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本科毕业论文(设计)单增李斯特菌单克隆抗体的制备学 院 动物科技学院 专 业 动物医学 年 级 2010级 学 号 XX 姓 名 XX 指导教师 XX 成 绩 2015年5月20日2西南大学本科毕业论文(设计)开题报告论文题目学院专业动物科技学院动物医学专业年 级2011级开题日期2014年11月20日学 号姓 名指导教师1本课题研究意义2研究内容3技术路线、研究方法和研究进度技术路线和方法:研究进度:4导师意见 指导教师(签名):年 月 日5学院意见 学院(盖章) 年 月 日西南大学2015届毕业设计 动物科技学院2011级动物医学目 录摘 要1Abstract1文献综述21单增李斯特菌概述21.1李斯特菌属的分类21.2单增李斯特菌的血清型21.3单增李斯特菌的生物学特性21.4单增李斯特菌的致病因子32常用的检测方法32.1传统鉴定方法42.2免疫学检测方法42.3分子生物学检测方法53单克隆抗体技术的研究发展53.1单克隆抗体的含义53.2单增李斯特菌单克隆抗体制备63.3单增李斯特菌单克隆抗体制备意义64小结6引言81材料与方法81.1试验材料81.2实验方法102试验结果142.1间接ELISA方法的建立142.2小鼠血清效价的测定162.3阳性杂交瘤细胞的筛选162.4单克隆抗体亚类的鉴定162.5单克隆抗体的特异性分析162.6小鼠腹水单抗效价的测定173分析与讨论173.1动物免疫173.2间接ELISA方法的优化183.3细胞融合183.4杂交瘤细胞的克隆193.5单克隆抗体特异性分析194小结20参考文献21致 谢239单增李斯特菌单克隆抗体的制备(中文题目:居中、黑体、小二号)学生姓名(中文姓名:居中、仿宋、小四号)指导教师 姓名(中文姓名:居中、仿宋、小四号)西南大学动物科技学院 重庆 400715(居中、仿宋、小四号)摘 要:(中文5号仿宋_GB2312,英文及数字为Times New Roman,行间距19磅,段前0.5行)关键词:(关键词宋体5号,词与词间用分号隔开,段前0.3行)Preparation of Listeria monocytogenes Monoclonal Antibodies(英文题目:居中、四号加粗、英文一律采用Times New Roman字体)Jia JingyeXXX Xxxx (英文姓名:小4号,姓全大写,名第一个字母大写)Tutor: Wei XueliangXXX Xxxx (英文姓名:小4号,姓全大写,名第一个字母大写)Animal Science & Technology College,Southwest University,Chongqing,400715,China(小4号)Abstract:XXXXXXXXXXXXXXXX (英文摘要:小4号,Times New Roman字体,行间距17磅)Key words:XXX; XXX; XXX; XXX (英文关键词:小4号,最后一个词不打标点符号。)文献综述单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)(以下简称“单增李斯特菌”)是一种人畜共患病原菌。单增李斯特菌是一种土壤中的腐生菌,能使人畜患病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多,死亡率高达20%30%。它广泛存在于自然界中,人们食用的肉奶蛋、水产品及蔬菜等均有不同程度的污染,食品中存在的单增李斯特菌对人类的安全具有危险,该菌在4的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品中威胁人类健康的主要病原菌之一,因此,在食品卫生方面,必须加以重视。1单增李斯特菌概述1.1李斯特菌属的分类李斯特菌属细菌(Listeria)包括:无害李斯特氏菌(L.innocua)、伊氏李斯特菌(L.ivanovii)、西尔李斯特氏菌(L.seeligeri)、威尔斯李特氏菌(L.welshimeri)、格氏李斯特氏(L.grayi)、默氏李斯特氏菌(L.murrayi)、反硝化李斯特氏菌(L.denitricans) 和单增李斯特菌(Listeria monoeytogenes,LM) 1。目前国际上已经把反硝化李斯特氏菌列为了琼斯菌属。在七种李斯特菌中,只有伊氏李斯特菌和单增李斯特菌被认为是致病菌,前者只是针对一些动物的感染,常引起败血症和流产 2,但后者却是能够引发人畜共患病的致病菌,能引起脑膜炎、骨髓炎、心肌炎、孕妇流产以及产褥感染等李斯特菌病 3。无害李斯特菌、威尔氏李斯特菌和格氏李斯特菌对人类也有一定的致病性。引言据WHO统计,发达国家每年约有三分之一的人感染食源性疾病,美国每年的食源性疾病多达7600万例。而在一些发展中国家,食源性疾病往往是导致人的非正常死亡的主要原因。据我国商务部统计,我国每年出口食品因安全问题损失170多亿美元,对免疫缺陷病人甚至高达70%9。临床症状除了表现出恶心,呕吐,腹疼等一般细菌性食物中毒的症状外,还会导致人患脑膜炎、骨髓炎、心肌炎、孕妇流产以及产褥感染等疾病。美国疾控中心在2013的报告中指出20%的李斯特菌病会致死。1材料与方法1.1试验材料1.1.1菌株单增李斯特菌标准菌株、伊氏李斯特菌标准菌株(ATCC 19119)、威尔氏李斯特菌标准菌株(CCM 3971T)、格氏李斯特菌标准菌株(ATCC 21670)来自天津泰达生物有限公司。2试验结果2.1间接ELISA方法的建立(1)抗原最佳包被条件的优化分别将抗原进行37 包被2 h(组1);4 过夜包被(组2),进行ELISA 检测,结果见表1。表1 抗原最佳包被条件的确定Table 1 Determination of optimal antigen coating conditions稀释度10-110-210-310-410-5阴性对照组1 OD4921.8231.4370.9470.2170.1710.120组2 OD4921.5451.2690.8540.1910.1520.117图表的标题应有中英文对照,字体为宋体,五号,居中,表格采用三线表;图头在图的下方,表头在表格上方,如有注释,一律排在下方。图1 不同孵育时间ELISA结果柱状图Fig.1 Histogram of ELISA results of different incubation time3讨论3.1动物免疫免疫动物的选择对免疫效果有很大的影响。4结论(1)以灭活的单增李斯特菌为抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,结果筛选出1E3。(2)。参考文献1 陈彦长,牛春莉,李瑾,等常见细菌及检验实用技术M中国科学技术出版社,20042 Kimpe A, Decostere A, Hermans K, et alIsolation of Listeria ivanovii from a septicaemic chinchilla (Chinchilla lanigera)JVeterinary record, 2004,154(25):791-7923 梅玲玲,骆丽巧,朱敏,等食品中单增李斯特菌血清型及耐药性研究J中国卫生检验杂志,2006,16(10):1165-1166致 谢值此论文完成之际,我最大的心愿就是向大学学习曾经关心和帮助过我的人们表示最诚挚的谢意。感谢培育我的西南大学,西南大学浓厚的学术氛围,舒适的学习环境我将终身难忘。感谢动物科技学院,能够提供给我学习专业知识的环境和机会。 (本人签名) 二一五年五月二十日本科毕业论文(设计)指导教师评阅表毕业论文(毕业设计)题目姓 名学 号学院、专业、年级动物科技学院、动物医学、2011级指 导 教 师评阅时间2015年5月115日评阅意见论文评定等级评阅人签名备 注本科毕业论文(设计)交叉评阅表毕业论文(毕业设计)题目姓 名学 号学院、专业、年级动物科技学院

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