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文档简介

-谷氨酰转移酶(-GT)测定SOP1. 原理:L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺和双苷肽在-谷氨酰转移酶催化作用下,生成-谷氨酰双苷肽和5-氨基-2-硝基苯甲酸盐,其中5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的生成会引起405nm处吸光度的上升。 在一定底物浓度范围内, -谷氨酰转移酶的催化产物5-氨基-2-硝基苯甲酸盐会引起405nm处吸光度的上升,同时其上升速率与血清中-谷氨酰转移酶活力成正比。反应式如下:-谷氨酰转移酶L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 + 双苷肽-谷氨酰双苷肽 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐2. 方法:L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺法3. 试剂:上海科华生物工程股份有限公司的-谷氨酰转移酶试剂盒。4. 注意:1.此试剂为体外诊断用。2.不要入口,吞下有害。3.如试剂空白吸光度值大于0.7或变混浊,请勿使用。5. 储存条件及有效期:(1)当保存于28,不开盖情况下至标签的失效期。(2)开盖后放于仪器中可以稳定30天。(3)变质指示:当试剂有浊度时,不能继续使用。6. 样本要求: (1)病人准备:无特殊要求。(2)类型:血清、EDTA血浆,避免溶血。(3)标本稳定性:标本在2-8保存-谷氨酰转移酶活力可稳定7天。7. 检验步骤:(1) 开生化仪见贝克曼680生化分析仪的SOP。(2) 操作步骤:参数设置 ;试剂装载;校准;质控;样本装载;测定;结果审查;报告。a. 参数设置:-GT测定参数通道号6加样体积16R1体积160R2体积40主波长410次波长520方法RATE初始测量点15末始测量点25b. 试剂装载:每天在生化仪上进行试剂检查,检测的样本数,如发现量不多或不能满足当天需要,则需要加试剂,注意同一批号,不同批号的不能混用。c. 校准:换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。d. 质控:在做样本之前每天做质控,质控符合要求才可以做样本,不符合要求需要做校准,做完校准后,用校准品当样本来测,做质控。至少两个浓度水平的质控品。e. 样本装载:样本符合要求,放在试管架上,编号,上机检测。f. 测定g. 结果审查 h. 报告8. 参考值: 血清和血浆:429011550U/L(37)。9. 临床意义:-GT升高常见于原发性或转移性肝癌、急性肝炎、慢性肝炎活动期肝硬化、急性胰腺炎及心力衰竭等。10. 产品性能指标:(1)精密度(重复性):批内变异系数4%;批间相对极差 6%。 (2)准确度:相对偏差10。(3)试剂空白:在波长405nm处,试剂空白吸光度应0.80A(光径1.0cm)。(4)试剂空白吸光值变化:A/5分钟0.010A。(5)线性范围:要求试剂盒在样本浓度0450U/L范围内,整个反应仍呈线性,r20.995。(6)最低检测限:最低检测浓度至少应达到2U/L。11. 注意事项:-谷氨酰转移酶试剂盒的线性范围是0450U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。超范围的标本可以用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。贝克曼680可以应用自动重做功能自

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