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第 页实验四 凝集反应实验原理 在一定浓度的电解质溶液中,颗粒性抗原与相应抗体结合后,出现肉眼可见的凝集块,称为凝集反应。凝集反应是一种定性的检测方法,也可以进行半定量检测。凝集反应可分为直接凝集反应和间接凝集反应。由于凝集反应方法简便,目前在临床检验中仍被广泛应用。 直接凝集反应细菌、细胞等颗粒性抗原,在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集,称为直接凝集反应 。常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。玻片凝集试验ABO血型鉴定玻片凝集试验为定性试验,一般用已知抗体作为诊断血清,与受检颗粒抗原,如菌液或红细胞抗原各加一滴在玻片上,混匀,数分钟后即可用肉眼观察凝集结果,出现凝集颗粒的为阳性。此法简便,快速,适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断或分型,也可用于红细胞ABO血型的鉴定。人类ABO血型抗原主要有A和B两种,根据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分为四种。据此,将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合,抗A或(和)抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,据其凝集情况便可判定出受试者的血型。ABO血型的划分红细胞表面Ag血清中AbA型A抗BB型B抗AAB型A、B、O型、抗A、抗B实验材料 1、试剂:ABO血型鉴定试剂盒内含抗A分型试剂和抗B分型试剂各1支。(血型纸、标准红细胞、标准血清A、B型)2、器材:一次性采血针、双孔凹玻片、75酒精、牙签、灭菌棉签。实验方法、步骤1、取洁净双孔凹玻片(载玻片)1块,并标记(如图) A B2、将抗A、B分型试剂分别加1滴于标记有A、B的玻片两侧。3、用酒精棉签消毒被检者手指尖端,以采血针刺破皮肤,稍加挤压,使血液流出。用另一载玻片一端取适量血液加入抗A分型试剂,并混匀;用另一端再取适量血液加入抗B分型试剂,并混匀。用干棉签止血。 4、观察红细胞有无凝集发生。如有凝集,可见红细胞凝集成块;无凝集,红细胞呈均匀分散。判定结果后把玻片放入消毒液中。实验结果记录受检者红细胞凝集情况,根据ABO血型鉴定表(下表),判断受检者的血型。 ABO血型鉴定表抗A分型试剂侧抗B分型试剂侧血型+A+B+ABO“”表示红细胞凝集,“”表示红细胞未凝集注意事项1、试验用载玻片要清洁,注明A和B字样。2、实验用具严格消毒,消毒采血针应一人一针。3、取血切勿过多,以防止在血清中形成团块,影响判断结果。4、分清牙签,不要用一牙签一端同时在抗A血清和抗

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