标准缓冲液的配制方法

标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 1 标准缓冲液的配制及常用数据标准缓冲液的配制及常用数据 一 标准缓冲液一 标准缓冲液 pHpH 值与温度对照表值与温度对照表 温度 四草酸氢钾 0 05M 邻苯二甲酸氢钾 0 05M 混合磷酸盐 0 025M 硼砂 0 01M 51 674 006 959 39 101 674 006 029 33 151 674 006 909 28 201 684 006 889 23 251 684 006 869 18 301 684 016 859 14 351 694 026 849 11 二 常用缓冲溶液的配制方法二 常用缓冲溶液的配制方法 1 甘氨酸甘氨酸 盐酸缓冲液 盐酸缓冲液 0 05mol L X 毫升 0 2 mol L 甘氨酸 Y 毫升 0 2 mol L HCI 再加水稀释至 200 毫升 pHXYpHXY 2 0 2 4 2 6 2 8 50 50 50 50 44 0 32 4 24 2 16 8 3 0 3 2 3 4 3 6 50 50 50 50 11 4 8 2 6 4 5 0 甘氨酸分子量 75 07 0 2 mol L 甘氨酸溶液含 15 01 克 升 2 邻苯二甲酸 邻苯二甲酸 盐酸缓冲液 盐酸缓冲液 0 05 mol L X 毫升 0 2 mol L 邻苯二甲酸氢钾 0 2 mol L HCl 再加水稀释到 20 毫升 pH 20 XYpH 20 XY 2 2 2 4 2 6 2 8 3 0 5 5 5 5 5 4 070 3 960 3 295 2 642 2 022 3 2 3 4 3 6 3 8 5 5 5 5 1 470 0 990 0 597 0 263 邻苯二甲酸氢钾分子量 204 23 0 2 mol L 邻苯二甲酸氢溶液含 40 85 克 升 3 3 磷酸氢二钠 磷酸氢二钠 柠檬酸缓冲液柠檬酸缓冲液 pH0 2mol L Na2HPO4 毫升 0 1mol L 柠檬酸 毫升 pH0 2mol L Na2HPO4 毫升 0 1mol L 柠檬酸 毫升 2 2 2 4 2 6 2 8 3 0 3 2 3 4 3 6 3 8 4 0 4 2 4 4 4 6 4 8 5 0 0 40 1 24 2 18 3 17 4 11 4 94 5 70 6 44 7 10 7 71 8 28 8 82 9 35 9 86 10 30 10 60 18 76 17 82 16 83 15 89 15 06 14 30 13 56 12 90 12 29 11 72 11 18 10 65 10 14 9 70 5 2 5 4 5 6 5 8 6 0 6 2 6 4 6 6 6 8 7 0 7 2 7 4 7 6 7 8 8 0 10 72 11 15 11 60 12 09 12 63 13 22 13 85 14 55 15 45 16 47 17 39 18 17 18 73 19 15 19 45 9 28 8 85 8 40 7 91 7 37 6 78 6 15 5 45 4 55 3 53 2 61 1 83 1 27 0 85 0 55 Na2HPO4分子量 14 98 0 2 mol L 溶液为 28 40 克 升 Na2HPO4 2H2O 分子量 178 05 0 2 mol L 溶液含 35 01 克 升 标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 2 C4H2O7 H2O 分子量 210 14 0 1 mol L 溶液为 21 01 克 升 4 4 柠檬酸 柠檬酸 氢氧化钠氢氧化钠 盐酸缓冲液盐酸缓冲液 pH钠离子浓度 mol L 柠檬酸 克 C6H8O7 H2O 氢氧化钠 克 NaOH 97 盐酸 毫升 HCl 浓 最终体积 升 2 2 3 1 3 3 4 3 5 3 5 8 6 5 0 20 0 20 0 20 0 20 0 35 0 45 0 38 210 210 210 210 245 285 266 84 83 83 83 144 186 156 160 116 106 45 68 105 126 10 10 10 10 10 10 10 使用时可以每升中加入 1 克克酚 若最后 pH 值有变化 再用少量 50 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节 冰箱保存 5 5 柠檬酸 柠檬酸 柠檬酸钠缓冲液柠檬酸钠缓冲液 0 1 mol L pH0 1 mol L 柠檬酸 毫升 0 1 mol L 柠檬酸钠 毫升 pH0 1 mol L 柠檬酸 毫升 0 1 mol L 柠檬酸钠 毫升 3 0 3 2 3 4 3 6 3 8 4 0 4 2 4 4 4 6 4 8 18 6 17 2 16 0 14 9 14 0 13 1 12 3 11 4 10 3 9 2 1 4 2 8 4 0 5 1 6 0 6 9 7 7 8 6 9 7 10 8 5 0 5 2 5 4 5 6 5 8 6 0 6 2 6 4 6 6 8 2 7 3 6 4 5 5 4 7 3 8 2 8 2 0 1 4 11 8 12 7 13 6 14 5 15 3 16 2 17 2 18 0 18 6 柠檬酸 C6H8O7 H2O 分子量 210 14 0 1 mol L 溶液为 21 01 克 升 柠檬酸钠 Na3 C6H5O7 2H2O 分子量 294 12 0 1 mol L 溶液为 29 41 克 毫升 6 6 乙酸 乙酸 乙酸钠缓冲液 乙酸钠缓冲液 0 2 mol L pH 18 0 2 mol L NaAc 毫升 0 3 mol L HAc 毫升 pH 18 0 2 mol L NaAc 毫升 0 3 mol L HAc 毫升 2 6 3 8 4 0 4 2 4 4 4 6 0 75 1 20 1 80 2 65 3 70 4 90 9 25 8 80 8 20 7 35 6 30 5 10 4 8 5 0 5 2 5 4 5 6 5 8 5 90 7 00 7 90 8 60 9 10 9 40 4 10 3 00 2 10 1 40 0 90 0 60 Na2Ac 3H2O 分子量 136 09 0 2 mol L 溶液为 27 22 克 升 7 7 磷酸盐缓冲液 磷酸盐缓冲液 1 磷酸氢二钠 磷酸二氢钠缓冲液 0 2 pH 0 2 mol L Na2HPO4 毫升 0 3 mol L NaH2PO4 毫升 pH 0 2 mol L Na2HPO4 毫升 0 3 mol L NaH2PO4 毫升 5 8 5 9 6 0 6 1 6 2 6 3 6 4 6 5 6 6 6 7 6 8 6 9 8 0 10 0 12 3 15 0 18 5 22 5 26 5 31 5 37 5 43 5 49 5 55 0 92 0 90 0 87 7 85 0 81 5 77 5 73 5 68 5 62 5 56 5 51 0 45 0 7 0 7 1 7 2 7 3 7 4 7 5 7 6 7 7 7 8 7 9 8 0 61 0 67 0 72 0 77 0 81 0 84 0 87 0 89 5 91 5 93 0 94 7 39 0 33 0 28 0 23 0 19 0 16 0 13 0 10 5 8 5 7 0 5 3 Na2HPO4 2H2O 分子量 178 05 0 2 mol L 溶液为 35 61 克 升 标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 3 Na2HPO4 12H2O 分子量 358 05 0 2 mol L 溶液为 71 61 克 升 NaH2PO4 2H2O 分子量 156 01 0 2 mol L 溶液为 31 202 克 升 2 磷酸氢二钠 磷酸二氢钾缓冲液 1 15 mol L pHmol L 15Na2HPO4 毫升 mol L 15KH2PO4 毫升 pHmol L 15Na2HPO4 毫升 mol L 15KH2PO4 毫升 4 92 5 29 5 91 6 24 6 47 6 64 6 81 6 98 0 10 0 50 1 00 2 00 3 00 4 00 5 00 6 00 9 90 9 50 9 00 8 00 7 00 6 00 5 00 4 00 7 17 7 38 7 73 8 04 8 34 8 67 8 18 7 00 8 00 9 00 9 50 9 75 9 90 10 00 3 00 2 00 1 00 0 50 0 25 0 10 0 Na2HPO4 2H2O 分子量 178 05 1 15M 溶液为 11 876 克 升 KH2PO4分子量 136 09 1 15M 溶液为 9 078 克 升 8 8 磷酸二氢钾 磷酸二氢钾 氢氧化钠缓冲液 氢氧化钠缓冲液 0 05M0 05M X 毫升 0 2M K2PO4 Y 毫升 0 2N NaOH 加水稀释至 29 毫升 pH 20 X 毫升 Y 毫升 pH 20 X 毫升 Y 毫升 5 8 6 0 6 2 6 4 6 6 6 8 5 5 5 5 5 5 0 372 0 570 0 860 1 260 1 780 2 365 7 0 7 2 7 4 7 6 7 8 8 0 5 5 5 5 5 5 2 963 3 500 3 950 4 280 4 520 4 680 9 9 巴比妥钠 巴比妥钠 盐酸缓冲液 盐酸缓冲液 18 18 pH0 04M 巴比妥钠溶液0 2V 盐酸pH0 04M 巴比妥钠溶液 毫升 0 2N 盐酸 毫升 6 8 7 0 7 2 7 4 7 6 7 8 8 0 8 2 100 100 100 100 100 100 100 100 18 4 17 8 16 7 15 3 13 4 11 47 9 39 7 21 8 4 8 6 8 8 9 0 9 2 9 4 9 6 100 100 100 100 100 100 100 100 5 21 3 82 2 52 1 65 1 13 0 70 0 35 巴比妥钠盐分子量 206 18 0 04M 溶液为 8 25 克 升 10 Tris 盐酸缓冲液 盐酸缓冲液 0 05M 25 50 毫升 0 1M 三羟甲基氨基甲烷 Tris 溶液与 X 毫升 0 1N 盐酸混匀后 加水稀释至 100 毫升 pHX 毫升 pHX 毫升 7 10 7 20 7 30 7 40 7 50 7 60 7 70 7 80 7 90 8 00 45 7 44 7 43 4 42 0 40 3 38 5 36 6 34 5 32 0 29 2 8 10 8 20 8 30 8 40 8 50 8 60 8 70 8 80 8 90 26 2 22 9 19 9 17 2 14 7 12 4 10 3 8 5 7 0 三羟甲基氨基甲烷 Tris HOCH2 CH2OH C HOCH2 NH2 分子量 121 14 1M 溶液为 12 114 克 升 Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳 使用时注意将瓶盖严 标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 4 1111 硼酸 硼酸 硼砂缓冲液 硼砂缓冲液 0 2M0 2M 硼酸根 硼酸根 pH0 05M 硼砂 毫升 0 2M 硼砂 毫升 pH0 05M 硼砂 毫升 0 2M 硼酸 毫升 7 4 7 6 7 8 8 0 1 0 1 5 2 0 3 0 9 0 8 5 8 0 7 0 8 2 8 4 8 7 9 0 3 5 4 5 6 0 8 0 6 5 5 5 4 0 2 0 硼砂 Na2B4O7 H2O 分子量 381 43 0 05M 溶液含 19 07 克 升 硼酸 H2BO3 分子量 61 84 0 2M 溶液为 12 37 克 升 硼砂易失去结晶水 必须在带塞的瓶中保存 硼砂硼砂 氢氧化钠缓冲液 氢氧化钠缓冲液 0 05M 硼酸根 硼酸根 X 毫升 0 05M 硼砂 Y 毫升 0 2NNaOH 加水稀释至 200 毫升 pH0 05M 硼砂 毫升 0 2NNaOH 毫升 pH0 05M 硼砂 毫升 0 2NNaOH 毫升 9 3 9 4 9 6 9 8 50 0 50 0 50 0 50 0 6 0 11 0 23 0 34 0 10 0 10 1 50 0 50 0 43 0 46 0 1212 甘氨酸 甘氨酸 氢氧化钠缓冲液 氢氧化钠缓冲液 0 05M0 05M X 毫升 0 2M 甘氨酸 Y 毫升 0 2NnaOH 加水稀释至 200 毫升 pHXYpHXY 8 6 8 8 9 0 9 2 9 4 50 50 50 50 50 4 0 6 0 8 8 12 0 16 8 9 6 9 8 10 0 10 4 10 6 50 50 50 50 50 22 4 27 2 32 0 38 6 45 5 甘氨酸分子量 75 07 0 2M 溶液含 15 01 克 升 1313 硼砂 硼砂 氢氧化钠缓冲液 氢氧化钠缓冲液 0 05M0 05M 硼酸根 硼酸根 X 毫升 0 05M 硼砂 Y 毫升 0 2NNaOH 加水稀释至 200 毫升 pHXYpHXY 9 3 9 4 9 6 50 50 50 6 0 11 0 23 0 9 8 10 0 10 1 50 50 50 34 0 43 0 46 0 硼砂 Na2B4O7 10H2O 分子量 381 43 0 05M 溶液为 19 07 克 升 1414 碳酸钠 碳酸钠 碳酸氢钠缓冲液 碳酸氢钠缓冲液 0 1M0 1M Ca2 Mg2 存在时不得使用 pH 20 37 0 1MNa2CO3 毫升 0 1MN2HCO3 毫升 9 16 9 40 9 51 9 78 9 90 10 14 10 28 10 53 10 83 8 77 9 12 9 40 9 50 9 72 9 90 10 08 10 28 10 57 1 2 3 4 5 6 7 8 9 9 8 7 6 5 4 3 2 1 Na2CO2 10H2O 分子量 286 2 0 1M 溶液为 28 62 克 升 N2HCO3分子量 84 0 0 1M 溶液为 8 40 克 升 1515 PBS PBS 缓冲液缓冲液 标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 5 PH7 67 47 27 0 H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 1000 8 5 2 2 0 1 1000 8 5 2 2 0 2 1000 8 5 2 2 0 3 100ml 8 5g 2 2g 0 4g 三 实验室中常用酸碱的比重和浓度三 实验室中常用酸碱的比重和浓度 名称分子式分子 量 比重面分浓度 W W 当量浓度 粗略 N配 1 升 1N 溶液所需 毫升数 盐酸HCl36 471 1937 212 084 1 1835 411 8 1 1020 06 0 硫酸H2SO498 091 8495 636 028 1 1824 86 0 硝酸HNO263 021 4270 9816 063 1 4065 314 5 1 2032 366 1 冰乙酸CH3COOH60 051 0599 517 459 乙酸CH3COOH98 06 366 0 磷酸H2PO435 051 7185 015 30 45 依反应而定 67 以 15N 计 氨水NH4OH 0 90 1567 0 90427 014 370 0 9125 013 4 0 9610 05 6 氢氧化钠溶液NaOH40 01 550 01953 四 硫酸铵饱和度的常用表四 硫酸铵饱和度的常用表 1 调整硫酸铵溶液饱和度计算表 调整硫酸铵溶液饱和度计算表 25 硫整硫酸铵终浓度 饱和度 10202530333540455055606570758090100 每 1 升溶液加固体硫酸铵的克数 056114144176196209243277313351390430472516561662767 10 5786118137150183216251288326365406449494592694 20 29597891123155190225262300340382424520619 25 30496193125158193230267307348390485583 30 19306294127162198235273314356449546 33 124374107142177214252292333426522 35 316394129164200238178319411506 40 316397132168205245285375469 45 326599134171210250339431 50 3366101137176214302392 55 3367103141179264353 60 3469105143227314 65 3470107190275 70 3572153237 75 36115198 80 77157 硫 酸 铵 初 浓 度 饱 和 度 90 79 在 25 下 硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时 每升溶液所加固体硫酸铵的克数 2 调整硫酸铵溶液饱和度计算表 调整硫酸铵溶液饱和度计算表 0 标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 6 在 0 下 硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时 每 100 毫升溶液所加固体硫酸铵的克数 常见蛋白质分子量参考值常见蛋白质分子量参考值 单位 单位 daltondalton 蛋白质分子量 肌球蛋白 myosin 甲状腺球蛋白 thyroglobulin 半乳糖苷酶 galactosidase 副肌球蛋白 paramyosin 磷酸化酶 a phosphorylase a 血清白蛋白 serum albumin L 氨基酸氧化酶 L amino acid oxidase 地氧化氢酶 catalase 丙酮酸激活酶 pyruvate kinase 谷氨酸脱氢酶 glutamate dehydrogenase 亮氨酸氨肽酶 glutamae dehydrogenase 球蛋白 H 链 globulin H chain 延胡索酸酶 反丁烯二酸酶 fumarase 卵白蛋白 ovalbumin 醇脱氢酶 肝 alcohol dehydrogenase liver 烯醇酶 enolase 醛缩酶 aldolase 肌酸激酶 creatine kinase 胃蛋白酶原 pepsinogen D 氨基酸氧化酶 D amino acid oxidase 醇脱氢酶 酵母 alcohol dehydrogenase yeast 甘油醛磷酸脱氢酶 dlyceraldehyde phosphate dehydrogenase 原肌球蛋白 tropomyosin 乳酸脱氢酶 lactate dehydrgenase 胃蛋白酶 pepsin 转磷酸核糖基酶 phosphoribosyl transferase 天冬氨酸氨甲酰转移酶 C 链 aspertate transcarbamylase C chain 羧肽酶 A carboxypeptidase A 碳酸酐酶 carbonic anhydrase 枯草杆菌蛋白酶 subtilisin 220 000 165 000 130 000 100 000 94 000 68 000 63 000 60 000 57 000 53 000 53 000 50 000 49 000 43 000 41 000 41 000 40 000 40 000 40 000 37 000 37 000 36 000 36 000 36 000 35 000 35 000 34 000 34 000 29 000 27 600 标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 7 球蛋白 L 链 blobulin L chain 糜蛋白酶原 胰凝乳蛋白酶原 chymotrypsinogen 胰蛋白酶 trypsin 木瓜蛋白酶 羧甲基 papain carboxymethyl 乳球蛋白 lactoglobulin 烟草花叶病毒外壳蛋白 TWV 外壳蛋白 TWV coat protein 肌红蛋白 myoglobin 天门冬氨酸氨甲酰转移酶 R 链 aspartate transcarbamylase R chain 血红蛋白 h a emoglobin Q 外壳蛋白 Q coat protein 溶菌酶 lysozyme R17外壳蛋白 R17 coat protein 核糖核酸酶 ribonuclease 或 RNase 细胞色素 C cytochrome C 糜蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 chymotrypsin 23 500 25 700 23 300 23 000 18 400 17 500 17 200 17 000 15 500 15 000 14 300 13 750 13 700 11 700 11 000 或 13 000 常见蛋白质等电点参考值常见蛋白质等电点参考值 单位 单位 pHpH 蛋白质等电点 鲑精蛋白 salmine 鲱精蛋白 clupeine 鲟精蛋白 sturline 胸腺组蛋白 thymohistone 珠蛋白 人 globin human 卵白蛋白 ovalbuin 伴清蛋白 conal bumin 血清白蛋白 serum albumin 肌清蛋白 myoal bumin 肌浆蛋白 myogen A 乳球蛋白 lactoglobulin 卵黄蛋白 livetin 1 球蛋白 人 1 globulin human 2 球蛋白 人 2 globulin human 肌球蛋白 A myosin A 原肌球蛋白 myosin A 铁传递蛋白 siderophilin 胎球蛋白 fetuin 血纤蛋白原 fibrinogen 眼晶体蛋白 crystallin 眼晶体蛋白 crystallin 花生球蛋白 arachin 伴花生球蛋白 conarrachin 角蛋白类 keratins 还原角蛋白 keratein 胶原蛋白 collagen 鱼胶 ichthyocol 白明胶 gelatin 酷蛋白 casein 酷蛋白 casein 酷蛋白 casein 卵清粘蛋白 ovomucoid 1 粘蛋白 1 mucoprotein 卵黄类粘蛋白 vitellomucoid 尿促性腺激素 urinary gonadotropin 溶菌酶 lyso zyme 肌红蛋白 myoglobin 血红蛋白 人 hemoglobin human 血红蛋白 鸡 hemoglobin hen 血红蛋白 马 hemoglobin horse 12 1 12 1 11 71 10 8 7 5 4 71 4 59 6 8 7 1 4 7 4 9 3 5 6 3 5 1 5 3 4 8 5 0 5 8 6 6 7 3 8 2 5 2 5 5 5 1 5 9 3 4 3 5 5 5 5 8 4 8 6 0 5 1 3 9 3 7 5 0 4 6 4 7 6 5 6 8 4 8 5 2 4 7 5 0 4 0 4 1 4 5 5 8 6 0 3 83 4 41 1 8 2 7 5 5 3 2 3 3 11 0 11 2 6 99 7 07 7 23 6 92 标准缓冲液的配制及常用数据 2004 11 8 血蓝蛋白 hemerythrin 蚯蚓血红蛋白 chlorocruorin 血绿蛋白 chlorocruorin 无脊椎血红蛋白 erythrocruorins 细胞色素 C cytochrome C 视紫质 rhodopsin 促凝血酶原激酶 thromboplastin 1 脂蛋白 1 lipoprotein 1 脂蛋白 1 lipoprotein 卵黄脂磷蛋白 lipovitellin 芜菁黄花病毒 turnip yellow vvirus 牛痘病毒 vaccinia virus 生长激素 somatotropin 催乳激素 prolactin 胰岛素 insulin 胃蛋白酶 pepsin 糜蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 chymotrypsin 牛血清白蛋白 bovine serum albumin 核糖核酸酶 牛胰 ribonuclease 或 Rnase bovine pancreas 甲状腺球蛋白 thyroglobulin 胸腺核组蛋白 thymonucleohistone 4 6 6 4 5 6 4 3 4 5 4 6 6 2 9 8 10 1 4 47 4 57 5 2 5 5 5 4 5 9 3 75 5 3 6 85 5 73 5 35 1 0 左右 8 1 4 9 7 8 4 58 4 左右 元素的原子量表元素的原子量表 录自 1997 年国际原子量表 并全部取四位有效数字 元素符号原子量原子序数 锕 银 铝 镅 氩 砷 砹 金 硼 钡 铍 铋 锫 溴 碳 钙 镉 铈 锎 氯 锔 钴 铬 铯 铜 镝 镊 锿 铕 氟 铁 镄 Ac Ag Al Am Ar As At Au B Ba Be Bi Bk Br C Ca Cd Ce Cf Cl Cm Co Cr Cs Cu Dy Er Es Eu F Fe Fm 227 0 107 9 26 98 243 39 95 74 92 210 197 0 10 81 137 3 9 012 209 0 247 79 90 12 01 40 08 112 4 140 1 251