Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序

1 Agilent 1200 高效液相色谱仪标准操作程序高效液相色谱仪标准操作程序 1 目的 使操作人员的操作步骤规范化 2 适用范围 适用于仪器安装 调试 校准后正常状态下进行的操作 3 责任者 质控科仪器分析员对此规程负责 4 规程 4 1 清洗液 流动相 封柱液预处理 4 1 1 所有清洗液 流动相 封柱液在使用前均需过滤 脱气以及混 合均匀 4 1 2 甲醇 水 10 90 乙腈 水 10 90 超净水 乙腈均需存 放在棕色溶剂瓶中 4 1 3 含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有较高比例的其他有机溶剂 的溶液在过滤时需使用有机相微孔滤膜 其它溶液在过滤时需使用 水相微孔滤膜 4 1 4 存放清洗液 流动相 封柱液的溶剂瓶在每次装入溶液前需用 少量过滤好的该溶液清洗数次 4 2 接通电源 开启连机电脑 再接通仪器电源 仪器自检完毕 处于准 备进行状态 双击桌面图标 仪器 1 联机 打开 Agilent 1200 化学 工作站 在左上角下拉框中选择 方法与运行控制 界面 显示如 2 下图标 注意 一定要先双击 仪器 1 联机 图标 进入联机状态 方可双 击 仪器 1 脱机 图标 同时进入脱机界面 否则 将无法联机 4 2 泵 4 2 1 准备清洗液并装入溶剂瓶中 将吸滤器放入瓶内 安装所需用 柱子 4 2 3 将吹扫阀 即 Purge 阀 打开 单击泵图标 选择 设置泵 将 流速 设置为 3 00ml min 选择清洗液所在 通道 建议为 A 通道 单击 确定 在 系统视图 中单击 启 动 运行泵 泵运行 10 分钟后 观察压力 应小于 10bar 若大于 此压力 应更换 purge 阀滤芯 调节流速 1 00ml min 4 2 4 关闭 purge 阀 观察柱压是否正常 3 4 2 5 选择 控制 在 用于泵密封垫清洗的泵 Seal Wash 中选 择 定期清洗 周期 设置为 5min 持续 设置为 0 1min 同 时观察试剂架中 10 异丙醇是否充足 相应的废液瓶是否有充足空 间 4 2 6 根据 柱使用记录中所规定的方法 清洗柱子约 30 分钟后 在 控制 组中的 泵 选项中选择 待机 待系统压力降到 10bar 以下后 更换流动相 在 控制 组中的 泵 选项中选择 启动 改用流动相平衡柱子 约 30 分钟后柱子处于平衡状态 设 定所需流速 在 停止时间 中设定所需运行时间 在 后运行时 间 设定所需后运行时间 选择 溶剂 项 设定各通道比例 单 击 确定 4 2 6 如进行梯度分析 在 设置泵 组中选择 时间表 单击 追加 根据具体方法进行时间和相应的参数设置 4 3 柱温箱 4 3 1 在系统视图中 单击柱温箱图标 并从菜单中选 择 设置柱温箱 设置 温度 选项 单击 确定 4 3 2 在实验开始时 用清洗液清洗柱子时 应同时开启柱温箱 在 实验结束时 用清洗液清洗柱子时 应关闭柱温箱 让柱子随着清 洗过程慢慢冷却 要避免到封柱过程结束后才关闭柱温箱 这会导 致柱的寿命减短 4 4 自动进样器 4 4 4 1 在系统视图中 单击自动进样器图标 从菜单 设置 进样器 在 进样 组中 选择 洗针进样 清洗瓶通常设为 91 在最优化中设为 无 4 4 2 清洗瓶中的清洗剂通常为滤过的超净水 只需盖瓶盖 无需放 置垫片 4 5 可变波长检测器 VWD 4 5 1 在系统视图中 单击检测器图标 并从菜单中选择 设置 VWD 信号 在 信号 组中设置波长 在 峰宽 响应时 间 组中 单击下拉列表并选择 0 1min 2s 单击 确定 4 5 2 在 控制 组中 选择关闭或打开氘灯 一般情况下 待到系 统走流动相时即打开氘灯预热 分析结束时 用清洗液清洗柱子时 即时关闭氘灯 4 7 自动进样器 柱温箱 检测器 中的时间表设置均与 泵 一致 4 8 上述 自动进样器 泵 柱温箱 检测器 的相关参数 设置完毕后可在主界面选择 方法 选择 方法另存为 保存方法 以后使用时可选择 调用方法 4 9 序列 4 9 1 在 方法和运行控制 视图中 单击主工具栏上的 切换 5 至 序列 面板 点击 仪器控制 4 9 2 单击选择 序列参数 出现如下对话框 操作者姓名 一般填写姓名的首字母集合 数据文件 选择 自动 子目录填写 xxyyzz aaa 其中 xxyyzz 为 6 位数的年月 日组合 aaa 为品名的首字母集合 运行部分方法 选择 依据运 行时选项表 等待时间 设置为 0min 未就绪超时 设置为 0min 如该序列要走过夜 在 关闭 选择 序列运行后命令 宏 如果所用的仪器为单元泵 选择 LAMPALL OFF 如果所用的仪器 为四元泵 选择 macro SHUTDOWN MAC go 4 9 3 单击 确定 6 4 9 4 单击 序列 面板 出现如下对话框 设定序列表 在 样品瓶 中输入样品瓶位置 1 99 在样品样品名称中输入 相应样品名称 具体参见附件一 在方法名称中输入相应的方法名 称 具体参见附件二 在 进样次数 瓶 输入所需进样的次数 使 用 插入 追加一行 和 剪切 按钮编辑序列行数 单击 确 定 4 9 5 单击主界面上的 序列 选择 保存序列 保存所设置的 序列 4 10 数据分析 4 10 1 在 视图 中选择 数据分析 将主界面切换到数据分析 4 10 2 单击 切换至积分工作区 4 10 3 选择 调用信号 调用所需的信号 7 4 10 4 在 积分 报告 工具栏中 单击切换到积分事件表 其中 基线校正可以设置为 经典 或 高级 在进行有关物质分 析时设置为 高级 斜率灵敏度在有关物质分析时设置为 0 5 其他分析时设置为 1 峰宽设置为 0 04 最小峰面积 和 最小峰高 在有关物质分析时均设置为 0 其他分析时可设置 适合的数值 肩峰 选择 关闭 信号指定事件 选择 VWD 缺省 单击保存已修改的积分事件表并关闭积分工作区 4 10 5 单击打开 保存方法 对话框保存方法 4 10 6 单击放大光标查看积分基线 单击缩小至初始大小 4 11 样品分析 待基线走平稳后 在序列 仪器控制 主界面点击 开始 进样 4 12 仪器及柱子清洗 根据 柱使用记录中所规定的方法 清洗柱子及流路 注意一般 甲醇 水 10 90 乙腈 水 10 90 不超过 60 分钟 再用 10 倍 柱体积封柱液清洗柱子及流路 退出工作软件并保存数据 关机 5 维护 5 1 泵 5 1 1 主动入口阀滤芯 每 6 个月清洗一次 5 1 2 溶剂过滤器 每 3 个月清洗一次 5 1 3 泵密封垫 柱塞杆每 2 年清洗一次 5 2 自动进样器 8 5 2 1 针头 每 6 个月清洗一次 5 2 2 针座 每 6 个月清