干式生化与湿式生化比较ppt课件.ppt

干化学法和湿化学两种生化分析系统检测结果评价及统一 1 为什么要评价和统一 第一部分 2 背景 检验医学迅速发展 临床检验工作量加大 临床实验室逐步规模化 自动化 多样化 新的仪器设备与方法不断引进更新 为了同时满足急诊和住院部检测工作的需要 本实验室内存在干化学法和湿化学两种不同的生化分析检测系统 解决检测结果的溯源性及和其它检测系统的可比性 准备参加国家实验室认可 3 同一实验室内不同检测系统之间检测结果的一致性及可比性 同一检测项目在同一医院可能得到差异比较大或完全不同的检测结果 同一患者同一检测项目在不同医院可能得到差异比较大或完全不同的检测结果 疑问 4 不利影响 检验质量遭到异议医疗纠纷医疗事故的发生 不同检测系统的统一势在必行 5 怎样评价和统一 第二部分 6 评价依据 美国全国临床实验室标准委员会 NCCLS 制定的标准评价方案EP9 A文件 用患者样品进行方法对比及偏倚评估 EP9 A1文件 1995年第一版 EP9 A2文件 2002年第二版 7 实验前准备 1 确定实验方法 Y 和比较方法 X 实验方法 Y 强生950干化学检测系统比较方法 X AU640湿化学检测系统 8 对仪器进行一次完整的保养 确认仪器处于良好的状态 应准备同一批号足够的试剂盒 整个实验过程都必须有分析过程的质量控制弄清每个检测项目的可报告范围 2 比较方法 X 检测系统的准备 9 熟悉仪器操作及保养程序 应准备好足够的干片 每个产品要求是同一批号 整个实验过程都必须有分析过程的质量控制进行精密度实验 不能实现精密度要求的 应首先解决问题再做以下实验 3 实验方法 Y 检测系统的准备 10 方法对比实验 方法和结果 11 标本的选择 标本必须充分地表现病人的种类和实验室所研究的范围 比较研究结果的好坏直接取决于使用的标本 适当的标本对分析至关重要 比较理想的是用新鲜的血清 并在两个小时内同时用新分析仪和比较方法进行分析 必要是可以选择冷冻的标本 但注意 如果利用贮存的标本 必须用比较方法重新测定这些标本 并且两种方法的标本贮存和处理应该保持一致 质控血清不能提供和实际病人标本同样的信息 由于不同的基质效应 不同的同工酶等等 12 样本来源 临床上 典型 病人标本 不要使用溶血或其它含有干扰此方法组份的样本 实验标本数 40份 实验样品 13 测定标本 每天随机抽取5份样本 共测定8天 每个标本分别用干化学法和湿化学法测定 分别测定2次 按顺序1 5进行测定 再按相反顺序5 1重复测定 14 病人样本检验结果 表1 15 分析数据过程 删除超出可报告范围以外的数据初步数据检查线形回归计算预期偏差及其可信区间 16 数据的删除 EP9 A文件规定 不使用超出可报告范围以外的数据 删除超出可报告范围以外数据 再继续数据的处理 17 初步数据检查过程 方法内双份数据中离群值的检查数据作图线形相关的目测检查方法间离群点的检查X值合适范围的检查 18 计算标准化 相对 的绝对差值均值DXi DXi N 方法内离群值的检查过程 计算绝对差值DXi Xi1 Xi2 计算标准化 相对 的绝对差值DXi Xi1 Xi2 Xi 计算绝对差值均值DX DXi N 19 以绝对差值均值DX DY的4倍为可接受限 若绝对差值 DX或DY 超出此限 则附加计算标准化的绝对差值 以标准化的绝对差值均值DXi DYi 的4倍作为标准化的绝对差值的检测界限 若超过此限则为离群值 排除离群点数不能超过样品总数的2 5 离群点判断规则 20 方法内离群值的检查结果 表2 21 双份测定平均值的散点图 YiXi 数据作图 散点图 全部结果的散点图 YijXi 22 偏倚图 双份测定平均值之差 Yi Xi Xi 数据作图 偏倚图 偏倚图 每次测定与平均值之差 Yij Xi Xi 1 当比较方法X为参考方法 23 偏倚图 双份测定平均值之差 Yi Xi Xi Yi 2 数据作图 偏倚图 偏倚图 每次测定与平均值之差 Yij Xi Xi Yi 2 2 当比较方法X不是参考方法 24 线性相关的目测 线性关系满意进行下一步 线性部分太窄 每种方法线性部分必须分别检查 找到非线性原因 25 存在明显非线性相关 高浓度区 低浓度区 余下线性区 截去非线性数据 替换被排除样品 非线性 非线性 是否包含医学上有意义浓度范围 确实如此 重新分析数据 26 计算标准化 相对 的绝对差值均值E Eij 2N N 40 方法间离群值的检查过程 计算绝对差值Eij Yij Xi 计算标准化 相对 的绝对差值Eij Yij Xi Xi 计算绝对差值均值E Eij 2N N 40 N i 2 j N 2 i j 27 相关分析 X最适范围实验 X变量存在误差会影响相关系数r 但如果数据X范围足够宽 那么这个误差对于回归分析的影响被认为很小 r Xij X 2 Yij Y 2 Xij X Yij Y X Xij 2N N 40 Y Yij 2N N 40 28 如果r 0 975 或r2 0 95 则认为X范围适合 数据满足要求 X的误差可以由数据范围给以适当补偿 并且简单的线性回归可以用来评价斜率和截距 如果r2 0 95 那么必须通过分析另外一些样品以扩大数据范围 然后再检查全部数据系列 29 回归分析 直线方程式 y mx by 比较方法的结果x Vitros方法的结果b 直线的y轴截距m 直线的斜率 通过散点图的数据点 可以用线性回归分析找出 最好 的适配的直线方程式 30 截距 b 测定了恒定误差 理想值 0斜率 m 测定了比例误差 理想值 1 回归分析的解释 31 结果评价 32 偏差的评价方案 数据满足最适范围检查数据均匀离散分布 数据不满足最适范围检查使用分步偏差计算平均偏差 1 用线性回归方程评价 3 用分步残量程序评价 2 用分步偏差程序评价 数据存在精密度变化用分步偏差计算分步的残余值 33 残量 一个给定的数据点与回归线之间在Y轴方向测定出的差别 成为此点的残量 残量Rij Yij Yij Yij a bXij 评估标准差 theStandardErroroftheEstimate SEE 又称残量的标准差 是测定围绕回归线的离散度 也即是Sy x 残量及其标准差 Sy x Yij Yij 2N 2 34 则68 的点应预期落在1Sy x内95 应在2Sy x内而99 7 应在3Sy x内 1 如果回归直线的变异是呈正态分布 2 Sy x测定了随机误差 理想值 0Sy x值较大 可能意味着 一种或两种方法的较差的精密度两种方法之间的不同特性对Sy x解释的前提是每个方法均有较好精密度 35 1 在给定的医学决定水平Xc 预期偏差Bc的估计可按下式计算 计算预期偏差 Bc a b 1 Xc 2 Bc的95 可信范围 在Xc的真正偏差 可按下式计算 LowHigh B