溶出度方法的选择及验证PPT课件.ppt

溶出度 1 概念与适用范围溶出度方法的建立影响溶出度的因素溶出度的比较问题 2 溶出度概念 指制剂 片剂 胶囊剂或颗粒剂等固体制剂 中有效成分在规定介质中溶出的速度与程度 是反映制剂生物有效性的体外测定方法 3 适用范围溶解度在微溶以下的药物溶解度虽在略溶以上 但处方与工艺造成阻溶的制剂治疗剂量与中毒剂量接近的制剂缓释制剂 控释制剂 肠溶制剂 透皮贴剂等易溶于水或极易溶于水的药物 也应考察溶出度标准中未列溶出度项 如果全部企业样品均在15分钟内溶出85 以上 则可以不将溶出度列入标准标准中已列溶出度项 不要轻易删除溶出度项 4 体内外相关性溶出度 体外药物指标成分的溶出方法生物利用度 体内血药浓度 尿药浓度法 5 概念和适用范围溶出度方法的建立影响溶出度的因素溶出度的比较问题 6 中 美 英 日四国药典收录情况 7 凡检查溶出度的制剂 不再进行崩解时限的检查 第一法转篮法第二法搅拌桨法 浆法 第三法小杯搅拌桨法 小杯法 8 第一法转篮法 除另有规定外 量取经脱气处理的溶剂900ml 注入每个操作容器内 加温使溶剂温度保持在37 0 5 调整转速使其稳定 取供试品6片 个 分别投入6个转篮内 将转篮降入容器中 立即开始计时 除另有规定外 至45分钟时 在规定取样点吸取溶液适量 立即经不大于0 8 m微孔滤膜滤过 自取样至滤过应在30秒钟内完成 取滤液 照各药品项下规定的方法测定 算出每片 个 的溶出量 9 转篮分篮体与篮轴两部分 均为不锈钢金属材料制成 转篮旋转时 摆动幅度不得超过 1 0mm 10 适用范围胶囊 丸剂 片剂漂浮的制剂转篮与转轴 不锈钢或其他隋性材料溶出杯 硬质玻璃或其他隋性材料先降转篮 再开电机 11 优点应用广泛装置简单 成熟缺点制剂在篮中的位置对测定有影响篮下流体力学死区逸出气体对测定有影响粘性物质易堵塞网孔自动化比较困难 12 第二法搅拌桨法 溶剂处理同第一法 取供试品6片 个 分别投入6个操作容器内 立即启动旋转并开始计时 其它同第一法测定 用于胶囊剂测定时 如胶囊上浮 可用一小段耐腐蚀的金属线轻绕于胶囊外壳或装入沉降篮 呈圆柱形 内径为12mm 长25mm 由10根不锈钢丝 丝径为1mm 0 1mm 焊接而成 周围以间隔为3 5mm的不锈钢丝螺旋缠绕 上下两端以2根不锈钢丝十字形固定 一端可开关 13 首选方法先降浆 再投药 后开电机适用范围片剂 胶囊 丸剂 14 优点广泛应用 适用性强易于自动化缺点流体动力学复杂 制剂在杯中的位置 下沉或漂浮 影响药物溶出桨底易形成 锥形堆积 漂浮制剂不适用对搅拌桨和溶出杯几何尺寸的精度要求较高 搅拌轴方向的微小改变会引起溶出结果的明显偏离 15 由不锈钢金属材料制成 旋转时摆动幅度A B不得超过 0 5mm 16 17 第三法小杯搅拌桨法 除另有规定外 量取经脱气处理的溶剂100 250ml注入每个操作容器内 以下操作同第二法 18 适用范围小剂量的片剂 胶囊 丸剂仅供UV VIS测定HPLC测定应采用篮法或桨法 19 流池法 20 桨碟法 21 方法建立过程 1 明确溶出度的目的2 主药和辅料性质3 溶出介质的选择4 溶出仪器的选择5 转速的选择6 方法学的验证7 溶出曲线的绘制 22 1 确定测定溶出度的目的 仿制 与被仿药物一致创制 明确期望的溶出速率急救药 数分钟内迅速溶出 如 硝酸甘油片抗生素 根据抗生素后效应 采用脉冲给药 快速溶出 使血药浓度迅速达MIC或MBC 减少不良反应 减少微生物变异 如 内酰胺类 大环内酯类 氟喹诺酮类抗生素一般不推荐缓释剂型普通降血压 降糖制剂 先快速 后中低速治疗慢性病的药物 慢速 恒速缓释剂型 先快速 后恒速 23 1 确定测定溶出度的目的 确定溶出条件仿制 与被仿药物标准一致创制 研究选择方法溶出条件 介质 含量测定方法 结果分析仿制 溶出曲线比较创制 确定取样点数 取样时间与溶出限度 进行体内外相关研究 24 2 主药和辅料性质 一是药物在不同pH条件下的溶解度 或在不同介质中的溶解度 二是药物在溶液状态下的药物的稳定性 25 2 主药和辅料性质 漏槽条件漏槽条件是指药物所处释放介质的浓度远小于其饱和浓度 一般释放介质的体积为药物饱和溶液所需介质体积的3 7倍 漏槽条件即做溶出的最佳条件 26 3 溶出介质的选择 溶出介质的选择部分是根据药物溶解度和制剂规格确定的 以保证符合漏槽条件溶出介质首选水 其次是0 1mol L盐酸 缓冲液 pH值3 8 人工胃液或人工肠液 若介质中加适量有机溶剂如异丙醇 乙醇或加分散助溶剂如十二烷基硫酸钠 0 5 以下 等 应有文献依据 并尽量选用低浓度 27 3 溶出介质的选择 对于普通口服制剂的溶出行为考察需在pH1 2 6 8范围内进行 在方法的建立阶段 尚有必要对溶出前后的pH是否发生变化进行检查 28 对于药物可以在胃部快速溶解和通透性高的 胃排空时间可能是吸收的限速步骤 对于这类药物 溶出度检查主要是证明药物在胃液条件下可以快速溶出 对于药物主要在肠道溶出的 如难溶性药物 弱酸 选择较高的pH范围 如pH6 8的人工肠液 可能是适宜的介质 29 水 最常用 良好脱气水的pH值为5 0 7 0适用于溶解度对pH值不敏感的药物 30 盐酸溶液 模拟酸性胃液的介质适用于酸中稳定的药物浓度一般为0 1 0 01mol L pH值一般为1 0 2 2 31 醋酸盐缓冲液 模拟中等酸性胃液的介质浓度一般为0 05mol L pH值一般为3 4 6 0醋酸易挥发 导致pH值变化 溶出速率变化 测定时间长的药物不宜采用醋酸盐缓冲液作介质 32 磷酸盐缓冲液 PBS 模拟中等酸性至弱碱性胃液或肠液的介质浓度一般为0 05mol L pH值一般为4 5 7 6 33 介质的pH值原则 根据体内吸收部位的pH值环境药物溶解度对pH值的敏感性药物的稳定性来选择介质的pH值胃的pH值范围 1 2 7 6十二指肠为3 1 6 8小肠为5 2 6 0胃内快速溶解并快速吸收的药物 选择低pH值 如盐酸溶液肠道溶出的药物 一般选择较高pH值 如pH值6 8的PBS 34 35 介质的pH值介质的pH值一般不超过7 6如需使用更高pH值的介质 则应进行验证 证明其体内外溶出的相关性肠溶制剂 建议先用酸性介质 然后添加适宜温度的缓冲溶液 再用酸或碱调节至所需的pH值该法的优点是操作简便 易于自动化 但应注意调节pH值时产生热对介质温度的影响 36 表面活性剂不建议添加表面活性剂必须加时 一般应 0 5 常用的表面活性剂 聚山梨酯20 80 十二烷基硫酸钠等推荐 聚山梨酯20 80 表面活性类似胃液日本 表面活性剂只允许使用吐温 不得用有机溶剂 37 3 溶出介质的选择 大杯法 第一 二法 常用体积为500 1000ml小杯法 第三法 常用体积为100 250ml 38 4 溶出仪器的选择 转篮法常用于胶囊 也可用于片剂 桨法常用于片剂 也可用于胶囊 对于小规格制剂的溶出度检查 可考虑选用小杯法 介质体积可选择200ml 对于片剂或胶囊溶出过程中转篮筛网被堵塞的 溶出度检查建议改为桨法 漂浮的制剂选转篮法 39 5 转速的选择 各国药典中收载的溶出度测定方法中的转速 大部分在50 100转 分 转篮法以100转 分为主 桨法以50转 分为主 小杯法以35转 分为主 转篮法100转 分 桨法50转 分 小杯法35转 分 40 6 方法学验证内容 溶出度测定常同含量测定 采用HPLC UV方法 以下情况需重新方法学验证测定所用的溶剂 溶出介质 不一致测定浓度与不一致测定制剂为胶囊剂或需去除糖衣 薄膜衣后测定含量的片剂 则均需重新进行溶出度测定方法验证 41 6 方法学验证内容 回收率精密度专属性 辅料 胶囊壳等的干扰试验 线性耐用性 42 6 方法学验证内容 回收率 范围不同于含量测定法 高 中 低常设为50 限度浓度 100 43 6 方法学验证内容 专属性 胶囊壳干扰UV法 如空胶囊干扰大于标示量的25 实验无效 如干扰不大于标示量的2 可忽略不计 取6粒空白胶囊壳进行试验 工作量大 且由于干扰不一 会给测定结果带来误差 故空胶囊干扰较大时 采用HPLC法测定 44 7 溶出曲线的绘制 均一性试验 考察同一批样品的溶出曲线 重现性试验 考察至少3批样品的溶出曲线 可间隔15分钟取样 或间隔5或10分钟取样 以产生足够的样本量 直至药物溶出85 以上或达到溶出平台 得到完整的溶出曲线 45 46 47 7 溶出曲线的绘制 对于溶出度检查10min或更靠前的时间点的各溶出数据的RSD大于20 以及在其后的时间点的溶出数据RSD大于10 溶出结果就可以被认为具有高度变异性 48 溶出结果的高度变异性使得处方 工艺等变化对制剂质量的影响无法进行测定和评估 产生这种变异的原因可能有两种 一是制剂处方自身的原因 二是与溶出度检查方法有关的原因 如直接崩解后形成堆积物或片剂黏附于容器壁上等 49 释放度 缓释制剂 控释制剂 第一法3个取样点取样后补充相同体积液体 50 释放度 因为人体整个胃肠道系统pH值的复杂多变性 故对一种缓释产品或两种缓释产品进行体外释放行为的评价时 需采用三种以上不同pH值介质 常选用的pH介质为pH1 0 pH5 4 pH6 0和pH7 4 51 硝酸异山梨酯缓释胶囊的限度本品每粒在0 5小时 2小时和8小时时的释放量应分别为标示量的30 以下 30 65 和70 以上 53 释放度 肠溶制剂 第二法酸中释放量缓冲液中释放量有些需测耐酸力 54 概念和适用范围溶出度方法的建立影响溶出度的因素溶出度的比较问题 55 影响溶出度测定的因素 1 仪器因素1 1仪器的工作环境环境温度 气流 强光处理方法 置无强光照射 气流稳定的位置振动振动的能量使样品溶出速率增加振动频率50 100Hz时 影响较大当仪器振动位移为0 025毫米时 溶出增加5 10 处理方法 远离振动源 底脚加减振海绵或橡胶隔垫 56 影响溶出度测定的因素 1 仪器因素转轴的晃动篮法 晃动在2 0 5 0mm时 水杨酸和泼尼松校正片溶出比晃动在2 0mm时增加5 桨法 晃动在1 0 2 0mm时 水杨酸和泼尼松校正片溶出比晃动在0 5mm时增加8 和5 处理方法 检测转轴杆的准直度转轴杆实行双点固定转轴杆应垂直挂放 不得横放 防止变形 57 影响溶出度测定的因素 1 仪器因素仪器的水平度 转杆的垂直度杯边高1mm 溶出量增加约3 转杆倾斜2 5 溶出量增大2 25 处理方法 用水平尺调正杯板水平 用直角尺验证转杆与杯板垂直度转杆与溶出杯中心度中心偏离1mm 溶出量约增加3 偏离2mm 约增加8 处理方法 用中心盘调正转杆与溶出杯的中心 58 影响溶出度测定的因素 1 仪器因素搅拌速度速度快 溶出快允差 4 转杆 桨叶 网篮的溶出干扰桨杆 叶 篮在介质中溶出 带来低波长 200 230nm 处的吸收干扰处理方法 镀钛 316L不锈钢 涂膜 59 影响溶出度测定的因素 1 仪器因素篮轴盘排气孔无法排气 使溶出量大幅下降处理方法 确保篮轴盘小孔通畅 转篮旋转着进入溶出介质 清洗篮轴盘 用 10 稀硝酸煮沸或超声10分钟左右 再改用水或乙醇煮沸 应在水浴中 10 15分钟左右转篮干湿的影响湿的篮体会使供试品提前接触到溶出介质 可能使溶出增加处理方法 2005年版药典专门增加规定 用干燥的转篮 这在连续测定多批样品时应引起注意 60 影响溶出度测定的因素 2 介质的影响介质的pH值影响药物的溶出度影响药物的吸收系数影响药物的稳定性水的pH值不确定性泼尼松校正片 FDA10mg片 以pH为6 0 6 6和7 4的水作介质 溶出结果有2 10 的变化介质的温度影响药物的溶出度 温度高 溶出快一般温度变化1 溶出速率变化约5 规定 0 5 61 影响溶出度测定的因素 2 介质的影响介质的体积规定介质体积应准确至1 量筒应标定 倒入杯时应控15秒多次取样介质体积变化的影响多次取样 累计取样量超过介质体积1 时 会引起结果的系统性偏差处理方法补液 取样前介质体积不变 修正取样体积中的药物量不补液 取样前介质体积递减 修正介质体积 取样体积中的药物量介质蒸发的影响缓释 控释制剂试验时间长 介质蒸发引起系统性偏差32 37 的环境中 不加杯盖3小时 900ml介质蒸发达10 25ml 造成溶出度1 3 的误差处理方法 溶出试验一定要加杯盖 62 影响溶出度测定的因素 2 介质的影响脱气程度气泡对药物溶出的影响复杂 因药物品种而异 使结果重现性不好气泡的影响影响流体力学效应影响制剂与介质的接触面积影响筛网的通透性聚集崩解的颗粒吸附在杯壁的气泡提供了崩解颗粒的聚集场所泼尼松校正片在脱气的水中 溶出比未脱气的高约30 63 影响溶出度测定的因素 3 流体力学的影响溶出杯一致性不同溶出杯 因内径偏差 半球底深度不一 内柱面不圆 内壁不光滑等因素造成流体力学效应不同 结果RSD偏大处理方法 更换不良的溶出杯 使用成套溶出杯取样探头 温度探头 光纤探头探头直径超过7mm 溶出速率显著改变探头直径小于1 5mm 溶出速率变化很小不检测 不取样时探头取出 64 影响溶出度测定的因素 4 取样与过滤的影响取样点高度不同高度取样有明显差异处理方法 使用取样针管定位装置滤膜吸附滤膜选择不当 会引起高达50 的吸附偏差处理方法 进行验证 确定所用滤膜对样品是否有吸附 更换过滤材料 将滤膜在水中煮沸1小时以上 加大取样量 取续滤液过滤效果超细颗粒 用0 8 m滤膜过滤 可能过滤不净处理方法 选用0 45 m 0 2 m的滤膜或其他滤材 65 影响溶出度测定的因素 5 样品的影响胶囊壳胶囊壳质量差 会引起5 30 的结果偏差处理方法 进行干扰试验 确定空胶囊引起的吸光值作为校正值 如该值不大于标示量的25 试验有效 如该值不大于标示量的2 可忽略不计用胶囊壳作空白校正囊壳交联处理方法 囊壳交联加1 胃蛋白酶 66 影响溶出度测定的因素 6 其他因素自身对照法取样量少 代表性差 溶解不完全建议取样量 至少1个制剂重量未排除胶囊壳与辅料的干扰空胶囊校正用专属更好的测定方法取样至过滤时间超过30秒钟使溶出结果偏高 颗粒中药物取样后继续溶出含量测定方法含量测定方法的准确性 重复性等 67 定义溶出度方法的建立影响溶出度的因素溶出度的比较问题 68 溶出度的比较 选择一定的溶出介质 进行溶出曲线的比较 审评的重点 69 70 f2因子比较 样品量每批样品至少采用12个剂量单位 如片剂为12片 胶囊为12粒 进行测定 71 f2因子比较 取样点除0时外 一般至少选择3个时间点进行测定 如5 15 30 45min 或采用其他适宜的时间间隔取样 直到药物溶出90 以上或达到溶出平台 计算各时间点药物溶出百分比 绘制每批样品药物溶出曲线 72 f2因子比较 数据要求除0时外 第1个时间点的变异系数不得过20 从第2个时间点至最后1个时间点的溶出结果的变异系数应小于10 73 f2因子比较 当f2数值在50 100范围认为两条溶出曲线是相似的 74 f2因子比较 取样时间点除0时外 至少有3个 每个处方样品至少采用12个剂量单位 计算时药物溶出达到85 以上的时间点只能选取一个 从第2个时间点至最后1个时间点溶出结果的变异系数应小于10 保证药物溶出90 80 以上或达到溶出平台 75 概念和适用范围溶出度方法的建立溶出度的比较问题 76 阿德福韦酯软胶囊 本品仅在质量研究中考察了样品的溶出行为 采用桨法 100rpm 选择含0 05 的十二烷基硫酸钠水溶液为介质 但是 已上市原剂型一般采用桨法 50rpm 0 01N盐酸溶液为介质 现溶出度检查条件不合理 可能无法分辨不同质量制剂的溶出行为的差异 也无法对本品与已上市原剂型的溶出行为进行比较 77 法莫替丁口腔崩解片 本品是采用冻干技术制备的口腔崩解片 溶出行为应较普通片明显改善 而溶出曲线显示口崩片与普通片溶出行为无显著差异 溶出行为较普通片并未改善 现研究结果与本品的特性不符 建议不予批准 78 注意问题 滤膜吸附取样过滤时 应注意可能存在的损失 因滤膜与药物间有一个吸附饱和过程 即滤膜只有吸附到一定量之后 方能达到饱和 不再吸附 79 注意问题 滤膜吸附 如何验证 1 取溶出液过滤 舍去不同体积的初滤液后测定 观察响应值的变化 了解被测药物与滤膜的吸附情况 80 注意问题 滤膜吸附 如何验证 2 取样后 一部分不过滤 直接采用高速离心 取上清液测定 另一部分采用过滤法 取所得的续滤液测定 考察两者间测定数据的差异 81 注意问题 滤膜吸附 如何验证 3 取对照品溶液 经滤膜过滤后 与原溶液进行比较 观察测定前后数据的变化 82 注意问题 滤膜吸附 解决方案如滤膜对药物有吸附 可将滤膜在沸水中煮沸1h 或加大初滤液体积等 建议采用样品直接高速离心的方法 83 他克莫司 难溶于水 制成制剂时一般需进行微粉化等处理 使原料药粒径变小 比表面能变大 静电吸附能力增强 故与滤膜的吸附作用明显 84 一些小规格制剂 如非那雄胺片 溶出液中主药浓度低 达到饱和所需的初滤液体积大大增加 干扰也较大 对滤膜进行预处理 85 注意问题 设备清洁应用转篮法试验时 应注意转篮的洁净程度 一般在阳光下观察转篮的空隙是否有堵塞 如有 可采用超声或在稀硝酸中煮沸 再在水中煮沸的办法进行清理 否则将影响溶出度数据的准确性 低转速时 影响更为明显 86 注意问题 介质脱气溶出度试验规定溶出介质试验前应进行脱气处理 因为介质中的气泡会影响样品的崩解 扩散和溶出 脱气与否对转篮法的影响较明显 因为溶液中的气泡会堵塞转篮空隙 影响样品溶出 对桨板法影响不大 87 脱气方法煮沸法 脱气效果好 但费时耗能减压脱气 先加热至约41 再减压抽滤 脱气效果中 速度快超声脱气 脱气效果差氦气脱气 脱气效果好 速度最快 但成本高 88 生物等效性的豁免 生物等效性BE Bioequivalence 定义生物等效性是指两种制剂在相同试验条件下 服用相同剂量 其活性成分在吸收程度和速度上无显著性差异 豁免意味着用体外的试验结果证明体内是否生物等效 89 对象 固体制剂FDA对于等效性豁免的基本要求 药物溶解度好 膜通透性高 治疗剂量范围宽 药物可从固体中迅速溶出 药物在胃肠道中稳定 制剂使用的赋形剂种类和用量应符合FDA规定 90 生物学分类系统 Biopharmaceuticalsclassificationsystem BCS ClassI高溶解性 高渗透性 ClassII低溶解性 高渗透性 ClassIII高溶解性 低渗透性 ClassIV低溶解性 第渗透性 91 高溶解性