《细菌感染检查》PPT课件.ppt

1 第二节细菌感染检查 2 检验特点 通过对标本直接显微镜检 病原菌的分离培养鉴定 病原菌的抗原检测 核酸检测和细菌感染后机体免疫应答产物的测定及药物的测定及药物敏感性试验 对细菌感染性疾病可作出及时 准确的病原学诊断 3 检测程序 4 Specimen StainofsmearCultureandisolationEnrichedculture AerobiccultivationCultivationwithcarbondioxideAnaerobiccultivation Observationofcolonialmorphology PickingcolonyStainofsmearandmicroscopicdetection SerologicalBiochemicalAntimicrobialidentificationidentificationsusceptibilitytesting DeterminationofpathogenicbacteriaandresultsreportingProceduresforbacterialdetection 5 Gramstainedsmearsofclinicalspecimensproviderapidandpresumptiveevidenceofinfections Theneedforotherdirecttestsmustbeconsidered Theseissueswilldeterminewhetherthespecimenrequiresanypretreatmentbeforeinoculation 革兰染色 抗酸染色 染色标本显微镜检测 6 不染色标本显微镜检测 WetMounts Adirectwetmountoffecalmaterial particularlywithliquidorunformedstool isthefastestmethodfordetectionofmotile 7 3 分离培养培养基 普通琼脂平板血琼脂平板选择鉴别琼脂平板 SS MacC TCBS等巧克力琼脂平板厌氧血琼脂平板 8 分离培养Cultureandisolation 生长条件气体条件 大气条件 厌氧条件 微需氧条件温度 一般35 pH值 7 2 7 6少数例外Observationofcolonialmorphology 9 鉴定identificationBiochemicalidentificationSerologicalidentification 生化鉴定糖分解产物试验 蛋白质分解产物试验 碳源利用试验 呼吸酶类试验等 10 生化鉴定 组合生化试验 IMViC 11 鉴定技术血清学鉴定 利用已知菌种 型 的抗体鉴定标本分离菌的种 型 适用于含较多血清型的细菌 12 鉴定技术数码鉴定 集数字 电子信息及自动化分析技术于一体 采用标准化 成品化和配套生化反应试条鉴定细菌 利用属 群 亚种和生物型 API细菌生化鉴定 14 鉴定技术自动化鉴定 自动化鉴定 自动细菌培养鉴定仪已广泛应用于微生物学检查 有Automicrobic AMS Autobac IDX Microscan等系列 应用最广泛 自动化程度最高 功能齐全的是VITEK AMS系统 微型全自动血培养仪 全自动细菌鉴定及高级专家系统药敏报告仪VITEK2 17 鉴定技术核酸检测 PCR适用于细菌感染诊断 尤其是人工培养不能生长的细菌和营养要求高不易培养的细菌 如麻风杆菌 幽门螺杆菌 嗜肺军团菌 结核分枝杆菌 18 PCR技术 19 Theserologicapproachincludes 1 demonstrationofafourfoldorgreaterriseinantiviralantibodyusingacuteandconvalescentseraandavarietyofmethodsthatmeasurepredominantlyimmunoglobulin Ig antibodyand 2 demonstrationofvirus specificIgMantibodyinasinglelateacuteorrecoveryphaseserum 适用于经抗生素治疗后或慢性细菌性感染 应用时检测双份血清 效价4倍增高 说明曾有感染 血清学诊断宜用于流行病学调查 鉴定技术 抗体检测 20 鉴定技术细菌毒素检测 1 外毒素检测生物学方法 一般不用免疫血清方法 大量样品筛选核酸和基因诊断技术自动化检测2 内毒素检测 21 细菌感染检查项目的选择和应用 按检出细菌种类 临床诊断和治疗 构成不同组合的检验方法 细菌感染诊断原则 1 医师和检验师密切配合2 重视检验师的密切配合3 重视检验过程的阶段性和连续性4 检验程序需有针对性和综合性 22 Diagnosisofbacterialinfections Theidentificationanddifferentiationofbacteriaprincipallyrelies onmicrobialmorphologyandgrowthvariablesonculturingtheorganismsonnon selectiveandselectivemedia Cultureremainsthestandardfordiagnosisofbacterialinfectionbecauseitisthesimplest themostreliableandthemostcostefficientmethod Anotheradvantageisthefactthatparalleltestingofthesensitivitytowardsantibioticsispossible 23 nmolecular biologicaltechnicsthatproviderapididentificationofinfectiousagents bothfromcultureisolatesanddirectlywithinclinicalspecimens onthedetectionoftheantibodyresponsetothepathogen Theconcentrationofinfection sepcificantibodiesisdeterminedintitersoractivityunits 24 Inprinciple thepathogenshouldbeidentifiedbycultureinanyacuteinfectionthatrequirestreatment This however isonlypossibleifthepathogenisstilldetectableinexcretions secreti