滤纸法酶活测定过程及数据.doc

滤纸法酶活测定1 接种，根据不同的菌种配所需的培养基，本实验中C24,M1,MM01,BJJ,MQM为PDA培养基，F8,FN6,FN7.FN10,FN11,FN12,FN*,C10为LB培养基。在无菌条件下将其接种于以灭菌的液体培养基里，每个菌种做三个重复。2 培养，将其放置于相同环境摇菌培养，适宜温度为28左右，边培养边观察生长情况。3 离心，取对数期的培养液，培养液经3500r/min离心10min，分别取上清液0.5ml加入两组试管，一组为实验组，一组为对照组，并分别加0.5ml缓冲液，将实验组预热到50，将对照组沸水浴灭活5min,用水冷却，再将其放入50水浴锅。再向实验组和对照组分别加入16cm新华滤纸一条50水浴保温1h取出，水浴灭活5min，用3mlDNS显色后稀释3倍。4 测OD值，首先以水为空白对照，分别测上述实验组和对照组的OD值，再以上述灭活酶液（即对照组）为对照测其对应的实验组的OD值，记录数据，求三个重复测得的平均值，即为最终所需OD值，数据记录如下：菌种重复以水为对照以灭活酶液为对照平均值FN7细菌实验10.0740.0210.015对照10.063实验20.0540.010对照20.050实验30.0670.015对照30.059FN*细菌实验10.0630.0020.003对照10.060实验20.0500.012对照20.036实验30.0560.003对照30.052FN12酵母菌实验10.0690.0020.010对照10.052实验20.0780.010对照20.066实验30.0720.011对照30.060F8细菌实验10.1370.0400.038对照10.133实验20.1780.031对照20.152实验30.1520.043对照30.147FN11细菌实验10.1830.0020.043对照10.143实验20.1280.051对照20.102实验30.1800.034对照30.162FN6酵母菌实验10.2410.0180.044对照10.147实验20.4410.036对照20.276实验30.3400.052对照30.198FN10细菌实验10.4210.2210.013对照10.143实验20.1770.008对照20.130实验30.1980.017对照30.121C24放线菌实验10.4470.2030.169对照10.220实验20.3680.162对照20.271实验30.3720.143对照30.253C10细菌实验10.1790.0180.063对照10.120实验20.2220.071对照20.116实验30.2210.054对照30.131BJJ霉菌实验10.8130.1760.164对照10.630实验20.5410.105对照20.455实验30.7540.211对照30.512M1霉菌实验12.8660.5540533对照12.404实验22.9130.774对照22.505实验32.8510.511对照32.501MQM霉菌实验12.7230.5010.491对照12.351实验22.6930.482对照22.242实验32.8030.489对照32.435MM01霉菌实验12.4060.3080.431对照12.