何启盖教授-重要猪呼吸道疾病-副猪嗜血杆菌病的防控

重要猪呼吸道疾病副猪嗜血杆菌病的防控,华中农业大学动物医学院,何 启 盖 教授,2008-8-28,提 纲,1、病原的特点2、药物敏感性3、临床表现和病理变化4、免疫预防5、其它综合措施,又名：猪多发性浆膜炎与关节炎 说明了本病的主要临床特征 与其它疾病鉴别诊断的难度,病因是什么？有什么特点？,病原为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)，革兰氏染色阴性,在巧克力培养基上培养生长很差。如果与金黄色葡萄球菌同时培养, 在该菌两侧生长良好。,多血清型增加了免疫预防的难度,15个血清型不能分型的菌株： 现有的血清学方法不能区分。,不同血清型的毒力有所差异,高毒力：引起急性死亡 血清型1，5，10，12，13，14中等毒力：浆膜炎和关节炎 血清型2，4，8，15低毒力：不引起临床症状 血清型：3，6，7，9，11,不同国家的副猪嗜血杆菌血清型分布,血清4型和5型：日本，美国血清2型和4型：德国血清5型和13型：丹麦和澳大利亚,病原特点对临床检测的要求,对外界环境因素抵抗力弱分离时间：要求样品新鲜，在46小时冷藏条件送实验室；最好是病猪，没有使用抗生素治疗的。分离部位：肺脏、脑组织和关节腔使用的培养基：含有NAD的TSA培养基,多见于58周龄的猪，发病率一般在10%15%，严重时死亡率高达50%。主要危害：呼吸道症状运动障碍神经症状。该菌还可引起败血症，并且在急性感染后可能留下后遗症，即母猪流产，公猪慢性跛行,发生的日龄和表现,该病原在“高热综合症”中的作用,在2006年全国范围内爆发的“高热症”中，副猪嗜血杆菌在细菌分离率中列第3位，在该病的继发感染中起到了重要作用。,与美国当前的猪病形势相似： 蓝耳病副猪嗜血杆菌,汤细彪等,鸣谢：济南小红鹰公司,不同省份HPS分离株的药物敏感性,药敏试验的致病菌株系2007年从不同省份的不同猪场分离在一个猪场中，血清型与药物敏感性相同的菌株，统计分析时只保留一株,鸣谢：本实验室博士生 周雪利,敏感菌株占检测菌株的百分比,100%,70-99%,50-69%,0-49%,鸣谢：本实验室博士生 周雪利,敏感菌株占检测菌株的百分比,100%,70-99%,50-69%,0-49%,鸣谢：本实验室博士生 周雪利,耐药性的机理,耐药质粒（四环素耐药质粒）的存在，耐药性的诱导 长期低剂量的使用抗生素有关？生物被膜的形成：基因组测序的结果，将提供大量的生物信息学知识，进一步了解细菌与机体的相互作用。,主要临床症状,体温：升高，一般在4041，呼吸道症状：咳嗽，呼吸困难；生长不良，消瘦。运动障碍：关节肿胀、跛行神经症状：共济失调。,猪只消瘦，大小差异明显,病理剖解变化,浆膜性和化脓性纤维蛋白渗出物: 腹膜、心包膜和胸膜有渗出性纤维蛋白沉着 胸腔、心包膜、腹腔积液。 肺部炎症，粘连,胸膜炎,关节积液,关节炎,绒毛心 心包积液,脑膜炎,淋巴结肿大,本病在我国的分布,我国已从北京、黑龙江、辽宁、河南、河北、湖南、湖北、山东、上海、福建、广东、宁夏等省市分离出副猪嗜血杆菌。,副猪嗜血杆菌感染的血清学调查,采用该间接血凝检测方法从2005年3月到2005年12月对全国七个省份共血清1665份的抽检结果阳性784份，阴性881份，阳性率47.1%。,我国副猪嗜血杆菌不同血清型的频率分布,副猪嗜血杆菌与其它病原菌的混合感染情况,常规实验室诊断,细菌分离：要求样本新鲜； 保证在4C条件下迅速送到实验室； 最好选择没有使用药物的病猪血清学检测： 间接血凝试验： 琼脂扩散试验,PCR检测,直接使用分离和纯化的细菌用组织直接检测：敏感度略低用液体培养的菌液检测直接使用纤维素性渗出物，可以检出致病菌16s-/tbp PCR：只检测副猪嗜血杆菌；多重PCR：检测4种常见呼吸道细菌病原 传染性胸膜肺炎，副猪嗜血杆菌； 巴氏杆菌； 支原体肺炎,鉴别诊断,链球菌病：败血症状更严重；神经症状较为多见；关节积液，较为浑浊；心血涂片，发现链状排列的球菌；各个年龄段的猪均可发生传染性胸膜肺炎：病变仅在肺脏；急性死亡的猪口鼻流血。,免疫预防措施,血清特异性的灭活疫苗：世界上大多数国家采用的策略弱毒疫苗：AroA基因缺失的菌株自然感染：3日龄之内感染5型菌株：在母源抗体水平与接种菌量之间的平衡 借鉴蓝耳病人工感染的经验,华中农业大学从1999年根据该病的流行病学和临床资料，结合动物试验筛选出两种优势血清型的菌株（4型和5型），研制出副猪嗜血杆菌病灭活疫苗。,灭活疫苗及其应用,副猪嗜血杆菌病的免疫程序,初产母猪：首免:产前89周； 二免:产前 45周。经产母猪：产前45周。仔 猪：首免:14日龄； 二免:35日龄。,第1组：非免疫母猪所产仔猪，仔猪不免疫第2组：非免疫母猪所产仔猪，仔猪免疫第3组：免疫母猪所产仔猪，仔猪不免疫 第4组：免疫母猪所产仔猪，仔猪免疫,母源抗体不干扰对哺乳仔猪的免疫效果,如果免疫后不理想.,是否是其它疾病?是否有继发感染(如蓝耳病毒+副猪嗜血杆菌等)重新(多次)送检病料,制备自家疫苗 因为: 送检病料可能分离不出细菌 某一个猪场存在多个血清型感染,多次送检,需要多次分离,才能获得多个血清型的副猪嗜血杆菌。,如果免疫后不理想.,评估流行菌株与疫苗菌株之间的相关性 血清学分型 基因分型方法,综合控制措施,减少密度敏感药物的使用：药物重在预防，而非治疗；建议通过饮水途径给药；在转入保育期之前使用。磷酸替米考星的使用,案例1：湖北某猪场,保育猪发热，预防与治疗非常困难细菌分离：只有副猪嗜血杆菌感染建议疫苗预防： 28日龄免疫，效果理想 问：是否可以更小日龄免疫？ 建议免疫母猪，仔猪获得母源抗体，保护仔猪,案例2,广东某场案例：高热病期间的保育猪死亡,血清和病料RTPCR： 蓝耳病毒（含变异株）为阴性两次现场分离菌：副猪嗜血杆菌,措施：敏感药物饮水和疫苗免疫同时进行,预防当前复杂的呼吸系统疾病,蓝耳病伪狂犬病活疫苗副猪嗜血杆菌伪狂犬病活疫苗胸膜肺炎放线杆菌灭活疫苗,培训计划,与 Iowa State University 兽医学院开展猪病防治人才的培