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文档简介

精品文档 1欢迎下载 专题 1 传统发酵技术的应用 课题 1 果酒和果醋和制作 一 基础知识 一 果酒制作的原理 1 菌种是 属于 生物 新陈代谢类型为 无氧时 能进行无氧呼吸 反应式为 2 酵母菌繁殖的最适温度 左右 酒精发酵一般控制在 二 果醋制作的原理 1 菌种是 属于 生物 新陈代谢类型为 只有在氧气充 足时 才能进行旺盛的生命活动 2 当氧气 糖源都充足时 醋酸菌将葡萄汁中的 分解成 当缺 少糖源时 醋酸菌将 变为 再将乙醛变为 3 醋酸菌的最适合生长温度为 三 操作提示 一 材料的选择与处理 选择 的葡萄 榨汁前先将葡萄进行 然后再除去 二 防止发酵液被污染 1 榨汁机要清洗 并 2 发酵瓶要清洗 用体积分数 的酒精消毒 3 装入葡萄汁后 充气口 三 控制好发酵条件 1 葡萄汁装入发酵瓶时 要留出大约 的空间 四 课题延伸 果汁发酵后是否有酒精产生 可以用 来检验 在 条件下 重铬酸钾与酒精反应呈现 课题 2 腐乳的制作 一 基础知识 腐乳制作的原理 1 腐乳的发酵有多种微生物的参与 其中起主要作用的是 2 毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的 分解成小分子的 和 脂肪酶可以将 水解成 和 二 实验设计 1 实验流程 让豆腐 加 腌制 加 装瓶 腌制 三 操作提示 精品文档 2欢迎下载 一 控制好材料的用量 1 用盐腌制时 注意控制盐的用量 盐的浓度过低 可能 导致豆腐腐败 盐的浓度过高 会 2 乳汤中酒的含量应控制在 左右 酒精含量过低 可能导致豆腐腐败 酒精含量过高 腐乳成熟的时间将会 二 防止杂菌污染 1 用来腌制腐乳的玻璃瓶 刷干净后要用 消毒 2 装瓶时要 加入乳汤后要用胶条将瓶口 封瓶时 最好将瓶口通 过酒精灯的火焰 防止瓶口被 课题 3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量 一乳酸菌 1 代谢类型为异养厌氧型 在 情况下 将葡萄糖分解成乳酸 2 常见种类 和 3 分布 分布广泛 土壤 植物 人或动物的 内等均有 分布 4 应用 常用于生产 四亚硝酸盐的测定 1 原理 1 在 条件下 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生 反应后 与 N 1 萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料 专题 2 微生物的培养与应用 课题 1 微生物的实验室培养 一基础知识 1 培养基 1 培养基的种类包括 培养基和 培养基等 2 培养基的化学成分一般都含有 四类营养成分 3 在提供上述几种主要营养物质的基础上 培养基还需要满足微生物生长对 以及 等的要求 例如 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添 加 培养霉菌时需要将培养基的 PH 调至 培养细菌时需要将培养 基的 PH 调至 培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件 2 无菌技术 1 获得纯净培养物的关键是 2 消毒是指 灭菌是指 思考 消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么 精品文档 3欢迎下载 3 实验室常用的消毒方法是 此外 人们也常使用化学药剂进 行消毒 如用 等 常用的灭菌方 法有 二实验操作 1 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 2 纯化大肠杆菌 1 微生物接种的方法中最常用的是 和 1 菌种的保存 为了保持菌种的纯净 需对菌种进行保藏 对于频繁使用的菌种 我们可以采用 法 对于需要长期保存的菌种 可以采用 法 课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1 尿素只有被 分解成 之后 才能被植物吸收利用 2 以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象 要达到的两个主要目的是 4 实验室中微生物的筛选应用的原理是 人为提供有利于 生长的条件 包 括 等 同时抑制或阻止其他微生物生长 5 选择培养基是指 6 常用来统计样品中活菌数目的方法是 即当样品的稀释度足够高 时 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的 通过统计平板上 的菌落数 就能推测出样品中大约含有多少活菌 为了保证结果准确 一般选择菌落数 在 的平板进行计数 另外 也是测定微生物数量的常用方法 8 一般来说 统计的菌落数往往比活菌的实际数目 这是因为 因此 统计结果一般用 而不是活菌数来表 示 9 设置对照实验的主要目的是 提高实验结果的可 信度 10 对照实验是 15 对所需的微生物进行初步筛选 只是分离纯化菌种的第一步 要对分离的菌种进行 一步的鉴定 还需要借助 的方法 精品文档 4欢迎下载 课题 3 分解纤维素的微生物的分离 二 基础知识 一 纤维素和纤维素酶 纤维素酶是一种 一般认为它至少包括三种组分 二 纤维素分解菌的筛选 阅读课本课本 28 页相关部分 回答下列问题 1 纤维素分解菌的筛选方法 这种方法能够通过颜色反应直接对微生物 进行筛选 2 纤维素分解菌的筛选方法的原理 刚果红是一种染料 它可以与纤维素形成 但并不和 发生 这种反应 当纤维素被纤维素酶分解后刚果红 纤维素的复合物就无法形成 培养基中 会出现以纤维素分解为中心的 这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤 维素分解菌 一 土壤取样 选择 的环境 如树林中多年落叶形成的腐殖土 多年积累的枯枝败叶等等 根 据生物与环境的互相依存关系 在富含纤维素的环境中 的含量相对提高 因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境 二 选择培养 1 选择培养的目的 增加 以确保能够从样品中分离到所需要的微生物 五 课题延伸 本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选 但是这只是分离纯化的第一步 为确 定得到的是纤维素分解菌 还需要进行 的实验 纤维素酶的测定方法一般 是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的 进行定量的测定 巩固提升 课题 2 多聚酶链式反应扩增 DNA 片段 一基础知识 1 PCR 原理 填写下列表格 参与的组分在 DNA 复制中的作用 解旋酶 DNA 母链 合成子链的原料 DNA 聚合酶 引物 DNA 的两条链是反向平行的 通常将 DNA 的羟基末端称为 而磷酸基团的末端称 为 DNA 聚合酶不能 开始合成 DNA 而只能 因此 DNA 复制需要引物 DNA 的合成方向总是 精品文档 5欢迎下载 在 DNA 的复制过程中 复制的前提是 在体外可通过 控制 来实现 在 的温度范围内 DNA 的双螺旋结构将解体 双链分 开 这个过程称为 PCR 利用了 DNA 的 原理 通过控制温度来控 制双链的解聚与结合 由于 PCR 过程的温度高 导致 DNA 聚合酶失活 后来 的 DNA 聚合酶的发现和应用 大大增加了 PCR 的效率 PCR 反应需要在一定的缓冲溶液中提供 同时通过控制温度使 DNA 复制在体外反 复进行 2 PCR 的反应过程 PCR 一般要经历 循环 每次循环可以分为 和 三 步 从第二轮循环开始 上一次循环的产物也作为模板参与反应 并且由 延伸而成的 DNA 单链会与 结合 进行 DNA 的延伸 这样 DNA 聚合酶只能 使这段固定长度的序列成指数扩增 3 实验操作 在实验室中 做 PCR 通常使用 它是一种薄壁塑料管 具体操作时 用微 量移液器 按 PCR 反应体系的配方在 中依次加入各组分 再参照下表的设 置设计好 PCR 仪的循环程序即可 4 操作提示 为避免外源 DNA 等因素的污染 PCR 实验中使用的 以及蒸 馏水等在使用前必须进行 PCR 所用的缓冲液和酶应分装成小份 并在 储存 使用前 将所需试剂从冰箱拿出 放在冰块上缓慢融化 在微量离心管中 添加反应成分时 移液管上的枪头要 课题 3 血红蛋白的提取和分离 一 基础知识 一 凝胶色谱法 1 凝胶色谱法也称做 是根据 分离蛋白质的有 效方法 2 凝胶实际上是一些微小的 球体 这些小球体大多数是由 构成的 如葡聚糖或琼脂糖 3 在小球体内部有许多贯穿的通道 相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度 不同 相对分子质量 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道 路程 移动速度 而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道 只能在 移动 路程 移动速度 相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离 二 缓冲溶液 1 缓冲溶液的作用是 2 缓冲溶液通常由 溶解于水中配制而成的 3 生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的 pH 下进行的 为了 必须保持体外的 pH 与体内的 三 电泳 精品文档 6欢迎下载 1 电泳是指 2 许多重要的生物大分子 如多肽 核酸等都具有可解离的基团 在一定的 pH 下 这 些基团会带上 在电场的作用下 这些带电分子会向着与其所带电荷 的电 极移动 电泳利用了待分离样品中各分子 的差异以及分子本身的 的 不同 使带电分子产生不同的 从而实现样品中各种分子的分离 3 两种常用的电泳方法是 和 在凝胶中加入 SDS 电泳速 率完全取决于 二 实验操作 蛋白质的提取和分离一般分为四步 和 一 样品处理 1 红细胞的洗涤 洗涤红细胞的目的是 采集的血样要及时 分离红细胞 2 血红蛋白的释放 在 和 作用下 红细胞破裂释放出血红蛋白 3 分离血红蛋白溶液 将搅拌好的混合溶液离心 2000r min 后 试管中的溶液分 为 4 层 第一层为无色透明的 第 2 层为白色薄层固体 是 第 3 层是红色透明液体 这是 第 4 层是 的暗红色沉淀物 将试 管中的液体用滤纸过滤 除去脂溶性沉淀层 于分液漏斗中静置片刻后 分出下层的 二 粗分离 透析 取 1mL 的血红蛋白溶液装入 中 将透析袋放入盛有 300mL 的物质的量的浓度 为 20mmol L 的 PH7 0 中 透析 12h 透析可以去除样品中 的杂质 或用于更换样品的缓冲液 三 纯化 凝胶色谱操作 1 制作凝胶色谱柱 2 装填凝胶色谱柱 3 样品的加入和洗脱 四 纯度鉴定 三 操作提示 1 红细胞的洗涤 洗涤次数 离心速度与离心时间十分重要 洗涤次数过少 无法除 去 离心速度过高和时间过长会使 一同沉淀 达不到分离的效果 2 色谱柱填料的处理 商品凝胶使干燥的颗粒 使用前需直接放在洗脱液中膨胀 为 了加速膨胀 可以将加入洗脱液的湿凝胶用 加热 逐渐升温至接近沸腾 通常 只需 1 2h 这种方法不但 而且可以除去凝胶中可能带有的 排 除胶粒内的 3 凝胶色谱柱的装填 在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量 以降低凝胶颗粒

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