《细菌的形态、染色》PPT课件.ppt

微生物的分类 微生物 包括细菌 支原体 衣原体 螺旋体 放线菌 立克次体 病毒及真菌 微生物的生物学性状包括 形态结构 染色特性 生长繁殖与培养 理化性状 分类等 细菌 细菌广义 所有原核细胞型微生物 细菌 支原体衣原体 立克次体 螺旋体 放线菌 共性 有细胞壁 原始核质 二分裂 对抗生素敏感狭义 专指其中的细菌 细菌的大小与形态 观察细菌常用光学显微镜 其大小用测微尺在显微镜下进行测量 以微米 m 为单位 不同种类的细菌大小不一 同一种细菌也因菌龄和环境因素的影响而有差异 细菌按其外形 主要有 球菌杆菌螺形菌 球状 杆状和螺旋状 双球菌分裂后两个球菌成对排列的为双球菌 如肺炎双球菌 1 双球菌 一 球菌 脑膜炎奈瑟菌 双球菌 双球菌 2 链球菌分裂是沿一个平面进行 分裂后细胞排列成链状 如乳链球菌 链球菌 链球菌 链球菌 3 葡萄球菌分裂面不规则 多个球菌聚在一起 像一串串葡萄 如金黄色葡萄球菌 葡萄球菌 葡萄球菌 葡萄球菌 4 四联球菌分裂是沿两个相垂直的平面进行 分裂 分裂后每四个细胞在一起呈田字形 如四联微球菌 四联球菌 四联球菌 四联球菌 5 八叠球菌按三个互相垂直的平面进行分裂后 每八个球菌在一起成立方体形 如藤黄八叠球菌 八叠球菌 八叠球菌 二 杆菌 不同杆菌的大小 长短 粗细很不一致 杆菌的形态多样 梭状芽孢杆菌 杆菌的形态多样 分枝杆菌 双歧杆菌 球杆菌 链杆菌 棒状杆菌 分枝杆菌 三 螺形菌 弧菌 螺菌 革兰氏染色法由Gram发明 沿用至今已有100多年历史 是临床细菌学中最简单 最重要的方法之一 染色后把细菌分成革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 细菌的革兰氏染色 1 鉴别细菌2 选择药物参考G 菌的敏感药物 青霉素G 菌的敏感药物 链霉素 氯霉素3 与致病性有关G 菌的致病物质 产生外毒素G 菌的致病物质 产生内毒素 革兰染色的意义 1 涂片 layeringafilm 2 干燥 air dry 3 固定 heat fixing 4 初染 firststain 5 媒染 stainwithiodine 6 脱色 decolorize 7 复染 counter stain 方法 涂片 第一步涂片 临床标本和液体培养物 直接涂片固体培养基上的细菌和不易涂开的标本 取一滴生理盐水置玻片中央 取菌在盐水中磨匀 成1cm2的涂面 技巧 涂片时从中心向外研磨 用力要均匀 厚度以把涂片放到纸上 透过涂片刚好看到下面纸上的字为宜 第二步干燥 涂片最好在室温下自然干燥或将标本面向上 置于火焰上部的热气烘干 切不可在火焰上烤干 第三步固定 将已干燥的涂片通过火焰3次 以玻片触及手背皮肤热而不烫为度 目的 1 杀死细菌2 使细菌附着于玻片上3 维持细菌原有形态4 改变细菌对染料的通透性 第四步初染 滴结晶紫染液于玻片上 使细菌涂层被全部覆盖 1分钟后 细流水冲洗 甩干 注意 染液必须用水冲洗 而不能直接倒去 以防染液沉渣留在玻片上 第五步媒染 滴加碘液于玻片上 1分钟后 流水冲洗 甩干 在这一步中 碘液作为媒染剂 它的主要作用是促进染料与细菌的结合 也就是初染时结晶紫与细菌的结合 所以媒染剂又叫助染剂 第六步脱色 滴加95 酒精数滴于玻片上 轻轻摇动 不断补充酒精 脱色至流下来的液体无紫色为止 约半分钟 流水冲洗 甩干 这一步在操作中最为关键 脱色时间应以标本涂片厚薄灵活掌握 一般以流下的酒精无紫色为宜 第七步复染 加稀释石碳酸复红数滴 一分钟后流水冲洗 用滤纸吸干玻片表面的水 染色片制备好后 在油镜下观察结果 正常情况下 细胞的成分与大多数背景染成粉红