《组织学绪论》课件.ppt

武俊芳组胚教研室电话 0373 3029126 组织学与胚胎学HistologyandEmbryology 课程安排 本学期 理论课48学时 组胚学38学时 胚胎学10学时 实验课20学时 大二 组织病理学实验 必修课70 理论成绩 30 实验成绩 Introduction 绪论 内容简介 组织学与胚胎学研究内容 掌握 常用的技术简介 熟悉 学习方法 了解 一 组织学与胚胎学的研究内容 组织学 histology 是研究正常机体细微结构及其相关功能的科学 借助显微镜 显微解剖学 结构和功能 内容 细胞 基本组织 器官和系统 1 细胞 结构和功能的基本单位 光镜结构电镜结构2 组织 细胞和细胞外基质构成 4大基本组织 上皮组织 结缔组织肌组织 神经组织3 器官和系统 分子亚细胞细胞组织器官系统 生物大分子包括核酸 蛋白质 多糖和脂 细胞器等超微结构 细胞质 细胞核等 上皮 结缔 肌组织和神经组织 肝 胃等 消化系统 呼吸系统等 人体胚胎学 humanembryology 研究人个体发生 发育的规律的科学 研究从受精卵到胎儿的发育过程中复杂的结构和功能变化 组织学与胚胎学的地位和意义 以解剖学为基础 结构是功能的基础 学习生理学的基础 学习病理学的基础 学习妇产科学等的基础 二 常用的研究方法 一 显微镜 光学显微镜 lightmicroscope LM 电子显微镜 electronmicroscope EM 光学显微镜普通显微镜 普通光线荧光显微镜 紫外光或蓝紫光激光共聚焦扫描显微镜 激光电子显微镜 电子束为光源透射电子显微镜扫描电子显微镜 裸眼0 2mm 1mm 103 m 106nm光镜放大倍数以千计 电镜放大倍数以万计 显微镜不同 所见结构大小不一种类结构分辨率度量单位光镜光镜结构0 2 m m电镜超微结构0 2nmnm分辨率 人眼分辨两点之间最小距离的能力 普通光学显微镜 荧光显微镜 激光共聚焦扫描显微镜 激光采用共轭聚焦原理和装置 利用计算机进行数字图像处理 对切片进行连续扫描 对各个层面的结构图像进行3维重建 解决了标本中结构相互重叠的问题 透射电镜 扫描电镜 二 常用标本制备光 电镜标本技术 离体标本缺陷变腐柔软大块无色 涂铺磨切 染色 扫描电镜 固定 脱水 表面喷镀金属膜 相应措施 取材 固定 脱水 透明 浸蜡 包埋 切片 染色 脱水 透明 封片常用染色法 苏木素 伊红 HE 显示光镜结构的常用染色法 苏木精 伊红染色 hematoxylin eosinstaining 简称HE染色染料组织名称化学性质色彩化学性质嗜好着色部位苏木精碱蓝酸嗜碱性细胞核大量核糖体伊红酸红碱嗜酸性大部分成分特殊染色如硝酸银 甲苯胺蓝 醛复红等活体染色台盼蓝活体注射 HE染色法 银染法 组织浸入硝酸银 亲银性 嗜银性 甲苯胺蓝染色 异染性 肥大细胞 醛复红染色 台盼蓝活体染色 透射电镜标本 取材 固定 脱水 包埋 切片 电子染色等染色 重金属盐 醋酸铀和柠檬酸铅 电子密度高电子密度低 电镜结构图 透射电镜结构图 扫描电镜结构图 三 组织化学和细胞化学技术 利用某些化学试剂与组织中某种物质发生反应 反应终产物形成可见的有色沉淀物 间接对某种组织细胞成分的进行定性 定位及定量显示 例如 糖类 PAS反应 过碘酸希夫反应 脂类 苏丹染色 肝糖原 小肠粘原颗粒 PAS反应阳性 过碘酸希夫反应 紫红色 脂类 苏丹染色 脂肪组织 四 免疫组织化学 immunohistochemistry 利用抗原和抗体结合的原理 用标记的抗体检测组织中多肽和蛋白质的技术 抗体的标记物荧光素辣根过氧化物酶胶体金 光镜或电镜 荧光显微镜 电镜 免疫组织化学 荧光素标记 免疫组织化学 辣根过氧化物酶标记 免疫组织化学电镜像 A胶体金标记B辣根过氧化物酶标记 五 原位杂交术 insituhybridization 原理 根据 或 核苷酸碱基互补规律 用已知的被标记碱基序列 核酸探针 与细胞内待检的 或 片段进行特异性结合 即杂交 通过标记物的显示 观察待测基因的定位和定量 碱基的标记物 放射性核素 放射自显影后观察 涂感光乳胶 暗处曝光 显影 定影 非放射性 地高辛 免疫组化处理后观察 原位杂交 放射自显影术 autoradiography 利用放射性核素的可观察和显示性 研究放射性物质在组织或细胞内消长分布的变化来显示细胞的功能状态或该物质在组织和细胞内的代谢过程的方法 将放射性核素或放射性核素标记的物质注入体内 有规律地间断取材 制片 放射性自显影 光镜或电镜观察 放射自显影像 3H TdR掺入 六 细胞培养术 cellculture 把机体细胞在体外模拟体内条件下进行培养的技术 用于研究其代谢 增殖 分化 形态和功能变化 以及各种理化因子对活细胞的直接影响 培养细胞的倒置显微镜图像 七 干细胞的研究和组织工程 tissueengineering 用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术 实验中的组织工程耳 八 图像分析术 imageanalysis 又称形态计量术 是应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析 从而获得立体状态组织和细胞内各有形成分的数量 体积和表面积等参数的技术 体视学 stereology 从组织平面图像 研究三维立体结构的学科 图像分析仪 计算机三维重建 四 组织学的学习方法 基本知识相互联系 相互对比 分析记忆用已有的知识去理解记忆新知识结构和功能的联系结构的直观化 充分发挥观察能力借助插图 照片和图谱等 理解记忆结构立体和切面的关系 立体与切面的关系 典型结构 能反映立体结构特征的切面 教学参考资料 图谱彩色 黑白 电镜结构教科书人民卫生出版社教材等专著组织学1 2版练习题 教研室网址 理论讲授课件