日本检测恶霉灵试验方法.doc

精品文档恶霉灵试验法（农产物）.分析对象化合物恶霉灵（HYMEXAZOL）.装置碱性的热离子化检测器附着气相色谱仪（GC-FTD）或高灵敏度氮、磷检测器附着气相色谱仪（GC-NPD）气相色谱仪质谱仪（GC/MS）3.试药、试液下述所示物质以外，也用总则的3所示的物质。恶霉灵标准品 本品含恶霉灵99% 以上，融点在86874.试验溶液的调制 1）抽出（1）谷类、豆类及种子类的情况采集称量试料10.0g，加入水20mL，放置2小时。向其加入乙腈50mL，均质化后，吸引过滤。过滤纸上的残留物加入乙腈20mL均质化，与上述相同过滤。得到的液体混合，加入乙腈到100mL。采集此液体20mL，加入-己烷30mL，分3次振动抽出-己烷饱和乙腈30mL。抽出液混合，在40以下浓缩为20mL。向其加入氯化钠10g及0.01 mol/L盐酸15mL，剧烈振动10分钟后静置，分取乙腈层和水层。乙腈层加入无水硫酸钠脱水，过滤出无水硫酸钠。水层注入多孔性硅藻土柱（20mL保持用），放置15分钟后，注入醋酸乙酯100mL。溶出液和先前的乙腈层混合，在40以下浓缩，除去溶媒。此残留物溶解于醋酸乙酯，准确到1mL。（2）水果、蔬菜、香草、茶及啤酒花的情况水果、蔬菜及香草的情况采集称量试料20.0g。茶及啤酒花的情况下采集称量5.00g，加水20mL,放置2小时。向其加入乙腈50mL，均质化后吸引过滤。滤纸上的残留物加入乙腈20mL均质化，与上述相同过滤。得到的溶液混合，加入乙腈，准确到100mL。采集此溶液20mL,加入氯化钠10g及0.01 mol/L盐酸15mL剧烈振动10分钟混合后静置，分取乙腈层和水层。乙腈层加入无水硫酸钠脱水，过滤出无水硫酸钠。水层注入多孔性硅藻土柱（20mL保持用），放置15分钟后，注入醋酸乙酯100mL。溶出液和先前的乙腈层混合，在40以下浓缩，除去溶媒。此残留物溶解于醋酸乙酯，水果、蔬菜及香草的情况下准确到2mL，茶及啤酒花的情况下准确到0.5mL。 2）精制 向十八烷矽烷基化硅胶迷你柱（500mg）注入醋酸乙酯10mL，舍弃流出液。向此柱注入1）得到的溶液0.5mL后，注入醋酸乙酯5mL，溶出液在40以下浓缩，浓缩到0.5mL作为试验溶液。5.校准曲线的作成 恶霉灵标准品的0.02mg/L醋酸乙酯溶液调制数份，各1L注入GC，峰高法或峰面积法作成校准曲线。6.定量 试验溶液L注入GC，用5的校准曲线求得恶霉灵的含量。7.确认试验根据GC/MS8.测定条件 1）GC 检出器：FTD或NPD 柱：硝基对苯二甲酸修饰聚乙二醇，内径0.32 mm，长15m，膜厚0.50m 柱温度：60（分）20/分180（分）/分200 注入口温度：230 检出器温度：230 载体气体：氦 保持时间：7.5分 2）GC/MS 柱：5%苯基-甲基硅，内径0.25 mm、长30、膜厚0.25m 柱温度：50（分）25/分125（分）10/分250 注入口温度：250 载体气体：氦 电离模式（电压）：EI（70eV） 主离子（m/z）：99 注入量：L 保持时间：6.5分9.定量界限0.02 mg/kg 10.留意事项 1）试验法的概要 恶霉灵是用乙腈从试料抽出，盐析。乙腈层和水层分开，水层在多孔性硅藻土柱负载的醋酸乙酯溶出恶霉灵。醋酸乙酯溶出液和乙腈层混合，用十八烷矽烷基化硅胶迷你柱精制，用GC-FTD或GC-NPD测定，用GC/MS确认。 2）注意点 （1）关于GC测定，因为试料注入口容易引起吸着转移，玻璃镶嵌要使用活性度低的。另外，含油脂多的试料的情况下，特别容易吸附着，因此测定此类试料时要注意感度低下，根据需要实施交换玻璃镶嵌等措施。 （2）恶霉灵的挥发性高，减压浓缩在溶液残留数毫升的时候停止，其后在氦气流下除去溶媒。此时要十分注意不要干固。另外，也可以使用保持片（还是夹子不太清楚），但是聚乙二醇在GC注入口溶液引起吸附所以不使用的好。 （3）在氦气流下的浓缩操作是损失的原因，所以向溶液吹气时要吹的溶液起漩涡，使其不干固。 （4）用十八烷矽烷基化硅胶迷你柱精制后的浓缩操作是在氦气流下进行。 （5）8的2）所示的条件，浓度低时，在总离子色谱图上有可能存在不能确认峰值的情况，将试验溶液再浓缩或用1）GC所示的柱进行测定等方法应对。11.参考文献 1）环境厅告示第28号恶霉灵试验法（昭和53年月12日