记录培训人员名单， 培训类型，培训时间人员培训记录至少保持3年根据实验室的安全级别选择及使用不同的PPE基本要求工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。 工作时必须戴手套（两付为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。 在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。BSL1实验室的个体防护工作人员在实验时应穿工作服，戴防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套BSL2实验室的个体防护除符合BSL1的要求外，还应该符合下列条件： 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。BSL3实验室的个体防护除符合BSL2的要求外，还应该符合下列条件： 在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备。 当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。 工作时必须戴手套（两付为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。 在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。在使用传染性物质或已被污染的仪器时，需戴手套。在使用电话、计算机等设备进行文书工作前，必须 脱掉手套。 切记不能带着手套离开BSL-3实验室。所有离开BSL-3实验室的物品必须正确消除污染，并放在干净的容器或袋子中。有可能溅出或喷出传染性物质、危险试剂时，需使用面部和眼部防护器具。 当有程序不能在生物安全柜内处理时，要组合使用适当的操作人员防护设备（如面罩、呼吸器）和物理容器设备。BSL4实验室的个体防护除符合BSL3的要求外，还应该符合下列条件： 在实验室中所有感染性材料的操作时，都必须在III级生物安全柜中进行。如果工作人员穿着整体的（生命维持系统供气的正压工作服），则相关操作可在II级B型生物安全柜中进行。所有工作人员进入BSL4实验室时都必须换上全套实验室服装，包括内衣、内裤、衬衣或连衫裤、鞋和手套等。所有这些实验室保护服在淋浴和离开实验室前均必须在更衣室内脱下。 当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。与灵长类动物接触时，应考虑其粘膜暴露对人的感染危险，要戴防护眼镜和面部防护器具。 室内有传染性灵长类动物时，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。进行容易产生高危险气溶胶的操作时，包括对感染动物和鸡胚的尸体、体液的收集、动物鼻腔接种，都要同时使用生物安全柜或其它物理防护设备和个人防护器具（例如口罩和面罩）。 在危害评估的基础上使用个体防护设备。操作感染动物和传染性材料时都要使用个体防护设备实验室污染及其防护实验室污染问题是：实验能否进行及维护实验室安全的重要问题，污染是多向及多因素的，可由病毒污染人或人污染细胞，细胞与病毒间的交叉污染。病毒污染的防护病毒对人的污染是一个重要的实验安全问题，除上述实验操作中应严格按照要求穿无菌服，带手套、口罩、帽子，眼镜外，还应注意以下事项： 实验室中必备下述消毒液体，并由值日人员及时更换以保证其有效的消毒作用：（1）0.5%的次氯酸钠溶液;（2）1.0%的来苏尔溶液;（3）70%乙醇溶液及棉球实验室内不可有锐器（刀、针、碎玻璃等）暴露，剪刀用完后应立即放回盒中，一次性针头用完要放入饭盒内高压消毒；不慎打破玻璃器皿必须立即将全部碎片收集干净 手套在使用前应检查是否漏气； 遇到有手部或其它身体暴露部位有皮肤破损时应停止一切工作，待创面愈合后才能从事实验工作；如在带毒实验中割伤皮肤，应立即将伤部浸泡入消毒液中，并尽量挤出伤部血液。 在实验中遇到其它意外事故（如火灾等）在排除事故的同时应立即消灭传染源，严防被感染或感染其他人； 实验完成后，必须消毒工作台面及打开紫外灯照射30分钟。细胞污染的防护应严格遵守无菌操作； 每批培养液或血清必须预先作培养后才能使用； 含抗生素的培养液不应长期存放于4，因PS易失效，若用已放置过久的生长液，应追加新鲜的抗生素；为防止霉菌污染可加入10ul/ml制霉菌素；细胞污染应立即放弃培养，对必需保留的轻度霉菌污染的培养物，可将细胞与霉菌尽量分开，然后加大制霉菌素的量（30ul/ml）； 实验前应做好充分准备，实验开始后不应再出实验室，或尽量不要离开生物安全柜。操作者间交互污染的防护带毒操作时应尽量减少接触其它无关物品，工作中污染的区域或物品必须立即消毒，以免忘记，实验后必须立即处理实