组织及动物整体水平转基因获得的转基因动物.ppt

精品PPT课件浏览免费下载后可以编辑修改 医学精品课件 最权威的课件资料 免费在线阅读分享 下载后可以编辑修改 Basicstrategyofgenefunctionanalysis Section1 transgenicmodel 组织及动物整体水平转基因获得的转基因动物TransgenicmodelsobtainedonTissueandwholeanimal细胞水平转基因获得的基因转染细胞模型Transgeniccellmodelsobtainedoncellularlevel 1 transgenicanimals Transgenictechnology Exogenousgeneisintroducedintofertilizedeggcellorembryonicstemcellandrecombinedrandomlyonchromosome resultinginthatexogenousgeneisinsertedintogenomeofrecipientcellandpassontothenextgeneration Transgenicanimal exogenousgeneisintroducedandintegratedintogenomebymanipulativemethodsandobtaintheanimalharboredthegene feature tooperateonmolecularorcellularlevel toexpressontissueorwholeanimallevel Basicprocesspreparingtransgenicanimal Thevectorscarryingthedesiredgeneareinductedintothefertilizedeggsorembryoniccellswithmicroinjectionorothermethods Thefertilizedeggorembryoniccellofcontainingadesiredgeneisimbeddedintooviducttodeveloptransgenicanimal Therelationbetweenthegeneandthephenotypeofanimalisanalyzedtounderstandthefunctionofthedesiredgene Thetechniqueofgeneintroduction physic chemicalandbiologicmethods 1 microinjection2 embryonicstemcells ES 3 retroviralinfection4 Spermatozoabearer microinjection Separatingandcultureofembryonicstemcell Blastodermicvesicle SeparatingEndotheciumcell Cellculture Embryonicstemcell basicprocesspreparingtransgenicanimal Applicationoftransgenicanimal 研究基因表达的组织或阶段特异性通过研究转入外源基因后的新表型 可以发现基因的新功能外源基因的随机插入 可能导致某内源基因突变 分析这些突变表型 可发现新基因用于只在胚胎期才表达的基因的结构和功能的研究建立研究外源基因表达 调控的动物模型研究遗传性疾病建立人类疾病的动物模型 为人类的基因治疗提供依据动物新品种的培育基因产品的制备用于对免疫机制 免疫相关疾病的研究及建立免疫性疾病动物模型 2 cellmodelsofgenetransfection tocloneadesiredgeneintoeukaryoticexpressionvector totransfectcell toobtainthecellmodelsofgeneover expression basicprocess SeparationandpurificationofdesiredgeneToclonethegenetoexpressivevectorTotransfecttherecombinantvectorintocell Separationandpurificationofdesiredgene Toclonethegenetoexpressivevector Transfectionoftherecombinantvectorintocell Section2 Geneknock out toalteraspecificgenebyfixed sitehomologousrecombinationandresearchthegenefunctioninvivo geneknockout fixed sitespecificgeneknockoutgeneknockin fixed sitesubstitutionofadesiredgeneforaspecificgeneingenome 1 essentialconditionofgenetargeting Embryonicstemcell ES Feature ESgotfromthefourthandfifthdayfromfertilizedeggtoBlastodermicvesicle 1 Cultureinvitro remainingtotipotencyofdevelopment 2 Themorphologyofadhesivegrowthcellinvitro bignucleus lesskytoplasm densealignment settlementgrowth 3 Whenpoordifferentiationcondition manyFunctionalgenesarenon expressionandcellproliferatedanddifferentiatedgenesareexpression Whencultureinvitro ESpossessespropensitytodifferentiatetovarioustissue Targetingvectorcontainingtwoscreeningmark 1 neopositivescreeningmark neogeneislinkedbetweentwohomogeneousarmofexogenousgene Ashomogeneousrecombination neogeneisinsertedintochromosomeandthecellscangrowinthemediumcontainingG418 2 HSV tknegativescreeningmark Asnon homogeneousrecombination randomintegrationofHSV tkgene thecodingproductbreakdownnucleotidetopoisonandcelldeath constructionoftargetingvector Homologousgenefragment Plasmidvector HB1 HB2 Neorgene HSV tkgene 2 basicprocessofgeneknockout ConstructionoftargetingvectorBasicprocess homogeneousfragment totreatgene ofdesiredgenecloningintovector tocutthemostpartofhomogeneoussequence remainingasmallpartofsequenceontwoendoflinearvector neogeneclonedbetweentowhomogenousarmandHSV tkclonedonaendoftherecombinantvector IntroductionoftargetingvectorintoEScellwiththeEScell aspecificgeneissubstitutedbyhomogenousrecombinationoftargetingvectorwiththeknock outinggene InjectingtheEScellintoblastodermicvesicletheEScellsofgeneknockoutformcellclumpwiththenormalcellinblastodermicvesicle Embeddingblastodermicvesicleinwombofpseudocyesismouse towkindsEScellsintheblastodermicvesicle thenormalEScells developingnormalmice theEScellsofgeneknockout developingthemiceofgeneknockout chimericCrossbredmicescreeningchimericmiceofgeneknockout Constructingmousemodelofgeneknockout 3 conditionalgeneknockout BecauseCrerecombinasecanrecognizeandcutsequenceLoxP 34bp forachievingprecisegeneticmanipulationinmice ManyofthesedesiredgeneticmanipulationsrelyonCre sabilitytodirectspatiallyandtemporallyspecifiedexcisionofapre designatedDNAsequencethathasbeenflankedbydirectlyrepeatedcopiesoftheloxPrecombinationsite Thevectorofconditionalgeneknockout Thevectorofconditionalgeneknockout TheCKOconstructsgeneratedintheGTTFcontain ApplicationofGenetargetingonmedicine Toconstructtheanimalmodelwithhumandiseases 1 geneticdisorder2 tumor3 genetherapyToidentifynewgenesinhumanbodyoranimalandtheirfunction Section3genesuppressionandgenesilencing AntisenseRNARNAinterference AntisenseRNA 能与mRNA互补配对的RNA分子 因其在空间上妨碍mRNA为模版的蛋白质合成 可在翻译水平调控基因表达 AntisenseRNA aRNA issingle strandedRNAthatiscomplementarytoamRNAstrandtranscribedwithinacell Thatregulatesthegeneexpressiononthetranslationlevel MechanismofantisenseRNA 反义RNA的作用 根据碱基互补原理 用人工合成或生物体的特定互补DNA或RNA片段抑制或封闭基因表达的技术 在RNA水平上分析特定基因的可能功能可以设计与疾病 癌 基因或相应mRNA互补的反义DNA或RNA片段 封闭癌基因 RNAinterference RNAi Shortdouble strandedRNA dsRNA isusedtoinductdegradationofhomogenousmRNA TheabilityofdsRNAtosuppresstheexpressionofagenecorrespondingtoitsownsequenceiscalledRNAinterference RNAi Itisalsocalledpost transcriptionalgenesilencing PTGS MechanismofRNAi Normalconditionincells BasicprocessofRNAi ScreeningRNAisitetoatargetmRNASynthesisofsiRNAcorrespondingtoatargetmRNAConstructionofrecombinantvectorcarryingasiRNATransfectingcellwithrecombinantvectorAnalysisoftargetmRNAandit sprotein RNAibasicprocess 现今医学分为传统医学 基于 生物 医学模式 近代发展起来的西医 20世纪西医又发展到 社会 心理 生物医学 或综合医学模式 后基因组时代系统生物学的兴起 形成了系统医学在全球的迅速发展 成为继传统医学 西医学之后中 西医学汇通的未来医学 当代中国医学类专业比较优秀的学校有北京大学 华中科技大学 郑州大学等学校 中医即中国传统医药学 是形成于数千年前的中国 是建立在人们与疾病长期斗争的经验总结及阴阳五行 八纲脏腑辨证基础上 运用朴素辩证法及思辨推理方法 认识机体 自然 疾病三者关系 发展起来的一门以 功能人 包括功能脏器为概念的独特的医学哲学理论体系 在治疗上 除了药物外 还有针灸 推拿气功 耳针等特殊疗法 它是世界传统医学中最完善的一种医学理论体系 它为人类尤其为中国人民健康和民族繁衍做出了巨大贡献 西医学是最近三四百年来建立在解剖学 生物学及现代科学技术基础上 发展起来的一门以 解剖人 肉体人 为概念的 新兴的现代医学科学理论体系 主要采用科学实验方法 从宏观到微观 直至目前的分子基因层次水平 发展极为迅速 超过其它任何一门医学科学 成为世界医学史上的主流 可见中西医学 一个是以 功能人 为概念的独特的哲学医学理论体系 一个是以 解剖人 肉体人 为概念的新兴的现代医学科学理论体系 二者都不是以完整人为研究对象的科学 从理论讲二者都不是科学的 势必影响各自发展 事实也证明这一切 中医长期停滞不前 疗效也不确实 西医尽管发展到目前的基因分子层次 但疾病发病率居高不下 对绝大部分疾病发病原因认识不清 发病机理弄不明白 治疗受到制约 在小小SARS 禽流感面前竟束手无策 在糖尿病 癌症 心脑血管疾病 尿毒症等相当多疾病面前更是不得不求助或借助中医治疗 一个是疗效不确实 一个是有些甚至相当多疾病无法治疗 这就是中西医学结合的缘由 然而 由于二者是两套理论 两股道上跑的车 风马牛不相及 从理论上讲就没有结合的可能 只是形式上的融合罢了 故出现西医对治疗不了的疾病只好求助中医 而中医则往往采用西医诊断中医治疗 以及中西治疗法一块用的局面 至于循证医学 比较医学 后现代医学 行为医学等所谓 医学 都称不上一门独立的医学科学 关于这一点在灵魂医学有关章节中将有相关点评 总之 目前以中西医学为主的世界各种医学科学都存在不完整性的瑕疵 即都是以不完整的人为研究对象的医学科学 故不能解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学史上一切疑难模糊问题 成为阻碍医学科学前进的羁绊 的确 要解决目前存在于中西医学甚至人文社会科学上一切疑难模糊问题 显然已完全超出了中西医学所涉及的范畴 我们必须跳出中西医学的理论框架 建立起一个新的医学理论体系 东方医学和西方医学 即西医 的融合形成现代系统医学 该体系所涉及的一切问题不管从广度上 还是从深度上 都应该远远超过现有的中西医学理论 并将现有中西医学理论纳入自己的理论框架范围之内 为了肩负起这一历史使命 原创人生 医学理论体系 灵魂医学soulmedicine应运而生 她不但从宏观上或战略上圆满解释并解决了存在于人类医学及人文社会科学史上的一切疑难模糊问题 而且还能够使人们得以启迪人生 不得不重新认识人类自身 不得不重新认识人类赖以生存的这个多维世界 医学化验医学定义 medicine 是处理人健康定义中人的生理处于良好状态相关问题的一种科学 以治疗预防生理疾病和提高人体生理机体健康为目的 狭义的医学只是疾病的治疗和机体有效功能的极限恢复 广义的医学还包括中国养生学和由此衍生的西方的营养学 现在世界上医学主要有西方微观西医学和东方宏观中医学两大系统体系 医学的科学性在与应用基础医学的理论不断完善和实践的验证 例如生化 生理 微生物学 解剖 病理学 药理学 统计学 流行病学 中医学及中医技能等 来治疗疾病与促进健康 虽然东西方由于思维方式的不同导致研究人体健康与外界联系及病理机制的宏观微观顺序不同 但在不远的将来中西医实践的丰富经验的积累和理论的形成必将诞生新的医学 人类医学 不同于现代医学 不同于传统中医 金水医学诞生了 金水医学是以驱除病理 恢复生理为主张的全新医学 走出了人类医学的误区 治疗疾病的特色鲜明 不论是任何疾病都能做到从危为安 由重到轻的恢复办法 金水医学认识到人体是生命体 生命体有自己的强大的生理自我愈合功能 帮助生命体恢复自主作用才是治疗疾病的根本 针对当今现代文明病 现代疑难病 现代慢性病 亚健康 一体多病 取得了巨大的成功 治疗法则为 胃肠洁 气血流 玄府开 营卫昌 人生命体运动符合自然节律 最终达到人体生理增强 消灭疾病的目的 编辑本段医学的分类医学研究医学可分为现代医学 即通常说的西医学 和传统医学 包括中医学 藏医学 蒙医学等 多种医学体系 不同地区和民族都有相应的一些医学体系 宗旨和目的不相同 印度传统医学系统也被认为很发达 研究领域大方向包括基础医学 临床医学 检验医学 预防医学 保健医学 康复医学等 基础医学包括 医学生物数学 医学生物化学 医学生物物理学 人体解剖学 医学细胞生物学 人体生理学 人体组织学 人体胚胎学 医学遗传学 人体免疫学 医学寄生虫学 医学微生物学 医学病毒学 人体病理学 病理生理学 药理学 医学实验动物学 医学心理学 生物医学工程学 医学信息学 急救学 护病学 新中心法则 临床医学包括 临床诊断学实验诊断学 影像诊断学 放射诊断学 超声诊断学 核医诊断学 临床治疗学职能治疗学化学治疗学生物治疗学血液治疗学组织器官治疗学饮食治疗学物理治疗学语言治疗学心理治疗学内科学外科学泌尿科学妇产科学儿科学老年医学眼科学耳鼻喉科学口腔医学传染病学皮肤医学神经医学精神病学肿瘤医学急诊医学麻醉学护理学家庭医学性医学临终关怀学康复医学保健医学听力学 编辑本段医学的上个世纪末 本世纪初 1996年 清华学界对中医气本质 经络实质 阴阳 五行 藏象 中医哲学观等都有了新的全面整体创造性的认识和解说 如 邓宇等发现的 气是流动着的 信息 能量 物质 的混合统一体 45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh 分形分维的经络解剖结构 数理阴阳 中医分形集 分形阴阳集 阴阳集的分形分维数 五行分形集 五行集的分维数 分形藏象五系统 暨心系统 肝系统 脾系统 肺系统 肾系统 中医三个哲学观 新提出的第三哲学观 相似观 分形论等 df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2 还包括近代针灸经络的发展史 近代中医气的进展简史 中西医结合史 中医中药史等 古代 经典 中医史 4f肿瘤fbb癌症yuw3胃癌d65io肠癌 f2tr肺癌65ff 中国的中医学起源于三皇五帝时期 相传伏羲发明了 45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh 针灸并尝试草药 在公元前3000多年 中国的轩辕黄帝写下了人类第一部医学著作 祝由科 后世人在这部医药著作的基础上不断增补删改 逐渐形成了后来的 黄帝内经 和 黄帝外经 并由祝由科里将纯粹的医药分离了出来 形成了后来的中医学 而其中的 黄帝内经 则在世界上 df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr 第一个提出了 不治已病治未病 这一防病养生保健康的预防医学观点 df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6 轩辕黄帝早在周代 公元前1046年 df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2 公元前771年 就建立了世界上第一个医院和医疗制度 周代的医疗机构设有医师 上士 下士 府 管药库 史 管记录 徒若干人 下面又分食医 管饮食卫库 疾医 内科 疡医 外科 兽医四种 这是世界上最早的医学分科 医师总管医药行政 并在年终对医生进行考核 周礼 记载 岁冬则稽其事 以制其食 就是说 医生每年都要通过年终考核增减俸禄 45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh 当时的患者已经分科治疗 而且建立病历 df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr 死终则各书其所以 而入于医师 df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2 规定在死者病历上要写明死因 然后送交医师存档 以便总结医疗经验 提高医疗技术 这也是世界上最早的病历制度 在春秋战国 公元前770年 前221年 时期名医辈出 df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2 秦国有名医医缓 齐国有长桑和他的徒弟扁鹊 扁鹊发明了中医独特的辨证论治 并总结为 四诊 方法 即 望 闻 问 切 扁鹊看病行医有 六不治 原则 一是依仗权势 骄横跋扈的人不治 df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2 二是贪图钱财 不顾性命者不治 三是暴饮暴食 饮食无常者不治 四是病深不早求医者不治 五是身体虚弱不能服药者不治 六是相信巫术不相信医道者不治 后世则尊称他为神医扁鹊 春秋战国时流行的主要医学著作有 黄帝内经 df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr 黄帝外经 扁鹊内经 扁鹊外经 白氏内经 白氏外经 和 旁篇 这七本 45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh 合成 七经 df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6 在秦朝 公元前221年 公元前207年 出现了世界上最早的专门法医 令史 秦律规定 死因不明的案件原则上都要进行尸体检验 司法官如果违法不进行检验 将受到处罚 秦代的 封诊式 对法医鉴定的方法 程序等有较为详细的记载 在人命案件中 鉴定检验的主要内容有尸体的位置 创伤的部位 数量 方向以及大小等 df肺25s血液f369血小板t5172红血球gdf55m白血球fd2 令史检验完成之后 必须提交书面报告 称为 爰书 是世界上最早的法医鉴定和现场勘察报告 秦代还在世界上第一个建立传染病医院 疠迁所 df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr 并制定了最早的治疗传染病的隔离制度 据1975年湖北省云梦睡虎地出土秦简中记载 当时规定 凡经医生在给病人检查后发现有鼻梁塌陷 手上无汗毛 声音沙哑 刺激鼻腔不打喷嚏等症状者 一律送至疠迁所隔离治疗 45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh 这说明中国古代对传染性疾病的治疗措施 很早就已经是得力有效的 到了西汉时期 公元前202年 公元8年 中医的阴阳五行理论已经非常完备 名医则有太仓公淳于意和公乘阳庆 东汉出现了著名医学家张仲景和华佗 张仲景完善了中医的辨证理论 他还是世界上第一个临床医学大师 被尊称为医圣 他著有 df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr 伤寒论 疗妇人方 黄素方 口齿论 平病方 等等医书 最终流传下来的医书被并被后人编纂为 伤寒杂病论 和 金匮要略 张仲景采用辨证论治的基本原则 在 伤寒论 中归结为 八纲辨证 和 六经论治 经由这两种方法辨证论治后 再采用 八法 汗 吐 下 45传