医学检验的溯源性、校准品定值与质量控制.pdf

溯源性 校准品定值与质量控制溯源性 校准品定值与质量控制 By Eric Yang QSD Product Specialist 标准的重要性标准的重要性 目前 世界最准确原子钟150亿年仅误差1秒 标准的重要性标准的重要性 标准的重要性标准的重要性 格林威治时间 格林威治时间 格林威 治子午线上的地方时 或零时区 中时区 的 区时叫做格林威治时 间 格林威治时 间 也叫 世界时 原是 采用格林威治的平正午 作为一个平太阳日的开 始 但在使用中有些不 便 因此 国际天文学 联合会于1928年决定 将由格林威治平子夜起 算的平太阳时作为世界 时 也就是通常所说的 格林威治时间格林威治时间 标准的重要性标准的重要性 标准的重要性标准的重要性 秦始皇 秦始皇 12年 车同轨 书同文 统 一度量衡 标准与医学检验标准与医学检验 My God 这么多化验单 结果各不相同 这么多化验单 结果各不相同 该相信哪个 该相信哪个 校准的定义校准的定义 Calibration set of operations that establish under specified conditions the relationship between values of quantities indicated by a measuring instrument or measuring system or values represented by a material measure or a reference material and the corresponding values realized by standards International Organization for Standardization ISO 1993 International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology VIM 校准 校准 在规定条件下 为确定测量仪器或测量系统的示值 实物 量具或参考物质所代表的值与相对应由标准确定的量值之间关系 的一组操作 注 这里的 标准 是指 测量标准 而不是书面标准 测量标准测量标准 measurement standard 用以定义 实现 保 持或重现一个单位或一个或多个量值并作为参考的实物量具 测量仪器 参考物质或测量系统 校准的作用确立仪器信号和分析物浓度之间的关系 主要对 系统误差发挥作用 而对随机误差没有影响 校准品的定义校准品的定义 Calibrator Calibration Material reference material whose value is used for the independent variable in a calibration function ISO 17511 2003 In vitro diagnostic medical devices Measurement of quantities in biological samples Metrological traceability of values assigned to calibrators and control materials 校准品 或校准物质 指在校准函数中 用作独立变量值的参考物质 标准的重要性标准的重要性 检测系统检测系统 光路光路液路液路 电路电路 机械机械 校准品 试剂 操作者 校准品 试剂 操作者 操作程序操作程序 检测系统的定义检测系统的定义 检测系统 完成一个检验项目的测定所涉及的仪器 试 剂 校准品及操作程序的组合 称为检测系统 若有手 工操作步骤 还应包括具体的操作人员 从广义上讲 还包括配合 支持或保障其正常运行的消耗品 质量控 制程序 维护保养程序 样品前处理程序 检测用水及 其他辅助设备 用品或程序等 检测系统检测系统质控系统质控系统 辅助支持系统辅助支持系统 实验室质量实验室质量 ISO 5725 1 uses two terms trueness and precision to describe the accuracy of a measurement method 测量准确度 accuracy of measurement 测量结果与被测量真 值的一致程度 VIM 1993 3 5 注 测量准确度与测量正确度 和测量精密度两者有关 用不确定度表示不准确度 测量不确定度 uncertainty of measurement 表征合理赋予被 测量之值的分散性 与测量结果相联系的参数 测量正确度 trueness 也有译为测量真实度 有很大一个系列 的检测结果得到的平均值与约定真值 conventional true value 或 公认参考值 accepted reference value 之间的一致程度 与系统 误差有关 用偏差 bias 均值与真值之差 亦称 偏倚 表示不 正确度 测量精密度 precision of measurements 在规定条件下的独立 测量结果间的一致程度 用标准差和变异系数表示不精密度 ISO 3534 1 1993 3 14 首先要确定标准首先要确定标准 标准标准 首先要确定标准首先要确定标准 书面标准 written standard 是通过公议而建立 由 特定机构批准的文件 它提供以达到规定情况下的理想 秩序为目的 供经常和重复使用的关于活动或其结果 的规则 指南或特征 书面标准的例子有ISO标准 欧 洲标准 我国的国家和行业标准等 测量标准 measurement standard 是为了定义 实现 保存或复现量的单位或一个或多个量值 用作参考的实 物量具 测量仪器 参考物质或测量系统 测量标准 分一级测量标准 p rimary measurement standard 和 二级测量标准 secondary measurement standard 其次要确定如何向标准靠拢其次要确定如何向标准靠拢 标准标准X 计量可追溯性 metrological traceability 通过一条具有 规定不确定度的不间断的比较链 使测量结果或测量标准的值能 够与规定的参考标准 通常是与国家标准或国际标准联系起来的 特性 VIM 1993 6 10 校准溯源性的目的 将参考物质 和 或参考测量程序的正确度传 递至较低计量等级的测量程序 如常规测量程序 a CGPM 定义的 SI 相关概念相关概念1 SI International System of Units 由国际计量 大会 CGPM 采纳推荐的一种一贯单位制 SI是国际 单位制的国际通用符号 目前 国际单位制基于下列7个基本单位 长度 米 m 质量 千克 公斤 kg 时间 秒 s 电流 安 培 A 热力学温度 开 尔文 K 物质的量 摩 尔 mol 发光强度 坎 德拉 cd 相关概念相关概念2 一级参考测量程序 被证实分析上特异 可追溯至SI单位 无需 校准 具有很低的测量不确定度的测量程序 国际计量委员会 CIPM 在1994年成立了物质的量咨询委员会CCQM 临时确认以下的测量原理可能为一级参考测量程序 核素稀释 质谱 分析 ID MS 库仑法 重量法 滴定法 用于重量摩尔渗透浓度测 定的冰点降低测量等 一级参考测量程序一般由国际或国家计量机构或国际科学组织批 准 不应发展国家的一级参考测量程序 承当测量的实验室应当是 计量机构 或者是那些被公认的认可机构认可为该测量程序的校准 实验室的实验室 一级校准品是获得最小测量不确定度的测量单位的体现 一级校 准品的赋值应直接用一级参考测量程序 或用相应的分析方法确 定物质的不纯度间接确定 一级校准品通常为高纯度的 物理化学性质明确的分析物 经过稳 定性和组成完整性检验 并附有认证证书 有证参考物质 CRM 一级校准品的认证通常在具有最高计量学专长水平的实验室内进 行 如国际或国家计量机构 相关概念相关概念3 二级参考测量程序应由一个或多个一级校准品 校准的测量系统 应由国家计量机构 或经权威认可机构认可为该测 量程序的参考测量实验室建立二级参考测量程序 二级参考测量程序在测量原理上可以不同于一级参 考测量程序 二级校准品应由一个或多个二级参考测量程序 为之赋值 通常附有证书 二级校准品通常将测量单位从国家计量机构传递给 经认可的校准实验室和制造商的校准中心 二级校准品可以是具有基质的物质 使其相似于最 终用户常规测量程序所测量的人源样品 相关概念相关概念4 制造商选定测量程序应由一个或多个可用的一 级或二级校准品进行校准的测量系统 制造商选定测量程序可以是二级参考测量程序 制造商工作校准品应由一个或多个制造商选定 测量程序为之赋值 此校准品有时称为 制造商一级校准品 或内部校 准品 应证明该校准物质在制造商选定的测量程 序和被校准的测量程序间具有互换性 制造商工作校准品可以是具有基质的物质 使其相 似于最终用户常规测量程序所测量的人来源样品 相关概念相关概念5 制造商常设测量程序应由一个或多个制造商工作校准 品或较高类型校准品为之校准 并被确认分析特异的 测量系统 制造商常设测量程序可以和常规测量程序有相同的 原理和方法 若希望具有较低的测量不确定度 应 通过如大量重复测量和严格的控制系统来实现 制造商产品校准品应使用厂商常设测量程序为之赋 值 用于最终用户常规测量程序的校准 制造商产品校准物可以是具有基质的物质 使相似 于最终用户常规测量程序所测量的人来源样品 相关概念相关概念6 最终用户常规测量程序应由一个或多个制造商 的产品校准品进行校准确定的测量系统 常由 制造商提供 溯源链的理想终点是国际单位制 SI 对有关单位的 定义 步骤的选择和溯源性水平 取决于是否具有可用的较 高溯源等级的测量程序和校准品 很多项目目前的最高溯源性只是制造商选定的测量程序或制 造商的工作校准品 在国际认可的参考测量程序和 或校准品可用之前 正确度取 决于校准等级的溯源性水平 根据能否溯源至SI单位和是否具有不同计量水平的测量程序和校准品 存在以下5 种不同的溯源类型 A 测量结果能够溯源至SI 具有一级参考测量程序和一个或多个 经认证的 一 级参考物质 作为校准品 达到这样水平的有约25 30个项目 均为业已明确 的组分 如 一些电解质 代谢物 甾体激素 及一些甲状腺激素等 B 测量结果不能溯源至SI 1 有可用的国际约定参考测量程序 不能被称为一级参考测量程序 和一种或多种用此 参考测量程序定值的国际约定校准物质 属于这种情况的是HbA1C 糖化血红蛋白 这 样的组分 2 有可用的国际约定参考测量程序 但没有国际约定校准物质 属于这种情况的约有 30种象凝血因子这样的组分 3 有可用的国际约定校准物质 用作校准品 及其赋值方案 但是没有国际约定参考 测量程序 属于这种情况的约有300多个项目 象蛋白激素 某些抗体和肿瘤标志物等 即参照了世界卫生组织 WHO 的国际标准 4 既无参考测量程序 也无可用于校准的参考物质 制造商可用自建的测量程序和 工作 校准品为产品校准品定值 属于这种情况的约有300个项目 如肿瘤标志物和 抗体等 能够溯源至能够溯源至SI 不能溯源至不能溯源至SI 一 有国际约定参 考测量程序 非一级参考 测量程序 也有用此参考 测量程序定值 的国际约定校 准品 二 有国际约定 参考测量程 序 但无国 际约定校准 品 三 有国际约 定校准品 及其定值 方案 但 无国际约 定参考测 量程序 四 即无国际约 定参考测量 程序 也无 国际约定校 准品 有一级参考测 量程序和一级 参考校准品 有一级参考测 量程序和一级 参考校准品 无一级参考测 量程序和一级 参考校准品 无一级参考测 量程序和一级 参考校准品 具有国际约定参考测量程序 非一级 与国际约定 校准品 不能在计量上可追溯至 具有国际约定参考测量程序 非一级 与国际约定 校准品 不能在计量上可追溯至SI的情况的情况 具有国际约定参考测量程序 非一级 但无国际约 定校准品 不能在计量上可追溯至 具有国际约定参考测量程序 非一级 但无国际约 定校准品 不能在计量上可追溯至SI的情况的情况 具有国际约定校准品 非一级 但无国际约定参考 测量程序 不能在计量上可追源至 具有国际约定校准品 非一级 但无国际约定参考 测量程序 不能在计量上可追源至SI的情况的情况 具有制造商选定测量程序 但既无国际约定参考测量程序 也无国际约定校准品 不能在计量上可追溯至 具有制造商选定测量程序 但既无国际约定参考测量程序 也无国际约定校准品 不能在计量上可追溯至SI的情况的情况 测量相同量的不同测量程序 用于测量特定样品或参考物质时 事实上会得到不同的结果 例如 有两个以上的免疫程序可以测量某激素 如促甲状腺 素 TSH 用于测量激素的参考物质时 因为各个试剂对于 材料中激素的各个决定簇有不同的识别和反应 得到相关量 的不同结果 常规医学检验提供400到600种量的检测结果 其中多数项目的计 量溯源性终止于某个高一级 参考 测量程序的后1步 或某个测 量程序加上 参考 校准品的后2步 原因 这些量大多是多种不同分子类型的混合物 它们虽然 在医学相关的性质上相似 但结构和分子量不同且比例各异 如 糖化蛋白 厂家工作校准品的定值 2种定值流程 直接溯源至参考方法参考方法 直接溯源至参考物质参考物质 确定不少于5家实验室作为定值实验室 确定参考方法或参考物质 最高标准为国际公认的参考方法 如 同位素稀 释 质谱分析 ID MS 若无参考方法 可选择合适的国际或国家认可的 参考物质 如 CRM 470 若某项目既无参考方法 也无参考物质 由厂家 选择可能的一级标准物质的水溶液为参考 或以 选定的检测方法的程序为参考 一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法 统计设计 不少于5家实验室 均使用原配检测系统 每个实验室进行3 5次独立 实验 实验要求 厂家制备并向定值实验室提供 厂家一级参考品 相当于二级校准品 准备5 10个不同浓度的混合血清 每个个混合血清有约100个供体血清组 成 经离心 过滤后分装成小包装 70 保存 送交参考实验室检测进行定值 直接采用参考方法检测或采用经参考物质 校准后的可靠方法进行检测 为了避免未处理过人血清参考组样品的稳定性问题 厂家一级参考品 只可 当天使用 且参考值最多被认可6个月 用于方法学比对 实现准确度传递 每个参与定值的实验室使用的试剂盒的产品号必须一致 批号可任选 每次实验必须使用新鲜开瓶或复溶的待定值一级校准液重新进行校准 必须同时进行质量控制 做好整个实验工作的记录 一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法 图1 定值实验室以准备定值的工 作校准品的初步定值校准仪器 并对 厂家一级参考品 血清进行 检测 得到系列检测值 图中 红线为待定值的工作校准品的初 步定值与仪器校准过程中的响应 信号 Ctar为参考值血清在该检测系统上的检测结果 Signal为参考血清在该检测系统上得到的响应量 一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法 Ctar为参考值血清在该检测系统上的检测结果 Cref为参考血清的参考值 图2 每份 厂家一级参考品 血清的参考值 Cref 与在该系统上的检测值 Ctar 将各个血清的成对数据绘制在坐标纸上 参考值为x 检测值为y 对方法学比较数 据进行直线回归 检查截距与斜率 要求 截距近于0 此时 斜率反映了这些血清的 参考值与检测值间的比率 按照斜率调整 待定值的工作校准品的校准值 一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法 Ctar为参考值血清在该检测系统上的检测结果 Signal为参考血清在该检测系统上得到的响应量 图3 以调整后的待定值的 工作校准品的新的校准值 再次校准检测系统 重新 检测 厂家一级参考品 血 清 得到在该检测系统上 的检测值 Ctar 一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法 图4 再次以 厂家一级参考品 血清的参考值为x 检测值为 y 点于坐标纸上 进行直线回 归 若回归线的截距几乎为0 斜率近于1 说明调整后的新校 准值符合要求 若还需要调 整 则反复此实验直至符合要 求 Ctar为参考值血清在该检测系统上的检测结果 Cref为参考血清的参考值 一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法一 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考方法 每个定值实验室为临床化学项目提供3 5个通过上述 过程得到的定值 汇总全部定值实验室的数据 确定厂家工作校准品定的值 采用中位数确定该工作 校准品的定值 校准值确认 使用工作校准品的新校准值校准检测系 统 将参考物质 有证参考物质或厂家一级参考品 做为样品 进行检测 比较检测值与参考物质的参考 值 回收率在100 4 说明定值符合要求 二 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考物质二 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考物质 统计设计 不少于5家实验室 均使用原配检测系统 每个实验室进 行3 5次独立实验 实验要求 准备 新鲜人血清组 准备50例不同浓度的患者个体血清 分成5组实验 为避免未处理新鲜血清的不稳定 所有使用的血清只在当天使 用 用于方法学比对 实现正确度传递 每个实验室使用的试剂盒的产品号必须一致 但是 批号任选 每次实验必须使用新鲜开瓶或复溶的定值校准液重新进行校准 必须同时进行质量控制 做好整个实验工作的记录 二 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考物质二 厂家工作校准品定值程序 直接追溯至参考物质 每个实验室每次独立实验时 严格地在2个分析仪通道上成对实验 在使用相同批号试剂的条件下 一个通道以参考物质校准 另一个通道以 厂家的工作校准品的初步定值校准 然后对新鲜人血清组样品进行检测 以参考物质校准的样品检测结果为x 以厂家工作校准品的初步定值校准 的样品检测结果为y 绘制于坐标纸上 对数据进行方法学比较的直线回归统计 要求截距接近0 此时 斜率反 映了这些血清的参考值与系统检测值间的比率 根据斜率调整厂家工作校 准品的校准值 以调整后的厂家工作校准品的新校准值再次重复与参考物质校准的方法学 比较实验 直至符合要求 确定厂家工作校准品的定值 收集定值实验室的全部定值数据 采用中位数确 定厂家工作校准品的定值 校准值确认 使用工作校准品的新校准值校准检测系统 将参考物质 有证参 考物质或厂家一级参考品 做为样品 进行检测 比较检测值与参考物质的参 考值 回收率在100 4 说明定值符合要求 厂家工作校准品的定值程序厂家工作校准品的定值程序 参考实验室参考实验室 使用参考方 法对 使用参考方 法对 厂家一级参考血清厂家一级参考血清 定值 即参考值为定值 即参考值为A 厂家选定测量程序厂家选定测量程序 经经 工作 校准品 工作 校准品初始定值初始定值 调整后的定 值 调整后的定 值 校准后检测校准后检测 厂家一级参考 血清 厂家一级参考 血清 得到结果为得到结果为B 对对 参考系统参考系统 和和 厂家选定 测量程序 厂家选定 测量程序 进行方法学比 对 即对 进行方法学比 对 即对A和和B进行直线回 归分析 进行直线回 归分析 调整调整 工作校准品工作校准品 的定值的定值 确定确定 工作校准品工作校准品 的定值的定值 厂家选定测量程序厂家选定测量程序 经参考物质校 准后 即成为 经参考物质校 准后 即成为 参考系统参考系统 检测 检测 新鲜人血清组新鲜人血清组 得到的结果为得到的结果为A 厂家选定测量程序厂家选定测量程序 经经 工作 校准品 工作 校准品初始定值初始定值 调整后的定 值 调整后的定 值 校准后检测校准后检测 新鲜人血清 组 新鲜人血清 组 得到结果为得到结果为B 对对 参考系统参考系统 和和 厂家选定 测量程序 厂家选定 测量程序 进行方法学比 对 即对 进行方法学比 对 即对A和和B进行直线回 归分析 进行直线回 归分析 调整调整 工作校准品工作校准品 的定值的定值 确定确定 工作校准品工作校准品 的定值的定值 厂家工作校准品定值的溯源链厂家工作校准品定值的溯源链 参考方法参考方法 厂家一级 参考品 厂家一级 参考品 厂家选定测 量程序 厂家选定测 量程序 厂家工作 校准品 厂家工作 校准品 参考物质参考物质 厂家选定测 量程序 厂家选定测 量程序 厂家工作 校准品 厂家工作 校准品 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 新鲜人血清 厂家一级 参考品 传递正确度 新鲜人血清 厂家一级 参考品 传递正确度 产品校准品的定值程序产品校准品的定值程序 在各定值实验室为产品校准品进行定值时 要求在同一个检测系统 相 同仪器 试剂盒产品号 相同操作程序 上 在2个分析仪通道中成对进 行实验 一个通道以厂家工作校准品的定值进行校准 另一个通道以产 品校准品的初步定值进行校准 然后对系列患者样品进行检测 以厂家工作校准品校准的患者样品检测结果为x 以产品校准品的初步定 值校准的患者样品检测结果为y 绘制于坐标纸上 对数据进行方法学比 较的直线回归统计 要求截距接近0 此时 斜率反映了这些血清在检测 系统上两个校准品校准后检测值间的比率 根据斜率纠正产品校准品的 校准值 以纠正的产品校准品的新校准值 再次重复上述实验 直至符合要求 两种校准品对患者样品检测结果的直线回归在y轴上的截距近于0 斜 率在1 00 0 02规定的限值内 不少于5个实验室 对每个产品校准品的每个项目进行独立的5次以上检 测 汇总所有数据 最后采用中位数作为为产品校准品的定值 与 直接溯源至参考物质的一级校准品定值方法 基 本相同 只是用厂家工作校准品替换了参考物质 产品校准品的溯源链产品校准品的溯源链 参考方法参考方法 厂家一级 参考品 厂家一级 参考品 厂家选定测 量程序 厂家选定测 量程序 厂家工作 校准品 厂家工作 校准品 参考物质参考物质 厂家选定测 量程序 厂家选定测 量程序 厂家工作 校准品 厂家工作 校准品 厂家常设测 量程序 厂家常设测 量程序 产品校准 品 产品校准 品 厂家常设测 量程序 厂家常设测 量程序 产品校准 品 产品校准 品 新鲜人血清 厂家一级 参考品 传递正确度 新鲜人血清 厂家一级 参考品 传递正确度 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 校准品和校准都是为保证患者样本的检测质量与参考标准的可比 性服务的 准确度的传递只能通过患者样本在参考系统和实验系统的方法学 比较得到 校准值不是直接测定值 而是经多次方法学比较后的纠正值 具 有检测系统专用性 评价校准值可靠性的唯一要求是 被校准品校准后的检测系统 对病人样品检测的检验结果和某指定参考方法或经指定参考物质 校准的检测系统对病人样品的检验结果具有可比性 校准品具有溯源性和不确定度 其意思是 经该校准品校准的检 测系统检测新鲜血清的量值具有溯源性 其被赋予的较准值具有 不确定度 物质系统的基质 matrix of a material system 基质 matrix 除了分析物 以外的物质系统组分的总体 EN 12287 1999 3 3 基质效应 matrix effect 样品中除了被 测量外 对按照规定的测量程序对被测量 的测量 以及对被测量值的影响 本欧洲标准不适用于 a 没有赋值 仅用于评估测量程序的精密度 重复性或重现性的控制物质 精密度控制物质 不定值控制品 b 用于实验室内部质量控制 附有建议的可接受值区间的控制物质 每个区间由各实验室用某 特定测量程序测量协调一致形成每个区间和极值 不具计量溯源性 定值控制品 4 4 1 校准品 见3 7 应具有赋值 该赋值具有已知的测量不确定度 其目的应是校准某测量 系统 以建立此系统测量结果的计量可追溯性 各种参考物质的溯源性和不确定度各种参考物质的溯源性和不确定度 用于对下一级测量程序 进行校准 如厂家用于 对其选定的测量程序进 行校准 据此建立检测 系统的溯源体系 在 应用于常规检测程序 时 同样存在互换性问 题 理想的正确度评价工 具 由于基质效应导 致的互换性 Commutability 问 题 实践中很难实现 当前及可见将来 室 间比对仍是正确度评 价的最有效途径 厂 家工作校准品 确定仪器信号 和分析物浓度 水平之间的关 系 赋予检测 系统溯源性和 传递不确定度 监控精密度大 小和准确度改 变情况 质控 数据的CV值 构成项目结果 不确定度的最 终一环 用途用途 有有有无测量不确定度测量不确定度 有有无无量值溯源性量值溯源性 国际或国家级权威机构无商品化的产品供 应 仅限于仪器 试剂 厂家内部使用 仪器 试剂厂 家 质控品厂家供应供应 有证参考物质 一级 二级校准品 有证参考物质 一级 二级校准品 正确度控制品正确度控制品校准品校准品常规质控品常规质控品 Truthful Guidance about Trueness Uncertainty and Quality James O Westgard PhD Unfortunately these new terms and the related concepts fall short of providing a proper definition and characterization of the quality of a laboratory test for healthcare applications ISO has force fit the terms and concepts from metrology laboratories without sufficient consideration for certain unique characteristics of healthcare laboratories such as the following 不幸的是 这些新的名词 正确度 不确定度 及相关的概念不够清晰 也未充分考虑医学实 验室检验质量的特点 ISO在推广这些源自计量实验室的名词和概念的同时 未能充分理解 医学实验室的如下特点 The practice of making only a single measurement on a clinical specimen for healthcare applications rather than the common practice of making replicate measurements in metrology laboratories 医学实验室仅对临床样本进行单次检测 而不像计量实验室通常进行多次重复检测 The low level of quality control performed in healthcare laboratories which often does not provide sufficient detection of medically important errors 医学实验室开展质量控制的水平还很低 常常不能提供足够的检出医学意义误差的能力 The expected variability due to the specimen itself particularly the intra individual biologic variation of human subjects 很多预期的波动来自样本本身 尤其是个体内的生物学变异 The existence of error models that have been developed and tailored to fit these characteristics of healthcare laboratories 现有的误差模式 更符合医学实验室的上述特点 Is GUM injurious Or just superfluous James O Westgard PhD GUM does not provide a new useful tool for characterizing and understanding the performance of analytical methods in clinical biochemistry On the contrary GUM considers different types of errors precision and accuracy as if they were the same GUM未能为体现和理解临床生化分析方法的性能提供一种全新而有用的工具 与此相反 GUM未区别对待不同类型的误差 精密度和准确度 With the use of GUM we lose a differentiated and operational tool that made bias and imprecision distinguishable so that error detection was easy and the influence of the two types of error was clear GUM的应用 只会让我们丧失现有的有效工具 这些工具能帮助我们有效区分偏倚和不精 密度 且能轻松检出误差和清晰体现两种不同类型误差的影响 GUM has introduced a series of unanswered questions mainly by describing an unknown not measured bias as uncertainty GUM将一种未知的 而不是测量得到的 偏倚描述为不确定度 这已经引发了一系列未能 解答的问题 GUM causes errors in the clinical use and interpretation of laboratory tests The unknown bias which is introduced with each batch of a kit is by GUM interpreted as a standard deviation or a coefficient of variation The effect of the error on clinical outcome is thus underestimated which may be dangerous for the clinical interpretation of laboratory data GUM在应用于临床实验室和解释实验室检测结果当中 引发了很多问题 由于不同批次的 试剂引进的未知偏倚 在GUM中解释为标准差或变异系数 这将低估误差对临床决策的影 响 而这对于实验室数据的临床解释可能很危险 In summary GUM is not just superfluous GUM is dangerous because the interpretation of data according to GUM may distort the biochemical result and thus the clinical outcome 总之 若根据GUM来解释数据 将可能扭曲生化检测的结果及其临床决策 因此GUM不但 多余 而且有害 GUM Guide to the expression of uncertainty in measurement ISO Geneva 1993 临床检验的常规检验结果是否必须引入不确定度 冯仁丰 1 不确定度的概念很重要 它在计量参考实验室中必须贯彻实施 对于促进全世界计量科学进步有着显著意义 2 国内正在积极筹建一些临床参考实验室 对于他们 应该进行不 确定度的概念学习和实践 使他们在未来出示结果时体现质量价值 3 对于诊断产品的厂商 他们提供的校准品除了具有校准定值外 也必须具有该值的不确定度 4 由于临床实验室的特点和严重缺陷 无法在病人检验报告中使用 不确定度 加强实验室的质量管理 有着许多内容需要我们去努力 完全不必让广大检验人员忙于仅从高深的理论上去理解这些复杂而目 前实际上根本不可能实行的概念 认真 踏实地做好每天的工作才是 最重要的 原配原配 组装检测系统组装检测系统 原配检测系统 构成检测系统的仪器 试剂及校准品 均由同一厂商或仪器的指定厂商提供并配套使用 且 严格按照说明书上的操作程序进行操作 组装检测系统 即自建检测系统 实验室自行选择仪 器 试剂或校准品 或自行设定操作程序 由此构成 的检测系统称为自建检测系统 需要注意 若配套检 测系统中的任一要素 仪器 试剂 校准品 操作程 序 发生了变动 即不再是原厂配套的厂品或规定的 操作程序 此检测系统将不再是配套检测系统 而成 为自建检测系统 原配和自建检测系统在应用中的区别原配和自建检测系统在应用中的区别 原配检测系统 使用原配的仪器 试剂 校准品和操作程序 配套校准品具有溯源性和不确定度 使用与检测系统配套的校准值 按照既有的SOP规定的流程进 行操作 需进行方法学性能和正常参考范围的验证 自建检测系统 需选择或确定仪器 试剂 校准品和操作程序 需制定和自建系统匹配的校准值 并溯源至某参考系统 需建立校准和检测程序的SOP 需进行方法学性能和正常参考范围的评估 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 确定目标仪器 确定可匹配的试剂 选择可用于目标仪器 实验证明性能良好 精密度 可检测范围等 且批间变异小 可稳定供应的试剂 盒 确定检测程序 试剂盒提供的操作程序 或经实验室调整 修改的 程序 确定可比性目标 最好选择某个具有溯源性 且准确度 含正确 度和精密度 已得到确认的检测系统作为可比性追踪的目标 该 参照系统还应该具有比对可行性 即可以方便进行比对 建议 自建检测系统的校准以原检测系统为可比性目标 若实验室具有 日立系列的仪器 就以罗氏系统为目标 具有Beckman仪器的 就 以Beckman原系统为目标 若实验室使用的仪器本来就没有原配检 测系统 可以就近选择某个正常使用的国际知名的原配检测系统 作为比对目标 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 参考物质参考物质 厂家选定测 量程序 厂家选定测 量程序 厂家工作 校准品 厂家工作 校准品 厂家常设测 量程序 厂家常设测 量程序 产品校准 品 产品校准 品 原配校准品原配校准品 原配检测系统原配检测系统 临时校准品临时校准品 自建检测系统自建检测系统 自建校准品自建校准品 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 厂家产品校准品的溯源链自建校准品的溯源链 新鲜人血清 新鲜人 血清组 传递正确度 厂家产品校准品的溯源链自建校准品的溯源链 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 确定以罗氏系统作为可比性追踪的目标 准备充分的罗氏试剂盒 校准品 准备充分的自建检测系统的试剂盒 试剂盒和校准品 都应该是同一个批号 对日立仪器进行一次完整的保养 确认仪器处于良好 状态 确保其他辅助设备或用品的供应和质量 所有实验过程都必须有分析过程的质量控制 确认同 批实验的质量控制结果在控的前提下 方可接受实验 数据 日立仪器上的自建检测系统的校准日立仪器上的自建检测系统的校准 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 校准前的方法学评估 按照试剂盒提供的校准因子进行校准 评估精密度 可检测范围 若不符合要求 需解决相应问题后再继续校准工作 日立仪器上的自建检测系统的校准日立仪器上的自建检测系统的校准 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 自建系统和对照系统的方法学比较 20份患者的新鲜标本 它们内含的分析物浓度分布于实验方法的整 个可报告范围 且不含已知的对自建系统和对照系统的干扰物 标 本量要足够 实验可安排在3 5天进行 每天检测5 7份标本 自建系统和对照系统的检测时间相差应该在1 2小时以内 最长不得 超过4小时 2套系统均进行规范的室内质控 若所有标本的方法学间比较结果应呈良好的直线线性关系 说明方 法学比较实验有效 否则需排查并解决问题后再继续实验 若方法学比较表明截距和斜率都很大 则需分析并解决问题后再继 续实验 若截距和斜率都很小 则两种方法学之间的可比性很高 若截距小 斜率较大 则说明自建系统存在系统误差 日立仪器上的自建检测系统的校准日立仪器上的自建检测系统的校准 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 选择一份该分析物含量适中的血清样品 用罗氏原配检测系统对该血清样品进行多次 不少于3次 检测 取均值 在自建系统上 以上述血清为临时校准品 用罗氏原配系统检测 得到的均值为校准值 对自建检测系统进行校准 再对一批病人血清 内含分析物量分布于整个检测范围 进行经 血清校准后的自建检测系统和罗氏原配检测系统的方法学比较实 验 将对比数据绘制于坐标纸 证实有无良好直线趋势 并进行 直线回归统计 若回归统计的斜率和截距均有明显改善 计算每个患者样品两个 系统结果间的差异 观察所有样品结果差异分布上的趋势和个别 样品差异明显的情况 若能保持所有样品结果差异在CLIA 88允 许误差的1 4内 临时校准品的校准成功 日立仪器上的自建检测系统的校准日立仪器上的自建检测系统的校准 自建系统使用初始 值校准后检测各患者样本得到的量值 在自建系统上各个血清的检测信号 临时校准品定值步骤1 使用临时校准品的初始值校准并检测各患者样本临时校准品定值步骤1 使用临时校准品的初始值校准并检测各患者样本 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 各患者样本在对照检测系统上检测得到的量值 自建系统使用初始 值校准后检测各患者样本得到的量值 临时校准品定值步骤2 根据方法学比较调整校准品定值临时校准品定值步骤2 根据方法学比较调整校准品定值 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 自建检测系统依据调整后的 值检测各血清得到的浓度 在自建系统上各个血清的检测信号 临时校准品定值步骤3 调整临时校准品的校准值 再校准自建系统 再检测患者样本 临时校准品定值步骤3 调整临时校准品的校准值 再校准自建系统 再检测患者样本 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 各血清在对照系统上检测的量值各血清在对照系统上检测的量值 依据最终临时校准品的 定值检测各血清得到的浓度 临时校准品定值步骤4 临时校准品定值步骤4 再次进行方法学比对即再次进行方法学比对即定值验证定值验证 自建检测系统及其校准自建检测系统及其校准 足量购买一批效期长 开瓶稳定性好 瓶间差小 基质效应小的常规控 制品 在经过临时校准品最终校准值校准后的自建检测系统上检测该控制品 多次检测 至少3次以上 取平均值 在保持原自建检测系统的仪器 试剂盒和操作程序不变 以该控制品的 检测均值为 校准值 使用该控制品校准自建检测系统 然后 再对 一批病人血清 内含分析物量分布于整个可报告的范围 进行的自建系 统和罗氏原配系统的方法学比较实验 将对比数据绘制于坐标纸 证实有无良好直线趋势 并进行直线回归统 计 如此反复实验 直至实现所有标本在2个系统上的结果差异均在 CLIA 88允许误差的1 4内 说明 自建稳定校准品 对 自建检测系统 校准成功 自建检测系统的检测的患者样本结果可溯源至对照系统的结 果 从而间接溯源至参考系统 建立建立 自建检测系统自建检测系统 的稳定校准品的稳定校准品 检测系统 方法学的分析性能验证或评价 验证 适用于原配检测系统 通过实验确认某个原 配检测系统的精密度 正确度 可报告范围及灵敏 度是否符合厂商标示的性能参数 从而判断该检测 系统是否可用于检测临床样本和发放检测报告 评价 主要对自建检测系统而言 为了证实某个自 建检测系统是否符合临床上对分析性能的要求 必 须对该检测系统进行全面的实验评估 得到精密度 正确度 可报告范围及灵敏度等具体数据 用数据 证明新组合系统是否可靠 从而判断该检测系统能 否用于临床检测 EP6 A Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures A Statistical Approach Approved Guideline EP9 A2 Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples Approved Guideline Second Edition EP10 A2 Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Methods Approved Guideline Second Edition C28 A2 How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory Approved Guideline Second Edition EP5 A2 Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods Approved Guideline Second Edition EP15 A User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy Approved Guideline EP17 A Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation Approved Guideline 制定自建检测系统的SOP文件制定自建检测系统的SOP文件 校准SOP 规定校准 校准确认的周期及特殊情况下的校准 如出现故障维修后 校准确认失败情况 规定校准方 本实验室校准 厂方校准 计量 检 定单位校准等 规定所使用校准品 应使用和检测系统严格配套的 校准品 校准方法 验收标准 不论何方校准 必须有完整校准记录 含校准后的 各种数据 检测SOP 检测系统的完整性和有效性检测系统的完整性和有效性 完整性 组成检测系统的各要素是完整的 即仪器 试剂 校准 品 检测程序缺一不可 全部配套 原配检测系统 相互匹配 自建检测系统 通过物质保障实现检测系统的完整性 有效性 由该检测系统测量得到的检测结果是准确的 可靠的 且与确认准确 可靠的检测系统的结果具有可比性 准确 可靠 可比 方法学验证 方法学评估 室内质控 室间质评 方法学比对 通过质量管理实现检测系统的有效性 偏倚 偏倚应当在达到规定质量要求 总误差 TE 的前提下进行评 估 在很多