分子生物学复习提纲PPT课件.ppt

复习 2 复制与修复 半保留复制实验系统选材标记培养 CsCl密度梯度离心 半保留复制的不同类型 滚筒式 D型 半不连续复制T4感染的E colimutantT4 ligase突变 1 复制单位 原核一个 真核多个 复制的酶和蛋白系统 复制起始原点和识别序列Origin真核原点的研究 复制终止序列 真核端粒结构及复制 DNA损伤修复 2 3 DNA重组 同源重组 位点专一重组 转座重组 以上三种重组的特点 转座效应 3 4 RNA合成 一个基因的有意义链和反意义链 启动子 RNA合成的起始 RNA合成的终止终止子和弱终止子 RNA的后加工原核tRNA rRNA有剪切mRNA无加工真核tRNA rRNA有剪切mRNA5 帽子3 加尾内含子剪切可变剪切Ribozime 4 5 蛋白质合成 遗传密码 遗传密码的破译体外翻译系统网织红细胞裂解系统动物肝无细胞系统E coli无细胞系统麦胚系统 5 遗传密码性质每个code数量不等6 4 3 2 1 met Trp 简并性 偏爱性 起始和终止密码子 相近相邻通用和例外变偶 6 遗传密码的突变无义突变终止 有义有义 终止错义突变温敏突变冷敏突变抑制基因突变 回复或校正突变 基因内和基因间 7 蛋白质合成氨酰 tRNA合成酶 8 蛋白质合成后的成熟和易位折叠 分子伴侣的作用 修饰易位和分泌易位共翻译易位信号肽SRP 信号肽识别蛋白DP 停泊蛋白 SRP受体 信号肽酶形成膜整合蛋白滞留内质网腔 溶酶体 分泌蛋白翻译后易位进入线粒体各部位进入细胞核叶绿体定位 9 6 基因组织 原核基因组特点 操纵子重叠基因重叠操纵子转座子 10 真核基因特点大若干染色体与蛋白结合重复序列多不编码序列无操纵子断裂基因看家基因和奢侈基因基因家族细胞器基因 11 7 原核基因表达调控 乳糖操纵子色氨酸操纵子 衰减调控gal操纵子 双启动子适应营养环境调控 阿拉伯糖操纵子 双功能调控蛋白 12 真核基因表达调控小结 基因水平 1 染色体结构组蛋白束缚染色体松弛 与DNA结合蛋白的修饰和去修饰 组蛋白的修饰 修饰包括 乙酰基化 甲基化 磷酸化和泛素化 转录因子的结合2 基因扩增 基因削减 转录水平 1 RNA聚合酶单独不能启动转录 需辅助因子2 启动子特征 由许多短序列的保守元件组成基础元件 上游元件增强子绝缘子沉默子3 启动子研究方法 13 3 转录因子特点和功能部位部位对DNA的识别部位 结合部位 氨基酸与碱基锌指HTH 螺旋转角螺旋 活性部位 HLH亮氨酸拉链两部位相互独立转录因子活性调节激活修饰合成多聚体的聚合 解离 切离配体的性质配体的改变4 三种RNA聚合酶RNA聚合酶 转录rDNA 上游 RNA聚合酶 转录mRNA 上游 内部 RNA聚合酶 转录5srRNA tRNA 内部 启动子特征 14 转录后水平 剪切和可变剪切剪切因子与剪切位点RNA编辑mRNA稳定性 翻译水平调控翻译蛋白因子的合成和修饰翻译后调控蛋白质剪切蛋白质修饰 磷酸化 去磷酸化糖基化 15 8 真核基因表达调控 小结 8 1真核生物基因表达调控的不同层次 8 2DNA水平调控 基因封闭 基因丢失 基因扩增 基因重排 基因修饰 8 3转录水平调控 1 顺式元件和反式作用因子 2 调控蛋白的结合方式 蛋白的DNA识别锌指螺旋 转角 螺旋 同源异型盒 调控蛋白和蛋白的识别方式螺旋 环 螺旋leu拉链 3 真核的三种RNApol 4 三种RNApol的转录起始RNApol RNApol RNApol 5 增强子绝缘子 6 应答元件 7 多种蛋白因子对基因特异性表达的意义 16 8 转录因子的结构特点 2个活性区 9 一个转录因子可作用于多个基因 多个转录因子作何启动不同基因 10 启动子由多个元件组成 元件的保守性 不同元件组合形成不同的启动子调控不同基因表达 11 真核启动子的研究方法 8 5 转录后的调控剪切和可变剪切 果蝇