中药饮片药典方法——含量HPLC检验方法确认方案(参考)分析

款冬花中款冬酮含量款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认方案检验方法确认方案 方案编号 XXXX 确认方案审批表 职能部门 职务签名日期 起草 QC 主管 质量管理部副 经理 审核 生产负责人 批准质量负责人 XXXX 有限公司 XX 年 xx 月 XXXXXXX 款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认方案 第 2 页 共 9 页 目目 录录 1 确认目的 3 2 确认委员会 项目组主要成员及其职责 3 3 文件控制 3 4 风险识别 分析 评估与控制 3 5 确认时间 4 6 试剂与样品 4 7 仪器及色谱条件 4 8 确认内容及可接受标准 5 9 实验步骤与结果 5 10 偏差处理 6 11 确认失败处理 6 12 检验方法的再新确认 6 13 确认结果评定与结论 7 附 确认方案修改申请及批准书 XXXXXXX 款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认方案 第 3 页 共 9 页 1 确认目的确认目的 中国药典 2010 年版规定款冬花中款冬酮含量测定 采用高效液相色谱法分离 紫外 检测器检测的方法 本公司 QC 部门检验时使用的是岛津型高效液相色谱仪 配有双元泵 柱温箱及紫外检测器 为保证本公司 QC 部门用此方法检测款冬花中款冬酮含量能够达到 中国药典 2010 年版的检测要求 须对高效液相色谱法测定款冬花中款冬酮含量的方法进 行确认 2 确认委员会 项目组主要成员及其职责确认委员会 项目组主要成员及其职责 部门 职务确认工作中职务姓名职责 质量负责人确认委员会主任负责确认方案及报告的批准 生产负责人 确认委员会副主 任 负责确认方案及报告的审核 质量管理部 副经理 项目经理 负责协调领导确认工作 负责确认方案审核 确认报告的审核等各项工作 QC 主管项目主管 确认方案起草 确认数据的审查 确认工作协 调安排 QC组员 负责取样及提供确认所需检测数据 实验记录 并对试验结果进行分析 QC组员 负责收集各项确认 实验记录 并对试验结果 进行分析 QC组员确认过程监督检查 确保结果可靠性 3 文件控制 文件控制 下列文件资料齐全 并且符合 GMP 要求 文件 资料存放地点 岛津 XX 型高效液相色谱仪操作规程 编号 xxxxx QC 实验室 款冬花检验操作 xxx 编号 xxxxx QC 实验室 中国药典 2010 年版QC 实验室 4 风险识别 分析 评估与控制风险识别 分析 评估与控制 风险问题 描述 款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认的质量风险 风险评估 小组 xxxxx 风险简述 可附件 从人 机 料 法 环五个方面对确认过程进行风险识别 分析及控制 对高风险项目采取控制 措施 使其降低到可接受水平 风险管理 RRF 风险等级过滤法分度 可附件 文字高 中 低来衡量风险的严重 XXXXXXX 款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认方案 第 4 页 共 9 页 工具 性和可能性 矩阵 可附 件 行动限 使用标准矩阵 当高风险时 需采取 行动 中风险时考虑 风险分析和评估 风险项目风险点 现有控制 措施 可能 性 严重 性 可检 测性 评估 结果 建议行动或风 险控制措施 负责 人 计划完成 日期 人员 风险 分析员技能不熟 练 不够细心导 致不必要失误产 生 已制定相应的操 作规程和检验复 核制度 中中 中 对参与方法确认 的分析员进行仪 器操作与维护规 程 确认管理规 程等文件的培训 确认开始 前 仪器风险 高效液相未经校 正确认 已制定高效液相 校验管理文件 低高 中 及时进行企业自 校和送计量部门 校正 按规定效 期执行 试剂试药 风险 试剂试药保存不 当或过期 称量 溶液配制过程的 误差等 已制定试剂试药 溶液配制等管理 规程 低高 中 试剂试药定期进 行检查 称量 溶液配制等过程 要进行复核 按文件规 定执行 操作间温 湿度风险 操作间温湿度波 动大导致仪器不 稳定 操作间相对密闭 并安装有空调 中中 中 分析过程中减少 频繁开关门和长 时间开启门 避 免人员走动时触 碰仪器 随时 评估结果 经过风险小组的评估 认为在款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认过程中不存在高水平 风险 有 4 个中等水平风险可能会对确认结果有效性有影响 在确认过程和日常运行中需要加 强监管 其他未识别风险点皆认作低风险 可接受风险 5 确认时间 确认时间 需在 2015 年 1 月 10 日前完成 6 试剂与样品 试剂与样品 试剂 甲醇 HPLC 级 批号 生产厂家 乙醇 xx 级 批号 生产厂家 纯化水 批号 生产厂家 款冬酮对照品 来源 批号 有效期 样品 款冬花 批号 来源 7 仪器及色谱条件 仪器及色谱条件 7 1 仪器 设备名称 型号生产厂家设备编号校验周期校验单位校验日期 XXXXXXX 款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认方案 第 5 页 共 9 页 7 2 色谱条件 色谱条件 流动相 甲醇 水 85 15 检测波长 220nm 色谱柱 Agilent XDB C18 4 6mm 150mm 5 柱温 25 流速 1 0ml min 进样量 20 l 运行时间 30 分钟 8 确认内容及可接受标准 确认内容及可接受标准 系统适用性 在对照品溶液色谱图中 以款冬酮峰计理论板数不得小于 5000 专属性 在供试品溶液色谱图中 款冬酮峰与相邻杂质峰的分离度应不小于 1 5 精密度 重复性 供试品溶液的平行进样 至少 6 次 按外标法计算款冬酮含量 其相对标准偏差不得大于 1 0 9 实验步骤与结果 实验步骤与结果 9 1 流动相制备 流动相 按甲醇 水 85 15 混合 摇匀 超声脱气 或甲醇 水各自脱气后按 85 15 比例输送混合成流动性 9 2 系统适应性试验 对照品溶液的制备 取款冬酮对照品约 2 5mg 精密称定 置 50ml 容量瓶中 加流动相 溶解并稀释至刻度 摇匀 即得浓度为 50 g ml 的溶液 操作方法 取对照品溶液连续 6 次按方法规定的色谱条件进样 20 l 记录色谱图 需附 在确认报告中 根据保留时间和半峰宽 利用计算机自动积分系统计算分离度及塔板数 计算相对标准偏差 表 I 系统适应性试验数据 款冬酮峰 进样号 RT峰面积 款冬酮峰和相 邻峰的分离度 RS 理论塔板数 N 拖尾因子 T 1 2 3 4 5 6 平均 RSD XXXXXXX 款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认方案 第 6 页 共 9 页 标准 RSD 1 2 结论 以款冬酮峰计理论板数为 不得小于 5000 符合规定标准 执行人 日期 复核人 日期 9 3 专属性试验 分离度试验 供试品溶液的制备 取款冬花样品粉末 过四号筛约 1g 精密称定 置具塞锥形瓶中 精 密加入乙醇 20ml 称定重量 超声处理 功率 200W 频率 40kHz 1 小时 放冷 再称定重量 用 乙醇补足减失的重量 摇匀 滤过 取续滤液 即得 操作方法 取供试品溶液连续 6 次按方法规定的色谱条件进样 20 l 记录色谱图 需 附在确认报告中 根据保留时间和半峰宽 利用计算机自动积分系统计算分离度 选择 第 1 次进样得到的分离度 结论 款冬酮峰与相邻峰的分离度 Rf 为 应不小于 1 5 符合规定标准 执行人 日期 复核人 日期 9 4 精密度试验 重复性 操作方法 选择系统适用性试验最后 2 次进样得到的结果和分离度试验 6 次得到的结 果 按外标法计算出样品中款冬酮的含量 其相对标准偏差应不得过 1 0 表 精密度试验结果 测定次数123456 含量 0 070 相对标准偏差 注 含量按干燥品计 款冬花水分 13 0 结论 本法的精密度 RSD 小于 1 0 符合规定 执行人 日期 复核人 日期 10 偏差处理偏差处理 在确认中发现的任何偏差均应记录 并按 偏差调查和处理管理规程 进行处理 偏 差对确认结果是否影响 影响多大 应经过确认领导小组进行最后评估和评价 对于特殊 的检测 如果有 重大 偏差 经过确认领导小组最后评估检测无效的 QC 必须修订确认 方案重新进行确认试验 结果报告 11 确认失败处理确认失败处理 如果在确认过程中出现的偏差无法查明原因 或确认结果达不到确认接受标准中设定 的要求 则认为本次确认失败 应在对失败原因做出正确的调查并处理后重新进行确认 XXXXXXX 款冬花中款冬酮含量 HPLC 检验方法确认方案 第 7 页 共 9 页 结果报告 12 检验方法的检验方法的再确认再确认 在以下情况之一必须进行再确认 a 当分析方法发生较大变更需要再确认 b 在日常监测中发现分析方法异常需进行再确认 c 再确认时应按照前期确认采用的方法对检验分析方法进行再确认 或根据实际情况修 订补充确认方案后进行再确认 13 确认结果评定与结论确认结果评定与结论 13 1 确认结果汇总和评价 确认项目小组成员对确认过程进行记录和汇总分析 项目主管 对确认结果进行分析评价 并做出确认结论 结论 确认项目主管 日期 13 2 确认报告的审批 确认报告由项目经理和确