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梅毒实验室检测梅毒血清学检查 非梅毒螺旋体抗原血清试验 梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验 性病研究实验室试验（ VDRL） 不加热血清反应素试验（ USR） 血浆反应素环状卡片试验（ RPR、 TRUST）非梅毒螺旋体抗原血清试验 梅毒螺旋体一旦感染人体，宿主迅速对螺旋体表面的脂质作出免应答，在 3-4周产生抗类脂抗原的抗体（反应素）。抗体主要是 IgM和 IgG混合抗体。 未经治疗的病人，其血清内的反应素可长期存在。经正规治疗后，反应素可以逐渐减少至转为阴性。RPR试验 在 USR试剂成分的基础上 加入黑色碳颗粒 作为沉淀的指示物 用白色的硬纸片替代玻片 血清不需要灭活 不需要显微镜观测结果 可作定量试验 有现成的试剂盒 携带方便 操作简单，价格便宜 试验的结果可长期保存RPR试验 仪器设备 水平旋转仪 RPR试剂盒： RPR抗原、带直径为 18mm圆圈的反应卡片、抗原用滴管、针头。RPR试验 操作步骤定性试验加样：吸取 0.05ml血清（浆）放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈中。加抗原：将抗原轻轻摇匀，用 9号针头加 1滴抗原。反应：将卡片置水平旋转仪旋转 8分钟，立即在亮光下观察结果。RPR试验 操作步骤定量试验稀释液准备：在圈内加入 0.05ml生理盐水（一般作 68 个稀释度），勿盐水涂开。加样：吸取 0.05ml血清与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈中，从后向前依次涂开。往所有孔内加入抗原悬滴液一滴。将卡片置水平旋转仪旋转 8分钟，立即在亮光下观察结果。RPR试验 结果判读3+、 4+:圆圈内出现中到大的黑色絮状物，液体清亮。2+：圆圈内出现小到中的黑色絮状物，液体较清亮。1+：圆圈内出现小的黑色絮状物，液体混浊。-：圆圈内仅见碳颗粒集中于中央一点或均匀分散。RPR试验 结果报告定性试验（ 1）阳性：出现 1+4+ 强度的凝聚反应。（ 2）阴性：不产生凝聚反应。定量试验滴度：出现凝聚反应的样本最高稀释倍数。RPR试验 注意事项 实验环境温度应为 2329 ，抗原应保存于 4 冰箱，试验前恢复到室温。抗原应防止冻结，以免抗原被破坏。 校准针头。 血液标本应防止污染，放置室温应在 24小时内完成。 试验完毕，应立即观察结果。梅毒螺旋体抗体试验 梅毒螺旋体明胶可怜凝聚试验（ TPPA） 梅毒螺旋体血球凝聚试验（ TPHA） 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（ FTA-ABS） 梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ TP-ELISA） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（ TP-WB）TPPA试验 原理 :用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，此致敏明胶可怜与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝聚反应。明胶颗粒为玫瑰红色，便于肉眼观察结果 。TPPA试验 仪器设备微量振荡器试剂盒： “ A” 为溶解用液， “ B” 为标本稀释液， “ C” 为致敏粒子， “ D” 为未致敏粒子， “ E” 为质控血清。U型反应板TPPA试验 操作步骤 试剂准备：试验前将待检样本和试剂应恢复到室温。 加稀释液：每份样本做 4孔，加 B液至反应孔内，第一孔100ul，第 2至 4孔各 25ul。 样本稀释：取样本血清 25ul加至第 1孔，混匀后取 25ul至第 2孔，连续倍比稀释至第 4孔，最后 1孔混匀后弃去 25ul。 加对照液：第 3孔加 D液 25ul，第 4孔加 C液 25ul。 混合：将反应板置振荡器振荡 30秒。 反应：将试验板放置 2小时左右。TPPA试验 结果判读 观察加未致敏粒子的第 3孔，不出现凝聚为有效使用。 观察凝聚反应强度，分级如下： 4+：粒子光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠。 3+：粒子光滑覆盖大部分孔底。 2+：粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一细胞环。 1+：粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一明显细胞环。 ：粒子沉集孔底，中央形成一小点。 -：粒子紧密沉积孔底中央。TPPA试验 结果报告阳性：第 3孔不出现凝聚，第 4孔 1:80稀释样本与致敏粒子产生 1+至 4+凝聚反应。阴性：为致敏粒子和致敏粒子均不产生凝聚反应。TPPA试验 注意事项 U型反应板要清洁干净，孔内无异物 加入血清后，使用振荡器振荡反应板，不可使用水平旋转仪，更不能用手振荡。 试剂盒不可置于 0 以下，防止冻结。不同批号试剂不可混合使用。 如未致敏颗粒出现凝聚反应，应将血清进行吸收处理后在进行试验，或改用其他试验方法。梅毒血清学 试验结 果的 临 床意义USR、 RPR