胃舒胶囊促进幽门螺杆菌感染大鼠胃粘膜修复的作用研究.doc

胃舒胶囊促进幽门螺杆菌感染大鼠胃粘膜修复的作用研究 陕西中医?第卷第期?实验研究?胃舒胶囊促进幽门螺杆菌感染大鼠胃粘膜修复的作用研究王永红河?省邯郸市中心医院（）马志红牛丽颖李仁玲王鑫国河?医科大学中医学院（）李向军刘敏彦石家庄以岭药业有限公司（）摘要目的观察胃舒胶囊对幽门螺杆菌相关性胃炎的治疗作用。 方法用平板掺入法测定了胃舒胶囊及其主要成分对幽门螺杆菌的最低抑菌浓度。 在制备的幽门螺杆菌相关性胃炎模型上观察了胃舒胶囊在体内促进幽门螺杆菌感染大鼠胃黏膜修复的作用。 结果胃舒胶囊在体外对幽螺杆菌有明显的抑茵作用，其最低抑茵浓度（）为（）。 在体内，可明显改善幽门螺杆菌感染大鼠的胃黏膜组织学变化，有促进胃黏膜修复的作用。 结论胃舒胶囊对幽门螺杆菌相关性胃炎有治疗作用。 主题词胃舒胶囊药?学大鼠自?幽门螺杆菌（）被分离培养以来，经?研究，目前已证实感染是慢性胃炎、消化性溃疡的最主要病因，是胃癌和胃?巴瘤发生的重要因素之一。 胃舒胶囊临床上用于慢性胃炎及消化性溃疡的治疗，效果颇佳。 为观察其治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的作用，本课题通过体外试验测定了其最低抑菌浓度，同时在制备幽门螺杆菌感染的模型基础上，观察了胃舒胶囊在体内促进幽门螺杆菌感染大鼠胃黏膜修复的作用，为胃舒胶囊的临床应用提供?论依据。 材?实验药物胃舒胶囊（粒，由黄芪，蒲公英、白芍各，甘草等药组成，经乙醇提取制成胶囊剂）；由本室自配，?素酶试纸购自福建三明蓝波生物技术研究所。 实验动物大鼠，雌雄?拘，体重一，二级，合格证号冀医动字号，由河?省实验动物中心提供。 菌株幽门螺杆菌采用国际统一的（）菌株，经鉴定（）和（），购于中国药品生物制品鉴定所，本室超低温保存。 培养基及菌液准备将菌株复活后，接种于改良的布氏琼脂培养基（含脱纤维羊血），在适宜条件下，培养，根据菌?特征、革兰氏染色及生化反应，确定幽门螺杆菌。 用布氏肉汤洗下纯培养的幽门河?省科技厅资助课题（项目）通迅作者螺杆菌菌液备用。 实验方法体外幽门螺杆菌抑菌试验制备含药琼脂平板将受试物按倍比稀释配制?同药物浓度的培养基，加热，调至各自所需值磅灭菌，冷至。 倾注成无菌平板（平皿一、平皿），最终使培养基中含受试物原液（）的稀释倍数分别为，?。 同时做空白对照培养基。 接种取传至第代的幼龄菌，分别用生?盐水按标准比浊管校正浓度为的待检菌液，分别接种于?同倍比稀释的各自含药琼脂表面，同时接种平?点点，使每点含菌液，每一接种点的液滴直径为。 待接种点干燥后，翻转平板于恒温培养箱培养观察结果。 同时做空白对照，判定标准以?出现菌?的琼脂平板上的最低稀释受试物浓度为其最低抑菌浓度。 体内对幽门螺杆菌感染的治疗作用模型制备参照文献的方法略加改动。 大鼠只，随机抽取其中只作为正常对照组（?感染，?治疗），其余动物进?造模在禁食后，先给动物灌胃。 溶液只。 后灌胃幽门螺杆菌菌液只。 后给食。 每周感染次，共次。 于末次感染后周，取尾血进?血清学检查，查抗幽门螺杆菌相关成分抗体，抗体阳性者视为造模成功。 分组与实验方法选择抗体阳性的动物共只进入治疗实验，将造模动物随机分为组，即模型对照陕西中医?第卷第期组（只）、胃舒胶囊低剂?组（只）、胃舒胶囊中剂?组（只）、胃舒胶囊高剂?组（只）。 治疗组给药?分别为、，配成相应浓度，均按灌胃给药，模型对照组以等体积蒸馏水灌胃，每日次，共。 动物的处?实验期问，各组动物常规饲养，定期观察动物一般情况，包括动物的精神状态、活动情况、毛发光泽度及食欲。 每周测次体重。 给药结束个月后进?有关指标检测。 禁食后，采取脱颈椎的方法处死动物，无菌操作取出鼠胃，沿胃大弯剪开胃腔，用生?盐水冲洗胃腔，自幽门端相对固定部位取胃组织用于病?组织学检查，光镜下观察胃组织的病?学改变，并根据?全国慢性胃炎研讨会共识意见的诊断标准为依据，进?组织学评分。 结果体外幽门螺杆菌抑菌试验结果见表。 由结果可见，胃舒胶囊及其主要组分药对幽门螺杆菌均有明显的抑菌作用，胃舒胶囊的最低抑菌浓度（）为（），其主要成份药的分别为；蒲公英提取物为，黄芪提取物为，自芍提取物为，甘草提取物为，紫苏提取物为，黄连提取物为。 表体外对幽门螺杆菌抑茵结果受试物最低抑菌浓度（，）胃舒胶囊蒲公英提取物黄芪提取物白芍提取物甘草提取物紫苏提取物黄连提取物、各组动物一般情况正常对照组大鼠活动灵敏被毛光泽，食?较大，体重增长较快；模型对照组大鼠一般情况较差，活动迟缓，毛色无光泽，食?小，体重增长缓慢，形体较小。 各治疗组较模型对照组的情况有明显改善，食?较前增加，体重渐回升，尤以胃舒胶囊高剂?组的情况改善较明显。 治疗幽门螺杆菌后对胃窦部黏膜组织学的影响肉眼观察正常对照组大鼠胃黏膜呈粉红色，表面平整光滑，胃壁肌张?较强。 模型对照组动物胃黏膜颜色较浅或暗红色，表面缺少光泽，胃壁肌张?较差。 各治疗组胃黏膜呈淡红色或暗红色，胃壁肌张?较模型组有?同程度的改善。 光镜观察胃黏膜炎症变化正常对照组大鼠胃黏膜上皮完整，固有层内有密集排列的腺体，部分大鼠胃窦部的黏膜底部可见极少?散在的?巴细胞（见图）。 模型对照组大鼠胃窦部的炎症程度较重，固有层内可见较多的?巴细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润，但未见黏膜的糜烂、出血和溃疡等改变（见图）。 各治疗组动物的胃窦部炎症均较模型对照组有所减轻，其中胃舒胶囊高剂?组的动物炎症几乎全部消失（分别见图）。 图正常组大鼠胃黏膜（）图模型对照组大鼠胃黏膜（）图胃舒胶囊低剂?组大鼠胃黏膜（）图胃舒胶囊中剂?组大鼠胃黏膜（）图胃舒胶囊高剂?组大鼠胃黏膜（）组织学评分慢性炎症评分结果见表。 由表可见，与模型对照组（士分）比较，各治疗组的慢性炎症评分均有明显下降。 与模型对照组比较，胃舒胶囊低剂?组（士分）、胃舒胶囊中剂?组（分）和胃舒胶囊高剂?组（士分），均，有显著性差异。 急性炎症评分结果见表。 由表可见，与模型对照组（土分）比较，各治疗组的急性炎症评分均有明显下降。 与模型对照组比较，胃舒胶囊低剂?组（分）、胃舒胶囊中剂?组（士分）和胃舒胶囊高剂?组（士分），均，有显著性差异。 表治疗幽门螺杆菌后对胃窦部黏膜组织学的影响（）与模型对照组比较，讨论由幽门螺杆菌（）引起的胃炎约占慢性胃炎的左右。 幽门螺杆菌的特殊结构及其多种致陕西中医?第卷第期病因子可从?同方面引起胃黏膜炎症。 可通过多种作用机制损伤胃黏膜，如释放多种致病因子如细胞毒素、?素酶、脂多糖、溶血紊等直接破坏上皮细胞的完整性，造成细胞变性；亦可引起胃粘膜上皮局部的炎症反应，致机体释放大?的细胞因子，通过免疫病?反应，造成黏膜细胞损伤；这些慢性炎症还可诱导细胞的增殖和凋亡，或使二者的平衡紊乱，而致细胞恶性转化。 目前认为根除幽门螺杆菌后，可以减轻临床症状、改善胃黏膜的病变，并能加速溃疡愈合，明显降低溃疡复发率。 由于幽门螺杆菌定位在胃粘膜上皮表面粘液层下，受到粘液的保护，影响了局部药物的作用，另外胃内和胃粘膜的值范围较大，也影响了一些药物的稳定性，所以一些体外实验对幽门螺杆菌有效的药物在人体内?一定有效，而且终止治疗后幽门螺杆菌感染的复发率很高。 联合用药可使根除率大大提高，复发率降低，但又产生很大的副作用，而且病人腹胀、暖气、纳差等症状改善较慢。 经过长期的医疗实践证明，中医药治疗慢性胃炎、消化性溃疡的疗效肯定，愈后复发率低，且副作用少，长期应用?会产生耐药性。 大?的实验研究也证明中医药对提高幽门螺杆菌根除率、减少药物副作用、增强胃粘膜保护、提高溃疡愈合质?方面均有良好的作用。 因此，发挥祖国中医药学的优势，寻找一种能标本兼治的中成药具有十分重要的意义。 胃舒胶囊由蒲公英、黄芪、白芍、甘草等药组成，具有益气健脾，舒肝和胃，清热解毒之功。 本次实验的结果表明，该药体外对幽门螺杆菌有明显的抑制作用，体内可促进幽门螺杆菌感染大鼠胃黏膜的修复作用，并呈?效关系，是治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的一种有效药物。 结合我们前面所做的试验，可推断胃舒胶囊治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的作用一方面与直接抑制细菌的生长繁