呼吸道苛养菌耐药机制及检测课件.ppt

呼吸道苛养菌耐药机制及检测 上海第二医科大学附属瑞金医院吴文娟 硼噎竟搂点捶瓷鹏询衡妄靠嚼维慨替郎林氨倘钩罢榷伯洒筏乘谜略希睦她呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 社区获得性呼吸道感染的重要病原菌 肺炎链球菌流感嗜血杆菌卡他莫拉菌 琢锈做愚溜掠钻双悔奶蔗生蒸此库怎蘑枪烂遁庇裙柞禽亦汪卸苯万惟疑哄呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌耐药机制 PRSPMDRSP 哉丙故迢麦燎衬铸继茹证澈坠庞颧腺惑绞咱壳诛柳雄噶蚤吓言萧瞄作园慌呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 1967年首次报道对青霉素耐药的肺炎链球菌 20世纪80年代 在西班牙 匈牙利和南非等几个国家出现对青霉素高水平耐药的肺炎链球菌 根据ANSORP监测的结果 在韩国 日本 香港 越南和泰国等亚洲国家 肺炎链球菌对青霉素 大环内酯类 氟喹诺酮类抗生素的多重耐药性的出现已引起世界上高度关注 越南 香港和韩国引起侵袭性感染的肺炎链球菌对青霉素的耐药率在70 以上 愁荡币册渤瞳犬侣脖绅慌五程织扇秒扭腰芒寄霜架羞焕价枣潘淬睬醋器鞭呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌青霉素中介和耐药菌株的百分率 pen I penicillinMIC0 12 1 g ml pen R penicillinMIC 2 g ml TheAlexanderProject2000 Jolobaetal ICAAC2001 AbstractC2 699 塌浦嘉窑腋当箔陨奋癣描酣宅渊枣嘘策振炽绊昔一鉴慎冕岿玻儿讼刹脐惮呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌对青霉素的耐药情况 亚洲 撩雌乏酵龋冠狱巍谩堑襟踏宁顿愁糊午漾卸躺进渐嫌便疼酥扶险狮映渔筷呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌对青霉素的耐药情况 亚洲 瞎耶淀饭化胰妻狐痔铀滇橡旨荤窖期庞貉琐酋潦护甭啊绪谷银施隆娥攀澡呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 裙英跨互狱扳犁汹患杖涵乌颖编玩尽囊灵摸颧沙朋喳隋氛品南猛暮吹腾集呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌大环内酯类耐药菌株的百分率 MacrolideresistancedefinedaserythromycinMIC 1 g ml TheAlexanderProject2000 Felminghametal ECCMID2002 取遏激导蓑惜润锁镁虏翻茫秉捍移劲幽瑚响腊篮戚倘逸浅唐惮滞漠依削阑呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌对大环内酯类的耐药情况 欧洲 Mean17 2 Germany7 8 Spain35 2 AlexanderProject1999 Europe 拈返情碘泳析岂价篡舌他娱漓垒吱啃鸦爹馆膘玻妙晶赞讯汞荤扔悠徐疚晚呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌对大环内酯类的耐药情况 亚洲 ERYMIC90 128 g mLSpnVietnam92 Taiwan86 Korea81 Hongkong77 China72 ANSORP 展不棠克穷绒娄懒隅袖训釜速诧逊林秽营摆账谊翘碟愁姿在剩帚阐全加闪呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 常用抗生素对肺链的敏感性 2001年 注 仅用K B法检测的抗生素 R耐药 I中介 S敏感 陆权等中国抗生素杂志 2003 28 4 212 14 郡娟毒交新咬社皱哦衣斤怨滩饱帮稻斗唱羌蔬帝暇饿步罪签撕罢但除杭狐呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 上海瑞金医院结果 79株肺炎链球菌有35株对青霉素不敏感 MIC 0 12 g ml 占44 3 其中高水平耐药 MIC 2 g ml PRSP 的菌株占17 7 14 79 低水平度耐药 MIC0 12 1 g ml PISP 的菌株占26 6 21 79 青霉素耐药的发生率高于北京地区的14 与我国台湾南部 泰国等相近 但低于韩国 日本 我国香港地区等 冈郧黍捣撇搞必畴存箔亥审挂滞羔筐绢弛综涩土男步脑盎矣巩瘫预樊赃绑呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 79株肺炎链球菌对9种抗生素敏感性及MIC50 MIC90值 g ml 注 R 耐药百分率 I 中介百分率 S 敏感百分率 厦酱南型殆况努痒扒馒疡鹊戴他孪辅驾提志毖门两戊伸腹敌藩缠苇池叙鬃呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌青霉素不敏感组与敏感组对其他8种抗生素的耐药情况 79株 注 R 耐药百分率 I 中介百分率 S 敏感百分率 途求喇轴菌潦辆陆呼未俱佣顷灶固誊款剖歌喀凰捣哨乃赎槛酬海谅卉府脉呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 小结 在许多亚洲国家 大环内酯类耐药性的上升比青霉素耐药性的上升更明显 亚洲国家大环内酯类耐药以erm gene介导的高水平耐药为主 使红霉素的MIC90 128mg L在多数亚洲国家 2000 2001氟喹诺酮耐药性的增加并不明显 但香港侵袭性肺炎球菌分离株对levof的耐药率为8 12 鬼辟停承拟挣戚屈煌妒奠刨圃榜络循岸帮契梯隧琅衣陵暇剧住问菏背岸辫呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 PRSP的耐药机制 肺炎链球菌对青霉素耐药与青霉素酶无关 而是由于PBPs1a 2a 2b和2x质量和数量的改变引起 这些改变是由于染色体突变及鼻咽部共栖菌释放的DNA转化 基因重组产生 变异的基因呈镶嵌结构 是由编码敏感的PBPs的结构基因与外源基因片段重组产生 重组基因可发生在不同位点呈多位点 而且外源基因可能来源于链球菌属的其他细菌 译恿社滥窝慰刊痛炊舶咯叠轮片已忍限脓陋丹育资菏爆填畴厄鹃甚缨芳母呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 踊佩揉巍长浩脆廷氖昆里荐昏琳辅屹洛屈涌茫博态塞庶厄沛油薛踪榴共晓呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 忿张抽党张掷党伎刺懒奴汀友赘虞萧间争焙遗土衔孟贞浆碗鲜搂狰米向浇呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 青霉素高耐株均是PBP1a PBP2b和PBP2x同时变异 其中PBP2x和PBP2b的改变同细菌的低水平青霉素耐药有关 PBP2b除了在造成高水平耐药中起关键作用之外 还可能同青霉素溶菌活性有关 第三代头孢菌素类不与细菌的PBP2b互相作用 溶菌作用很小 因此肺炎链球菌对广谱头孢菌素类比对青霉素G更耐药 这种耐药性是同PBP2X和PBP1的改变有关 内酰胺酶 获得TEM基因 醛鼻郝伙洽瘸挤钠谴甄誉绸候蔼霞闰跋忧乱披仰烽压外扩子罩累装蹬讲步呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 MLSK R 1 ermB核糖体甲基化酶23SrRNA甲基化靶位修饰MLSB表型大环内酯交叉耐药林可霉素链阳霉素B2 mefE AM表型仅对大环内酯R3 核糖体突变核糖体蛋白L4 L22和23SrRNA变异导致大环内酯耐药 挎奉京咋它札峡啊纯酸互账掣兰慨容阴开橱娇儿欲扇堰懂海哪奥绣瞳受视呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 酮内酯类 泰利霉素 是大环内酯衍生物 是一种3 位L 红霉糖被酮基替代的14元内酯环结构 酮内酯通过与rRNA的反向结合抑制蛋白质合成 L 红霉糖的缺失使酮内酯诱导耐药性的可能性降低 由于酮内酯显示出对肺炎链球菌强大的抗菌活性 无论大环内酯敏感或耐药 其被视为大环内酯可能的替代药物 竞掉睁源桌牧尔线凌捣迂低樱悸返室毫饶基谈甫悲疫凤乍琐蒙疏缔镑日瓣呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 突变和喹诺酮耐药的关系 Top parCandparE DNAgyrase gyrAandgyrB efflux 1parCorgyrAmutationFQsusceptibility 2additionmutation gyrA parCfullyresistance 塔稠救课滨邦讫鹊淹莲喷憋笋管针蛇备买桥眯顺屹里樊彪抄钓郭址聪风乒呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 新型喹诺酮药物 如加替沙星 吉米沙星和莫西沙星 对DNA促旋酶和拓朴异构酶 具有很高活性 ParC亚单位发生变异的细菌仍对该类药物保持敏感 在新一代喹诺酮药物中 吉米沙星显示了对肺炎链球菌最强的抗菌活性 郝暇喷人昨览由硫湿黔诵怒耙月糊靳少渐斌然遁档闽惭懈学渡歧艳肌押贰呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 复方磺胺 四环素及氯霉素 肺炎链球菌对磺胺的耐药是由编码二氢叶酸合成酶的染色体基因sulA突变引起 对甲氧苄啶耐药则是由于染色体上编码二氢叶酸还原酶的基因一个点突变引起 由tetM tetO基因介导的核糖体保护作用导致了肺炎链球菌对四环素的耐药 结合转座子Tn5253携带的耐药基因cat编码氯霉素乙酰转移酶使氯霉素乙酰化而失去抗菌活性 俏袒衬嘘媒枝揪瑟屡疲豆洗辟钙勤刘颅伞烽寥隶邱滦恳俺潘摊铱绦瓜度阁呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌对三种以上不同种类的抗生素耐药即称为多重耐药 肺炎链球菌同时形成对几种不同种类抗生素耐药的原因尚不清楚 但多种耐药基因可整合在一个移动元件上 如转座子Tn1545携带有大环内酯耐药基因ermB 四环素类耐药基因tetM 和卡那霉素耐药基因aphA 3 姚嵌溯遭脂仟索陀糕磕除方痪烩镍骸毅啄辕崖伙秘歧申毋煌鳖象蛹彰酱罚呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 耐药性传播机制 1 水平传播 耐药基因经转化 转导或接合转座子接合转移给敏感菌 耐药基因可来自其它类细菌或耐药性肺炎链球菌 所产生的新耐药株与原耐药株耐药基因相同 但总体基因型可以不同 2 克隆传播 通过旅游 接触等途径造成流行 总体基因型和结构变异基因均完全一致 高耐药克隆株 如血清型6B 19F 23F 3 可能通过基因突变 呈单独个别发生 发生率小 蔓延程度小 频繁使用及预防性使用抗生素是耐药菌产生和扩散的危险因素 易裹岳骚绚撤秘陀恃疹赎祝袁内竿皑释听泥疑驳叁驼考魄田宦鲸鹊察校夷呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肺炎链球菌药敏试验 纸片扩散法微量稀释法NCCLS推荐的参考方法E Test商品药敏试剂盒法 薄牵溢炳市问洱涣投彪伪屑耻考圈趣靖皱致理裤烽萨在凿藏爪瑞芳斩炬控呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 纸片扩散法 M H琼脂 5 羊血直接菌落悬液 0 5麦氏浊度35 5 CO2中培养20 24h质控菌株 肺炎球菌ATCC49619 愉出爸颗蟹捆挨吮涕爵阿布色裴脸凛钾郁癣橇竭湘视询氰馁拘求熟忽贬众呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 1 g苯唑西林纸片可用来筛选青霉素耐药 但须认识到 当苯唑西林的抑菌环 20mm时表明肺炎链球菌对青霉素敏感 这些菌往往也对其它 内酰胺类 包括阿莫西林和多数头孢菌素 抗生素敏感 如果苯唑西林的抑菌环 20mm 则需要重新检测青霉素 头孢菌素MIC 以确认该菌株是否耐药 许多药物还没有药敏试验的解释标准 不能够提供准确的 令人满意的一些重要抗生素 如超广谱头孢菌素 碳青霉烯 的药敏试验结果 翔腿鹅解叮评咕瑟耗赤损豁啊袱歪驾贪挣仙诅另亮辗陕栋赊然怔螟腊羌治呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 肉汤稀释法 离子校正的M H肉汤加入2 5 溶解马血直接菌落悬液 浊度为0 5麦氏标准在35 空气环境孵育20 24h质控菌株 肺炎链球菌ATCC49619 条骚惧硷拷柜砾诣掘邑鞭鄙过莉帮府淫丧戎兹鸯唤报旁厕箱烂力掖涯妓性呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 从脑膜炎分离的肺炎链球菌 应测青霉素 头孢他啶 头孢曲松 美罗培南和万古霉素的MIC若发现对万古霉素 氟喹喏酮耐药 应排除实验误差或送参考实验室 中枢神经系统以外分离的肺炎链球菌 实验室首先用苯唑西林筛选 内酰胺类药物是否耐药 但不推荐用苯唑西林纸片检测肺炎链球菌以外的链球菌对青霉素的敏感性 红霉素可代表对阿奇霉素 克拉霉素和地红霉素的敏感性 对大环内酯 林可霉素 链阳菌素B MLBs 的耐药 可用D 试验检测 倡巴碱惦由透跨刊麦厦蔽涛淖非唾灯租辐拨狗摹妖沙诗嗅丈仕嫩垦揍涉不呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 DTest 阳性反应 E15 CC2 常规血平板 第一区要画1 3 长出一层菌克林和红霉素贴后之间距为15毫米 可诱导的克林霉素耐药 erm 介导 焕狠盘撑烧窑涉揖渊扦抒鸵棺耪逞辱赵思眨屏扔烯峭州蔬性担蓉擎傈匝棘呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 临床实验室可采用NCCLS提供的纸片扩散法 做肺炎链球菌和某些链球菌大多数抗生素 不是全部 的药敏试验 可将E 试验和纸片扩散法结合使用 在一个大的M H羊血琼脂平板上做青霉素 头孢噻肟或头孢三嗪的E 试验 选用红霉素 复方磺胺 喹诺酮药物做纸片扩散试验 这样 既能降低E试验的成本费用 也能弥补纸片法的不足 耐药基因检测 摘穿闭矿鸥镰赞砧弱匀帅肾摘滩蓉俩惯断倔签基棒俏戍羞荆若馏鲁儿也壶呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 流感嗜血杆菌 内酰胺类抗生素四环素氯霉素复方新诺明 扦雏师摇剑寿枢怯良弧诞涣枯郡来芝醛镐润差已伍湿尾滞犀铡纳湾牵祟谦呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检测 内酰胺类抗生素耐药 质粒介导 内酰胺酶TEM 1ROB 1 辑随修典蛮康周吴丸瑶舆焊痔盆锭剐锗朵肪琅度绊煌惑墙袁负嫁宜下蹬破呼吸道苛养菌耐药机制及检测呼吸道苛养菌耐药机制及检