土壤中氨氮、硝氮、速磷测定.docx

硝态氮提取：称取土样10.0g,用100ml的2MKCl震荡提取土样30分钟后，提取液中硝氮测定同水中硝氮测定。水中硝态氮的测定（紫外分光光度法） 主要试剂：(1)0.100mg/ml硝酸盐氮标准储备液(购置或自配)：称取07218g硝酸钾(经105110烘4小时)溶于水中，移至1000毫升容量瓶中用水稀释至标线。(2)盐酸溶液：C (HCl) =lmolL(盐酸系优级纯) 标准曲线的绘制向6支100ml容量瓶中依次加0100mgml硝酸钾标准溶液0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，用新鲜去离子水稀释到100ml(其相应浓度为0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mgL)。按水样测定相同步骤测量吸光度。根据220nm与二倍275nm波长吸光度值之差对浓度作图，绘制标准曲线。 水样的测定（水样取5ml提取液上清液） 在盛有水样的比色管中加1ml1.0mol/L的盐酸溶液，用1cm石英比色皿在紫外分光光度计上，用新鲜去离子水50ml加l.0molL盐酸溶液作参比，测定水样在220nm及275nm波长处的吸光度。 结果计算校正吸光度计算：Ar=A220nm-2A275nm式中：Ar校正吸光度；A220nm220nm波长处测得的吸光度；A275nm275nm波长处测得的吸光度由标准曲线算出相应水样硝态氮含量。氨态氮2 molL-1KCl浸提蒸馏法方法原理 用2molL-1KCl浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。取一份浸出液在半微量定氮蒸馏器中加MgO（MgO是弱碱，有防止浸出液中酰铵有机氮水解的可能）蒸馏。蒸出的氨以H3BO3吸收，用标准酸溶液滴定，计算土壤中的NH4+N含量。主要仪器 振荡器、半微量定氮蒸馏器、半微量滴定管（5mL）。试剂（1）20gL -1硼酸指示剂。20gH3BO3（化学纯）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红溴甲酚绿混合指示剂5mL并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，此时该溶液的pH为4.8。指示剂用前与硼酸混合，此试剂宜现配，不宜久放。（2）0.005 molL-11/2H2SO4标准液。量取H2SO4（化学纯）2.83mL，加蒸馏水稀释至5000mL，然后用标准碱或硼酸标定之，此为0.0200 molL-1 (1/2H2SO4)标准溶液，再将此标准液准确地稀释4倍，即得0.005molL-11/2H2SO4标准液（注1）。（3）2 molL-1KCl溶液 称KCl（化学纯）149.01g溶解于1L水中。（4）120gL1MgO悬浊液 MgO12g经500600灼烧2h，冷却，放入100mL水中摇匀。操作步骤取土样10.0g，放入三角瓶中，加入2molL-1KCl 溶液100mL。用橡皮塞塞紧，振荡30min，立即过滤于50mL三角瓶中（如果土壤NH4+N含量低，可将液土比改为2.5:1）。吸取提取液25.0mL（含NH4+N25g以上）放入半微量定氮蒸馏器中，用少量水冲洗，先把盛有20gL 1硼酸溶液5mL的三角瓶放在冷凝管下，然后再加120gL 1 MgO悬浊液10mL于蒸馏室蒸馏，待蒸出液达3040mL时（约10min）停止蒸馏，用少量水冲洗冷凝管，取下三角瓶，用0.005molL-11/2H2SO4标准液滴至紫红色为终点，同时做空白试验。结果计算土壤中铵态氮NH4+（N）含量（mgkg-1）= 式中：c0.005molL-11/2H2SO4标准溶液浓度； V样品滴定硫酸标准溶液体积(mL)； V0空白滴定硫酸标准溶液体积(mL)； 14.0氮的原子摩尔质量（gmol-1）； ts分取倍数； 103“换算系数”（包括mL换算为L，10-3；g换算为mg，103；换算为kg，103）； m烘干样品质量（g）。速效磷的测定5.3.3.2主要仪器 往复振荡机、分光光度计或比色计。5.3.3.3试剂（1）0.05 molL-1NaHCO3浸提液 溶解NaHCO342.0g于800mL水中，以0.5 molL-1NaOH溶液调节浸提液的pH至8.5。此溶液曝于空气中可因失去CO2而使pH增高，可于液面加一层矿物油保存之。此溶液贮存于塑料瓶中比在玻璃中容易保存，若贮存超过1个月，应检查pH是否改变。（2）无磷活性炭。活性炭常含有磷，应做空白试验，检验有无磷存在。如含磷较多，须先用2molL-1HCl浸泡过夜，用蒸馏水冲冼多次后，再用0.05 molL-1NaHCO3浸泡过夜，在平瓷漏斗上抽气过滤，每次用少量蒸馏水淋洗多次，并检查到无磷为止。如含磷较少，则直接用NaHCO3处理即可。（3）其他钼锑抗试剂、磷标准溶液。钼锑抗试剂。A.5 gL-1酒石酸氧锑钾溶液：取酒石酸氧锑钾K(SbO)C4H4O60.5g，溶解于100mL水中。B.钼酸铵硫酸溶液：称取钼酸铵(NH4)6Mo7O244H2O10g，溶于450mL水中，缓慢地加入153mL浓H2SO4，边加边搅。再将上述A溶液加入到B溶液中，最后加水至1L。充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。临用前（当天），称取左旋抗坏血酸（C6H8O5，化学纯）1.5g，溶于100mL钼锑混合液中，混匀，此即钼锑抗试剂。有效期24小时，如藏冰箱中则有效期较长。此试剂中H2SO4为5.5molL-1（H+），钼酸铵为10 gL-1，酒石酸氧锑钾为0.5 gL-1，抗坏血酸为1.5 gL-1。（7）磷标准溶液。准确称取在105烘箱中烘干的KH2PO4（分析纯）0.2195g，溶解在400mL水中，加浓H2SO45mL（加H2SO4防长霉菌，可使溶液长期保存），转入1L容量瓶中，加水至刻度。此溶液为50gm L-1P标准溶液。 吸取上述磷标准溶液25mL，即为5 gm L-1P标准溶液（此溶液不宜久存）。5.3.3.4操作步骤 称取通过20目筛子的风干土样2.5g（精确到0.001g）于150mL三角瓶（或大试管）中，加入0.05 molL-1NaHCO3溶液50mL，再加一勺无磷活性炭，塞紧瓶塞，在振荡机上振荡30min，立即用无磷滤纸过滤，滤液承接于100mL三角瓶中，吸取滤液10mL（含磷量高时吸取2.55.0mL，同时应补加0.05 molL-1NaHCO3溶液至10mL）于150mL三角瓶中，再用滴定管准确加入蒸馏水35mL，然后移液管加入钼锑抗试剂5mL，摇匀，放置30min后，用880nm或700nm波长进行比色。以空白液的吸收值为0，读出待测液的吸收值（A）。标准曲线绘制：分别准确吸取5gmL-1磷标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于150mL三角瓶中，再加入0.05 molL-1NaHCO310mL，准确加水使各瓶的总体积达到45mL，摇匀；最后加入钼锑抗试剂2mL，混匀显色。同待测液一样进行比色，绘制标准曲线。最后溶液中磷的浓度分别为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5gmL-1P。5.3.3.5结果计算土壤中有效磷（P）含量（mgkg-1）=式中：从工作曲线