冬虫夏草菌丝体安全性评价.doc

冬虫夏草菌丝体安全性评价姓名: 杨晓宇 班级: 12级中兽药1班 学号: 20120462摘要:在中医看来，冬虫夏草是一种十分名贵的中药材，在1757年所著的本草从新中，它就被与人参、鹿茸一起列为中国三大补药。号称是唯一一种能同时平衡、调节阴阳的中药。但现代科学证明，虫草不过就是一种普通的真菌，所含营养成分与一般的食用真菌相差无几，其本身所含的具有一定治疗效果的活性物质也早能够大规模生产，甚至连食用虫草本身的安全性都有待考量。关键词：冬虫夏草；真菌；考量正文：冬虫夏草(Coudyceps sinensis Berkely Sacc.)系传统的名贵中药材, 被列为我国中药三大宝之一, 具有强肾、润肺、益精气、理诸虚的功效, 广泛用于治疗高血脂、冠心病、心律失常、慢性及活动性肝炎、慢支及哮喘、慢性肾炎及轻度肾衰、中老年人性功能低下及体质虚弱和免疫功能低下等征;并常用于原发性血小板减少性紫癜和肿瘤患者放疗后的辅助治疗 1 。由于寄生条件和生长环境特殊而严格, 冬虫夏草的天然资源非常有限且价格昂贵2, 因此, 人们正在积极进行虫草菌的分离和人工培育的研究, 并已成功地培育出多种虫草菌丝体3。同时, 国内外对人工虫草菌丝体和天然冬虫夏草进行了广泛的药化、药理学研究, 结果表明人工虫草菌丝体和天然冬虫夏草药理作用相似, 均具有抗氧化、抗心律失常、抗肿瘤、降血脂、降血糖、保肝、防治哮喘和免疫调节等作用4 。以冬虫夏草菌丝体为原料开发的保健食品也纷纷面世, 但其毒性研究尚未见报道, 为此, 作者对其进行了两个阶段的毒性试验, 为其安全性评价提供依据, 从而为合理开发、利用人工虫草菌丝体提供科学依据。1冬虫夏草的作用1.1虫草用于尿毒症1.11补充必需氨基酸:含有十余种氨基酸，其中6种属EAA，冬虫夏草可能是通过补充CRF病人所缺乏的EAA，促使蛋白质的合成，减轻氮质潴留，从而达到治疗作用。1.12调节钙磷代谢:有效地控制高磷血症是延缓肾功能恶化的重要措施之一。冬虫夏草具有升高血钙、降低血磷的作用，使钙磷代谢恢复正常，且与临床症状改善相符合，但机理不明。1.13补充微量元素:CRF患者体内微量元素如锌、铬、锰等明显低于常人。人工虫草和野生虫草均含有15种微量元素，上述微量元素含量较高，特别是锌含量较高。锌是多种金属的活化剂，是RNA、DNA聚合酶的主要成分，参与肌体蛋白质的合成，在改善CRF临床症状中起重要作用。因此，冬虫夏草治疗CRF可能与其补充微量元素有关5。1.14影响蛋白代谢:虫草对尿毒症病人体蛋白有明显影响。现已证明，尿毒症毒素对蛋白质代谢有抑制作用，虫草能降低CRF患者血清中分子物质水平，且能使Scr、BUN水平明显下降，说明病人蛋白代谢的改善可能与尿毒症毒素的排泄有关。1.15调节免疫功能:虫草的免疫药理作用概括起来有以下几方面:对免疫器官的影响，主要表现为免疫器官(胸腺、脾脏)重量的增加;对单核-巨噬细胞系统功能的增强作用;对体液免疫功能的增强作用;对细胞免疫功能的调节作用;对自然杀伤细胞活性的增强作用6。1.2防癌抗癌功能自1975年以来，美国、德国以及日本研究人员已从虫草中分离出多种组蛋白、抗真菌抗生素及真菌多糖，这些物质对腹水瘤有较强的抑制作用，虫草素对免疫系统有广泛的影响，是其防癌作用的主要成份。近年来国内及国外的许多临床病例均表明冬虫夏草制剂对中晚期癌症患者有显著功效，其中包括肺癌、肝癌、前列腺癌、胃癌、鼻咽癌等。近年来研究进一步证明虫草素可代替腺苷参与肿瘤细胞的代谢过程，直接影响肿瘤细胞的生长发育。虫草菌素抑制癌细胞的核酸合成是虫草的抗癌机制7。同时虫草素可抑制细胞的分裂，促进细胞分化，促进T淋巴细胞转化，提高肌体单核巨噬细胞系统吞噬功能，激活巨噬细胞产生细胞毒素，直接杀伤癌细胞8。1.3对心脑、血管疾病的防治功能 哈尔滨医科大学通过定量地研究虫草水提液对豚鼠心室肌细胞的影响与作用，发现L型钙通道开放，引起外钙内流，使细胞外钙增加。说明虫草可在细胞兴奋状态下起作用，并且是激动了L型通道钙。L型通道钙主要分布于骨骼肌和心肌，其功能为调控兴奋收缩耦联。虫草水提液可促进心肌细胞钙内流，进而触发心肌兴奋和收缩，使窦房节和房室节细胞兴奋，从而发挥其正心肌力作用。这是该药治疗慢性心律失常的机制之一。动物试验表明，虫草具有明显的降血脂的作用，同时能增加试验动物心肌营养性血流量，具有减慢心律和短暂的降压效果9。他还是一种良好的MAOB抑制剂，可以减轻由于衰老所引起的中枢儿茶酚胺水平下降对肌体生化过程的损坏，并具有增强肾上腺皮质的功能与性激素样作用，有助于改善老年人机能低下的性腺功能。虫草能促进脾脏巨核细胞增殖，使血液中血小板数增加，其提取物可促进骨髓红系组细胞、粒单核心组细胞及造血干细胞的增殖。由此可见，虫草对造血功能有全面的促进作用10。2毒性实验1.2急性毒性分别选健康、体重1822 g小鼠和体重180220 g大鼠各40 只, 雌雄各半。冬虫夏草菌丝体用1%羧甲基纤维素配制。大、小鼠均随机分成20.0 g/kg体重剂量组和对照组(1%羧甲基纤维素), 每组20只, 雌、雄各半。大、小鼠空腹分2次灌胃, 观察14 d。1.3骨髓细胞微核试验选健康、体重2528 g小鼠50只, 雌雄各半。小鼠随机分2.5、5.0、10.0 g/kg体重3个剂量组, 1个阴性对照组(1%羧甲基纤维素)和1个阳性对照组(环磷酰胺80.0 mg/kg体重), 每组10只, 雌、雄各半。冬虫夏草菌丝体用1%羧甲基纤维素配制。小鼠空腹, 间隔24 h连续灌胃2次, 于第2次灌胃后6 h脱臼处死, 取胸骨骨髓制成骨髓片, Gimsa染色, 每只小鼠计数嗜多染红细胞1000只, 计算微核发生率(%)。1.4 30d喂养试验选健康、断乳、体重70100 g大鼠80只, 雌雄各半。大鼠随机分1.25, 2.50, 5.00 g/kg体重3 个剂量组和1个对照组, 每组20 只, 雌、雄各半。冬虫夏草菌丝体按剂量以体重10%折算分别均匀拌入基础饲料。大鼠连续30 d按剂量喂饲含受试物饲料, 对照组喂饲基础饲料, 自由进食、饮水, 每天观察并记录动物的一般表现、行为、中毒症状和死亡情况, 每周记录体重和进食量并计算食物利用率, 实验期末禁食16 h, 眼球取血, 断头处死, 对每只大鼠进行脏器大体观察, 取肝、肾、脾、睾丸称重并计算脏体比, 同时进行血象、血生化检查, 留取肝、肾、脾、胃、肠、睾丸、卵巢进行病理组织学观察。血象采用Abacus全自动血液分析仪进行测定, 血生化检查取血清用Liasys全自动生化分析仪进行测定。脏器石蜡切片, H -E染色12。3试验结果3.1急性毒性实验期间, 各组小鼠、大鼠均未出现异常症状、体征, 也无死亡, 得出冬虫夏草菌丝体对雌、雄小鼠和雌、雄大鼠经口LD50均大于20.0 g/kg体重, 属无毒级13。3.2骨髓细胞微核实验3个剂量组雌、雄小鼠微核发生率为0.18%0.22%, 阴性对照组均为0.20% , 阳性对照组分别为3.18%和3.08%。3个剂量组与阴性对照组比较, 微核发生率均无显著性差异;而阳性对照组微核率明显高于阴性对照组, 其差异有非常显著性意义(P0.01)。表明冬虫夏草菌丝体对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显影响14。3.3 30d喂养试验一般观察实验期间, 各组大鼠均未见异常症状和体征, 也无死亡。各剂量组雌、雄大鼠的体重增长情况良好, 与对照组比较均无显著性差异。各剂量组雌、雄大鼠的增重、进食量及食物利用率与对照组比较也均无显著性差异。表明冬虫夏草菌丝体对大鼠体重增长、进食量及食物利用率均未见明显影响15。4小结冬虫夏草菌丝体属无毒级;未见潜在致突变作用;对大鼠30d喂养试验, 未见明显毒性反应, 其对大鼠的生长发育、血象、血生化及脏体比等指标均未见明显影响, 对大鼠大体解剖、组织学观察结果也均未见明显不良影响。所以说冬虫夏草没有没有明显副作用。参考文献：1 园丁.神奇的滋补中药-冬虫夏草J.药物与人,2006,19(2):64 -65.2 吴垠, 吕圭源, 金江.人工虫草药理研究 J .中国民间疗法,2006,14(3):57 -58.3 王英超, 李天俊, 任健.冬虫夏草菌液体发酵过程中酶活性的测定与分析J .食用菌, 2006, 18(2):19 -21.4 赵克蕊, 王维亭, 赵专友.冬虫夏草的药理作用 J .国外医药:植物药分册, 2006, 21(3):105 -1085俞丽霞,张冰冰,阮叶萍等;虫草多糖不同组分的免疫活性研究J;浙江中医学院学报;2004年01期6方士英,姚宏伟,李俊;冬虫夏草抗炎免疫调节作用的研究进展J;安徽医药;2004年03期7张巧霞;冬虫夏草菌抗肿瘤活性及其作用机理的研究D;天津大学;2005年8王根维,唐仕川,陈向伟;冬虫夏草水提物对巨噬细胞吞噬功能的实验研究J;山西医科大学学报;2000年01期9俞宙,何建新,王方方;冬虫夏草水提液抗心肌细胞缺氧再给氧损伤的实验研究J;第一军医大学学报;1998年02期10贾保祥,张玉海,武俊杰;人工合成冬虫夏草对血糖和胰岛素分泌影响的实验研究J;首都医科大学学报;2000年02期11沈新娥;复方虫草精华改善血液循环功能和增强免疫功能的实验研究D;苏州大学;2002年12宋立江,蒋东升,郭金铭等.SD大鼠血液某些生化指标正常参考值的探讨J;