荧光PCR法检测GBS的临床意义ppt课件.ppt

THECLINICALSIGNIFICANCEOFTESTINGGBSBYFQ PCR 荧光PCR法检测GBS的临床意义 国家 地方联合工程实验室钟菲菲 呵护生命健康护航 B族链球菌的介绍 20世纪30年代国外学者Fry报道了3例死于GBS引起的产后心内膜炎病例 由此证实了GBS为人类致病菌 20世纪60年代首次发现其可以导致严重的新生儿感染 引起新生儿死亡 20世纪70年代 GBS已被证实为围产期母婴感染的主要致病菌之一 在围产医学中占有不可忽视的地位 表面蛋白质Ag 荚膜多糖Ag C抗原 肽聚糖 磷壁酸 B族链球菌 groupBstreptococcus GBS 学名无乳链球菌 为革兰氏阳性球菌 寄居于阴道和直肠 属于条件致病菌 B族链球菌的介绍 根据其是否溶血分 不完全溶血 完全溶血 不溶血3种 根据其致病血清分 Ia Ib Ic II IV和V 其毒力荚膜多糖抗原 脂磷壁酸 神经氨酸酶等有关 发达国家 60 发展中国家Ib Ic II 74 分娩前五周内检测 阴性预测值为95 98 健康女性15 35 的生殖道和消化道中存在GBS菌落 而且种族 人群有明显区别 GBS定植表现为一过性 间歇性或持久性 导致孕妇不同时期GBS检测结果不同 性生活活跃 多次妊娠 妊娠期间糖尿病等因素更容易获得GBS B族链球菌流行病学 B族链球菌危害 母婴传播是新生儿感染的主要途径 母婴传播发生在临产 新生儿暴露于有 族链球菌产道 可吞进和吸入细菌 GBS阳性的孕妇中新生儿感染率 GBS对孕妇的危害 抑制乳酸杆菌生长 pH值升高 利于杂菌 胎膜早破羊膜腔感染 早产 晚期先兆流产 GBS对绒毛膜的吸附力及穿透力最强 宫内感染的主要原因 GBS 胎膜早破 早产 刺激子宫收缩 GBS对孕妇的危害 关于263例高危孕妇的研究 GBS感染患者治疗后的情况如下 早产62例中有13例GBS感染经治疗后 其中6例至37周后分娩 时间最长1个月 新生儿体重达2600g 胎膜早破 早产136例中有31例GBS感染经治疗后 其中6例延长了孕周 最长延长15天 达足月分娩 晚期先兆流产38例中有9例GBS感染 经过治疗 4例早产 孕周增长最长的达6周 24周入院至30 2周剖宫产结束分娩 早产儿体重1800g经抢救存活 随访6个月目前情况良好 经GBS干预治疗后 可延长孕周 使胎儿获得宫内生长机会 增加存活率和生存质量 降低极低出生体重儿和围产儿死亡率 减少母婴感染率及其并发症 参考文献 中国妇幼保健2009年第24卷 B族溶血性链球菌感染与胎膜早破 早产 晚期先兆流产的关系与干预 刘剑等 GBS对孕妇的危害 GBS对新生儿的危害 症状包括呼吸窘迫 呼吸暂停 以败血症最常见 肺炎和脑膜炎是早发型的形式早期病死率高达50 近年来 为4 6 无症状带菌母亲分娩传播 主要为足月儿和近足月儿 早发型感染危害 JamesHanley Neonatalinfections groupBstreptococcus J ClinicalEvidence GBS对新生儿的危害 新生儿B族链球菌感染死亡1例分析 新生儿出生后3h吃奶差 反应欠佳 出生后8h情况加重 四肢微凉 体温正常 出生后13h呼吸急促 反应低下 刺激不哭 以败血症 呼吸功能不全 新生儿肺炎急转儿科 出生后21h病情进一步加重 提示严重感染 酸中毒 低钙及心肌受损 出生后38h出现呼吸表浅 暂停等 出生后41h呼吸首先停止 然后心跳停止 经抢救无效死亡 资料来源 中国实用妇科与产科杂志 2008年10月第24卷第10期 新生儿B族链球菌感染死亡1例分析 北京儿童医院 新生儿肺炎死亡病例中B族链球菌的检测 收集200例1953年至2004年间新生儿肺炎死亡病例回顾研究 死亡的200例肺炎患儿 有130例查实GBS阳性感染 高达65 130例GBS阳性患儿 有74名 7d 56名 7d 早发型中29名为早产儿 200例患儿中 75例有完整临床资料 其中35例可查到一项或多项与GBS感染有关的危险因素 如早产 低体重 胎膜早破 羊水异常等 GBS检测结果均为阳性 结论 GBS是新生儿肺炎死亡病例中的重要病原 尤其在早发型肺炎病例中GBS感染占很大比重 中华儿科杂志 2006年11月第44卷第11期 新生儿肺炎死亡病例中B族链球菌的检测 新生儿误诊分析1例 西南某三甲军区医院政委孙女出生后出现感染 经临床科室 检验科经验判断 疑似MRSA感染 建议临床使用万古霉素 政委不认可该结果 后经过荧光PCR法快速检测 确诊为B族链球菌感染 而临床的症状与链球菌感染表现相近 经过B族链球菌治疗方案后 2天即痊愈 GBS对新生儿的危害 常表现为隐匿发病 最初为脑膜炎 如发烧 昏睡呕吐等 多伴败血症病死率约15 但存活者30 50 严重后遗症 痴呆 脑积水 智力障碍等 感染一般系医院内感染 90 主要是 型引起发病多为产科并发症的早产儿和低体重儿 发病率是足月的7倍 若发生脓毒血症 病死率高 晚发型感染危害 新生儿B族链球菌脑膜炎13例临床分析和随访 温州某医院2005年至2013年5月收治的13例新生儿B族链球菌脑膜炎的临床资料进行回顾性分析 13例患儿治愈7例 好转自动出院4例 因严重并发症死亡2例 出院1个月后1例早发型伴脑积水早产儿在家中死亡 7例随访至10 24个月 3例早发型患儿中 生长发育正常2例 运动发育落后1例 4例晚发型患儿 生长正常发育1例 运动发育落后2例 癫痫发作1例 结论 新生儿GBS脑膜炎住院时间长 死亡率高 易出现神经系统并发症和后遗症 中华儿科杂志 2014年2月第52卷第2期 90年代美国新生儿的发病率 1996年GBS的预防共识准则 1996年预防GBS的共识准则概述了两种方法 对确定需要的IAP妇女 基础筛查 在35 37周的胃肠道 泌尿生殖道基于风险的方法 早产 胎膜早破 18小时或产时发热T 38 C 美国CDC预防共识准则 2011年 2014年 2010年 2015年 孕前和孕期保健指南 第一版 建议在孕35 37周进行B族链球菌的筛查 围产期GBS预防指南 所有孕妇于35 37周筛查 早产临床诊断与治疗指南 筛查宫颈阴道GBS感染有可能预防早产 胎膜早破的诊断与处理指南 明确指出胎膜早破是B族溶血性链球菌上行性感染的高危因素 是导致孕妇产时及产褥期感染 胎儿感染及新生儿感染的重要病原菌 应重视GBS感染的防治 中华医学会妇产科学分会 美国疾病预防控制中心建议 权威指南共识 全球常规筛查GBS的地区 中国部分省份及香港 日本等 德国 法国 西班牙 波兰 瑞士 意大利 比利时 捷克 斯诺文尼亚等 美国 加拿大 澳大利亚 肯尼亚 阿根廷 GBS检测方法 在羊血培养基上培养48h后的GBS菌落 形成灰白 光滑 圆形突起小菌落有明显的溶血圈 GBS培养法 荧光PCR仪给出客观的判别标准 阳性 弱阳 阴性 PCR检测方法 B族链球菌核酸检测试剂盒 荧光PCR法 优点 简便快捷 灵敏度高 物理破碎 重复性好 特异性强 分子信标 闭管操作 避免污染 国内首家 发明专利 GBS核酸检测试剂盒适用 生殖道分泌物和直肠分泌物 标本类型 荧光PCR法的取材方法 新生儿鼻咽拭子的取材方法 GBS感染检查时机及治疗方案 新生儿 母亲阳性 出生后有高危疑似GBS感染症状 同产房内有阳性者 不需要干预 GBS 对症治疗 GBS 产时高危因素 分娩时 37周 产时发热 38 胎膜早破 12小时 进行GBS检测 不需要干预 GBS 立即干预 GBS 不需要干预 孕35 37周取阴道和直肠拭子检测上次新生儿GBS感染史本次妊娠有菌尿症 GBS 立即干预 产前干预 有症状 无症状 GBS 2010GBS预防医疗指南 抗生素治疗方案 有无青霉素过敏 青霉素G 首次剂量500万单位 然后每4小时250 300万单位 直至分娩或者氨苄西林 首次剂量2g 然后每4个小时1g 直到分娩 病人在接受青霉素或头孢菌素时有无出现下列任一症状 过敏症 血管性水肿 呼吸窘迫 荨麻疹 头孢唑啉 首次剂量2G 然后每8个小时1g 直到分娩 是否对红霉素和克林霉素敏感 万古霉素每12小时1g 静脉注射 直至分娩 克林霉素每8小时900mg 静脉注射 直至分娩 国内治疗推荐 3 2 1 中华医学会妇产科学分会产科学组 青霉素G首次剂量480万单位静脉滴注 240万单位 4h直至分娩 或氨苄青霉素 负荷量2g静脉滴注 然后每4小时1g的剂量静脉滴注直至分娩 对青霉素过敏者则选用头孢唑啉 2g作为起始剂量静脉滴注 然后每8小时1g直至分娩 对头孢菌素类过敏者则用红霉素500mg 每6小时1次静脉滴注 或克林霉素900mg静脉滴注 每8小时