CellSearch Introduction-2014

CELLSEARCHCirculating Tumor Cell Test,循环肿瘤细胞检测技术及临床应用,PM code:0513OCD3119,主要内容,2,循环肿瘤细胞 Circulating Tumor Cell（CTC）,CTC 是指进入外周血循环的肿瘤细胞。只有极少数具有高度活力、高度转移潜能的肿瘤细胞在循环系统中存活下来，相互聚集形成微小癌栓，并在一定条件下发展为转移灶。,“A Case of Cancer in which Cells Similar to those in the Tumors were seen in Blood after Death” TR Ashworth Australian Medical Journal, 14:146. 1869,3,4,CellSearch CTC 检测技术发展历程,CellSearch 循环肿瘤细胞检测技术,全球领先的自动化捕获计数循环肿瘤细胞的检测技术150 + 专利全球唯一一个获批的循环肿瘤细胞检测产品2004年获得 FDA 批准，2012年获得 CFDA 批准检测循环肿瘤细胞的行业标准100多个临床研用究应用了 CellSearch 检测技术全美Top25的国家癌症中心使用 CellSearch 产品中国已有25家以上的肿瘤医院及综合医院使用 CellSearch 产品,5,Prix Galien 2009,CellSearch 相关奖项及文献发表,6,Cleveland Clinic Top10 Medical Innovations for 2009,CELLSEARCH 技术原理,CellSearch 检测技术的基本原理,检测外周血循环中的上皮源性的循环肿瘤细胞,8,循环肿瘤细胞表型CD45-, EpCAM+ and Cytokeratins 8, 18+, and/or 19+ 4 微米完整的细胞上皮源性细胞碎片也会被捕获到，但并不会被计数,使用纳米磁流体及免疫荧光技术进行捕获和鉴定,9,EpCAM 上皮细胞粘附分子 APC 异藻蓝蛋白荧光染料 CK 细胞角蛋白 PE 藻红蛋白荧光染料 DAPI 4,6-二脒基-2-苯基吲哚（DNA荧光染料）,CellSearch 自动样本处理过程,10,自动化结果分析,系统自动将被捕获的、经过染色的细胞置入MagNest 装置的样本盒中由于 MagNest 的磁场作用，捕获的靶细胞将移动至样本盒的分析表面，形成单细胞层系统自动分析后得到结果并由操作人员进行最终判读,11,循环肿瘤细胞检测结果,12,CTCsCK- PE+DAPI + CD45- APC-,LeukocyteCK- PE-DAPI + CD45- APC+,CELLSEARCH 系统,CellSearch 系统,第一个标准化，自动化的循环肿瘤细胞捕获计数平台,14,/about-cellsearch/what-is-cellsearch-ctc-system,CellSave 储存管,10ml 真空采血管，含有 EDTA 和专利的细胞防腐剂保护循环肿瘤细胞（CTC）的形态和抗原表达样本在室温（1530）条件下储存的稳定时间可达96小时，便于样本的保存和运输,15,CellTracks AutoPrep 自动样本处理系统,完全自动化的样本制备装置，用于对循环肿瘤细胞进行捕获和染色可对8个样本进行批处理，允许完全无人值守运行，每批处理时间为4h，单个样本处理时间为2.5h通过完整的过程控制，可对循环肿瘤细胞样本进行标准化的分析前制备,16,CellTracks Analyzer II 结果分析系统,对经过免疫磁颗粒捕获、荧光染料标记的循环肿瘤细胞进行计数，每个样本分析时间为15分钟使用4个滤光片对样本盒的整个表面进行扫描，并对4个滤光片的图像进行整理当形态特点和染色类型与上皮细胞相符时，用户即可将相关细胞归类为循环肿瘤细胞。,17,CellSearch 循环上皮细胞检测试剂盒,CellSearch 循环肿瘤细胞试剂盒包含循环肿瘤细胞的捕获试剂和免疫荧光染色剂试剂盒还包含 CellTracks 样本盒，用于在 CellTracks II 分析仪上进行循环肿瘤细胞分析及用于样本制备的锥形管试剂盒可进行16次检测,18,试剂盒,（商品名：CellSearch 循环肿瘤细胞检测试剂盒）,CELLSEARCH 临床应用,CellSearch 预期用途,用于体外诊断 IVDCellSearch 循环上皮细胞检测试剂盒（免疫磁颗粒细胞捕获+荧光染色法）（商品名称：CellSearch 循环肿瘤细胞检测试剂盒）用于全血中上皮源性（CD45-，EpCAM+，以及细胞角蛋白8,18+及/或19+）的循环肿瘤细胞（CTC）的计数检测。由 CellSearch 循环肿瘤细胞检测试剂盒检测到外周血液中的 CTC 与接受治疗的转移性乳腺癌患者的无进展生存期及总生存期降低相关，本检测是对转移性乳腺癌患者进行监测的一项工具，CTC 的系列检测应当与转移性乳腺癌的其它临床方法联合使用，在病程期间任何时间对 CTC 计数都可评价患者的预后，对已经其它检测方法（组织学或影像学等）确诊的转移性乳腺癌患者的无进展生存期与总生存期的预测,20,CellSearch CTC 检测结果 Cutoff 值,基线 CTC 检测结果大于等于5个细胞的转移性乳腺癌病人预后不好，总生存期和无进展生存期较短基线 CTC 检测结果小于5个细胞的转移性乳腺癌病人预后良好，总生存期和无进展生存期较长此 Cutoff 值基于临床研究实验得出，并已被 FDA 和 CFDA 批准用于临床实践,21, Cristofanilli M. et al N. Engl. J. Med 2004;35:781-91,CellSearch CTC 检测结果分布,数据来自 CellSearch 临床注册研究177例 MBC 患者检出大于等于5比例为49%345例良性乳腺疾病及正常对照组检出大于等于5比例为0, Cristofanilli M. et al N. Engl. J. Med 2004;35:781-91,22,CellSearch CTC 检测的临床价值,CellSearch CTC 检测作为一个先进的血液学检查，已经被证实具有重要的临床应用价值在乳腺癌患者患病期间任何时期，CTC 检测结果均为独立的预后因子，可以预测病人的总生存期和无进展生存期CTC 在治疗前后检测结果的变化预示病人预后的改变，为临床疗效监测提供信息。 CTC 结合传统治疗监测手段（例：影像学方法）可以提高疗效监测的准确性，或可能更早提示治疗效果。,23,治疗基线 CTC 检测结果的预后作用,24, Cristofanilli M. et al N. Engl. J. Med 2004;35:781-91,治疗前基线CTC检测结果对于OS，PFS均具有预后作用,治疗34周 CTC 检测结果的预后作用,25, Cristofanilli M. et al N. Engl. J. Med 2004;35:781-91,治疗34周CTC检测结果对于OS，PFS均具有预后作用,CTC 检测结果在新诊断病人中的预后作用,26,CTC在新诊断病人中治疗前后提供显著的预后信息,一线化疗前，即基线,一线化疗一个疗程后，即34周后,Circulating tumor cells: a novel prognostic factor for newly diagnosed metastatic breast cancer. J Clin Oncol. 2005 Mar 1;23(7):1420-30.,循环上皮细胞检测试剂盒产品说明书Hayes DF et al Clin Cancer Res. 2006;12(14 Pt 1):4218-24,不同随访时间 CTC 水平的预后作用,27,CTC 结果预后作用荟萃分析证据,28, Clinical validity of circulating tumor cells in patients with metastatic breast cancer: a pooled analysis of individual patient data Lancet Oncol 2014 Published Online March 11, 2014,荟萃分析可以作为最高等级循证医学证据，来源于将近2000例病人,CTC 检测结果预后作用总结,29,CTC 检测结果变化对于 PFS 改变的提示作用,30,治疗中 CTC 的变化提示疾病对于治疗的反应。在治疗中检测 CTC 可用作治疗评估手段。,数据来源：循环上皮细胞检测试剂盒产品说明书,CTC 检测结果变化对于 OS 改变的提示作用,31,循环上皮细胞检测试剂盒产品说明书Hayes DF et al Clin Cancer Res. 2006;12(14 Pt 1):4218-24,CTC 结果变化作用荟萃分析证据,32, Clinical validity of circulating tumor cells in patients with metastatic breast cancer: a pooled analysis of individual patient data Lancet Oncol 2014 Published Online March 11, 2014,CTC 检测结果变化的治疗监测作用总结,33,CTC 结果较影像学评价更好的反应治疗预后,34,CTC 检测早于影像学检查，可更早提示治疗应答相同影像评价下，同水平 CTC，OS 无显著差异，不同水平 CTC，OS 有差异,Budd GT. et al. Clin Cancer Res. 2006;12:6403-9,CTC 结果和 PET/CT 分别对 OS 的预测作用,35,De Giorgi U., et al J Clin Oncol.2009;27:3303-11,De Giorgi U., et al J Clin Oncol.2009;27:3303-11,CTC结果和PET/CT的对比分析,36,CTC 检测相对传统监测方法的临床价值总结,CTC 作为一种新的生物学标志物，能够更好的反映肿瘤的生物学特性CTC 相对于传统监测方法将会更早提示病人的预后变化CTC 可以在传统方法无法提供有价值信息时，为医生提供额外的病情信息,37,BUDD et al. (Clin Cancer Res 2006; 12:6403-9): “Assessment of CTCs is an earlier, more reproducible indication of disease status than current imaging methods. CTCs may be a superior surrogate end point, as they are highly reproducible and correlate better with overall survival than do changes determined by traditional radiology.”,CTC 检测临床使用建议,38,Alemar Journal of Oncology Volume 2013, Article ID 702732,CTC 检测临床使用建议,最好在病人开始治疗前建立基线 CTC 检测结果在一个或两个治疗周期开始和结束时进行 CTC 检测，获取 CTC 动态变化结果任何时点均可进行 CTC 检测，结果表明此时点预后信息,39,“The detection of CTCs in the peripheral blood of patients with MBC is associated with prognostic and predictive information allowing for baselin