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文档简介

实验中所用的玻璃仪器等清洁与否直接影响实验的结果,往往由于仪器的不清洁或被污染而造成较大的实验误差,有时甚至会导致实验的失败。 做生物化学实验对玻璃仪器清洁程度的要求,比一般化学实验的要求更高,这是因为:生物化学实验中蛋白质、酶、核酸等往往都是以“毫克”和“微克”计的,稍有杂质,影响就很大;生物化学实验对许多常见的污染杂质十分敏感,如金属离子(钙、镁离子等)、去污剂和有机物残基等,因此玻璃仪器(包括离心管等塑料器皿)是否彻底清洗净是非常重要的。1. 初用玻璃仪器的清洗新购买的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质,可先用0.5的去污剂洗刷,再用自来水洗净,然后浸泡在12 盐酸溶液中过夜( 不可少于4小时),再用自来水冲洗,最后用无离子水冲洗两次,在100120烘箱内烘干备用。2.使用过的玻璃仪器的清洗做完实验,应立即把用过的玻璃仪器洗刷干净。这是由于那时污物比较容易清洗,同时由于了解污物的性质,有利于选用适当的洗涤方法。使用过的玻璃仪器的清洗,可先用自来水洗刷至无污物,再用合适的毛刷沾去污剂(粉) 洗刷,或浸泡在 0.5的清洗剂中超声清洗(比色皿决不可超声),然后用自来水彻底洗净去污剂,再用无离子水洗两次。玻璃仪器洗净的标志是水倾出后,器壁上没有水滴,否则重洗。若重洗后仍挂有水珠,则需用洗液浸泡数小时后(或用去污粉擦洗 ),重新清洗。3.石英和玻璃比色皿的清洗绝不可用强碱清洗,因为强碱会侵蚀抛光的比色皿。只能用洗液或12的去污剂浸泡,然后用自来水冲洗,这时使用一支绸布包裹的小棒或棉花球棒刷洗,效果会更好,清洗干净的比色皿内外壁不挂水珠。4. 塑料器皿的清洗聚乙烯、聚丙烯等制成的塑料器皿,在生物化学实验中已用的越来越多。第一次使用塑料器皿时,可先用8mol/L 尿素(用浓盐酸调 pH = 1)清洗,接着依次用无离子水、1mol/LKOH 和无离子水清洗,然后用13 mol/LEDTA 除去金属离子的污染,最后用无离子水彻底清洗,以后每次使用时,可只用0.5的去污剂清洗,然后用自来水和无离子水洗净即可。5.玻璃和塑料器皿的干燥生化实验中用到的玻璃和塑料器皿经常需要干燥,通常都是用烘箱或烘干机在110120 进行干燥,而不要用丙酮荡洗后再吹干的方法来干燥,因为那样会有残留的有机物覆盖在器皿的内表面,从而干扰生物化学反应。定量的玻璃仪器不能加热,一般采取控干或依次用少量酒精、乙醚刷洗后用温热的气流吹干。硝酸纤维素的塑料离心管加热时会发生爆炸,所以决不能放在烘箱中干燥,只能用冷风吹干。烧接的比色皿可以用超声波清洗,但功率不要太大,时间也不要太长。粘接的比色皿不能用超声波清洗,否则会洗坏。一、市场面上一般使用的石英比色皿均为石英粉烧接的,专用超声波清洗, 洗比色皿清洗时毛面朝下。 二、 石英比色皿清洁方法: 1用乙醚和无水乙醇的混合液(各50%)清洗。 2. 若太脏可用专用洗液清洗。但时间要短(10分钟),再用清水清洗干净。 三、 不要用洗洁精之类的清洁剂。以免影响测量。 注: 高级分光光度计都采用专利技术加工的石英比色皿,采用石英本体材料经过高温熔融胶合,减少污染,使用寿命更长.(价格是普通石英比色皿二倍) 一、比色皿注意事项 比色皿一般为长方体,其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。所以使用时应注意以下几点:: 1、拿取比色皿时, 只能用手指接触两侧的毛玻璃, 避免接触光学面。同时注意轻拿轻放,防止外力对比色皿的影响,产生应力后破损。 2、凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液,不得长期盛放在比色皿中。 3、不能将比色皿放在火焰或电炉上进行加热或干燥箱内烘烤;。 4、当发现比色皿里面被污染后,应用无水乙醇清洗,及时擦拭干净。 5、不得将比色皿的透光面与硬物或脏物接触。盛装溶液时,高度为比色皿的2/3处即可,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附,然后再用镜头纸或丝绸擦拭。 二、比色皿成组性测试 在测量时如对比色皿有怀疑,可自行检测,方法如下: 1、用户可将波长选择置实际使用的波长上,将一套比色皿都注入蒸馏水 ,将其中一只的透射比调至100%处 ,测量其他各只的透射比, 凡透射比之差不大于0.5%,即可配套使用。 2、比色前将各个比色皿中装入蒸馏水,在比色波长下进行比较,误差在0.001吸光度以内的比色皿选出4-8个进行比色测定,可避免因比色皿差异造成测量误差。 3、我公司的比色皿,在出厂前检测,原则上是0% 误差。 三、比色皿的洗涤方法 随着光谱分析仪器的迅速发展,微量、半微量、荧光等一些比色皿不断出现,对使用维护、清洗比色皿有更高的要求。一般在国外都是一次性使用,在国内为了节约成本,开源节流而重复使用。如何对比色皿进行清洗,只能按照各种试剂,采用能溶解中和的方法来进行清洗,原则上一是不能损坏比色皿的结构和透光性能;二是能够采用中和溶解的方法来达到比色皿干净如初的效果。而分光光度计中比色皿洁净与否是影响测定准确度的因素之一。因此,必须重视选择正确的洗净方法。下面介绍几种清洗方式: 1、比如测定溶液是酸,如果不干净,就用弱碱溶液洗,要是测定溶液是碱,如果不干净,就用弱酸溶液洗,要是测定溶液是有机物质,如果不干净,就用有机溶剂,比如酒精等溶液洗。 2、选择比色皿洗涤液的原则是去污效果好,不损坏比色皿,同时又不影响测定。 3、分析常用的铬酸洗液不宜用于洗涤比色皿,这是因为带水的比色皿在该洗液中有时会局部发热,致使比色皿胶接面裂开而损坏。同时经洗液洗涤后的比色皿还很可能残存微量铬,其在紫外区有吸收,因此会影响铬及其他有关元素的测定。一般主张使用硝酸和过氧化氢(5:1)的混合溶液泡洗,然后用水冲洗干净。 4、对一般方法难以洗净的比色皿,还可以采取以下两种方法。 A、先将比色皿侵入含有少量阴离子表面活性剂的碳酸钠(20 克/升)溶液泡洗,经水冲洗后,再于过氧化氢和硝酸(5:1)混合溶液中侵泡半小时。 B、在通风橱中用盐酸、水和甲醇(1:3:4)混合溶液泡洗,一般不超过10分钟。

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