广西地方标准《陆生野生动物疫病采样技术规程》（征求意见稿）编制说明

广西地方标准陆生野生动物疫病采样技术规程（征求意见稿）编制说明一、任务来源本标准是广西壮族自治区质量技术监督局广西壮族自治区质量技术监督局关于下达2016年第一批广西地方标准制定（修订）项目计划的通知（桂质监函2016号）下达的项目，由广西壮族自治区林业厅提出，广西陆生野生动物救护研究与疫源疫病监测中心、南宁市动物园负责起草。合同编号：2016-06025，起止年限：2017.01-2017.12。二、目的和意义动物疫病多种多样，农业部2008年12月11日颁布的一、二、三类动物疫病病种名录中指出一类动物疫病有17种、二类动物疫病77种、三类动物疫病63种，其中大部分的疫病来自于畜禽类，人类可知的野生动物感染的疫病甚少，但随着圈养野生动物的增多和野外研究力度的加大，报道的易感野生动物物种范围也在不断的扩大，跨物种交叉感染的病例越来越多，受科研技术、经费、野生动物习性等因素的限制，大部分野生动物疾病种类尚无法可知，研究和保育人员在进行疾病诊断、护理、解剖等医疗行为中，面对较大的交叉感染风险，对公共卫生安全造成严重威胁。对患病野生动物进行救治并对死亡野生动物进行解剖和检验的工作，可以有效推动野生动物医学的发展。目前广西野生动物研究机构甚少，野生动物疫源疫病监测单位的从业人员多是基层一线的技术人员，采样和防护技术参差不齐，缺乏统一的标准，从业人员职业暴露风险较高。为此，有必要制定科学合理的本地化疫病采样技术标准，约束医疗行为，增强个人防护系数，规避生物风险，指导和规范广西及周边各地的野生动物疫病采样工作及其行为，对推进广西野生动物疫病研究工作将起到重要作用。三、国内外标准对比情况2014年12月1日开始实施的国家林业局野生动物疫源疫病监测总站起草、国家林业局发布的陆生野生动物疫源疫病监测技术规范（标准号LY/T 2359-2014），该标准规定了疫病监测、样品采集、样本保存、包装盒检测、安全防护、信息报告、应急处理等内容和要求，其中对疫病采样有部分述写。四、 标准的编制原则和依据标准制订以推进野生动物疫病采样技术规范化、科学化、高效化为目标，遵循科学性、先进性、合理性和适用性的原则，力求做到科学规范、指标准确、可操作性强，既与国家相关标准接轨，又符合广西区情。标准按中华人民共和国国家标准GB/T 1.12009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则的要求进行编写。野生动物疫病采样技术规程标准主要遵循以下原则：（一） 科学性原则以野生动物疫病采样技术研究为依据，在反复实践操作和广泛征求意见的基础上，参考动物疫病采样技术和野生动物疫源疫病监测技术文献资料的研究成果及技术参数，向野生动物疫病采样技术专家咨询意见，再根据审查意见对标准进行修订，制定标准。（二） 可操作性原则从野生动物疫病采样技术的实际出发，充分考虑疫病采样的设施条件和技术要求，确保标准的技术条件和经济条件可行性。（三） 协调性原则标准在制定的过程中，充分考虑全区野生动物疫病采样技术的地域差异，制定的采样技术措施与当前疫病检测和防控要求保持一致，与现行相关国家法律法规、国家标准、行业标准保持协调一致。五、编制过程编制人员自1997年开始，开展动物疫病采样技术的临床研究和相关资料收集。标准制定单位拥有专业的兽医团队，有丰富的处理野生动物救护及临床治疗的经验，并配备了专业的实验室，有专业的化验员和各种仪器设备，先后建立了临床检测实验室2间，分子检测实验室1间，建立职责分明的兽医队伍，其中临床兽医10人，实验室兽医5人，开展野生动物疾病救治、样本采集、保存和运送、样本检测、个人防护、应急处置的相关研究，年采集和检测样本量达5000份，积累大量的操作经验。2016年项目下达后，南宁市动物园和广西壮族自治区野生动物救护研究与疫源疫病监测中心即成立了标准编制小组，开始实施标准项目的组织协调和标准编制工作。标准编制小组依据中华人民共和国标准化法、标准化工作导则汇编、标准制定有关文件资料和广西壮族自治区地方标准管理规定要求，详细学习了GB/T 1.12009、GB/T 1.22002等基础标准，研究确定了标准编写的原则和技术路线，根据项目计划进度要求，确定了标准编写的原则和技术路线，并有序地组织开展标准的编制工作。（一）工作组讨论稿（第一阶段）本标准各项技术指标确定的依据，主要来自多年来起草单位执行的 “南宁市动物园实验室技术操作规程”等工作经验以及有关疫病监测采样等方面发表的论文等，并参照了国内已经发布的有关标准。2017年7月至2018年6月，编制组在野生动物疾病采样技术多年来的实践经验和研究资料进行汇合、分析和总结基础上，对疫病采样的关键技术进行了完善、补充和进一步整理，确定了广西地方标准的基本内容和思路。并经过编制小组成员反复研讨，形成了标准的编制原则及纲要。以试验数据、调查材料为依据，对收集的资料进行分析研究和处理，经反复讨论和修改，不断完善，形成了工作组讨论稿。（二）征求意见稿（第二阶段）1、征求意见稿第一稿2018年6月，召开编制小组第一次会议，通过标准编制工作方案，明确编制小组成员，确定任务分工以及进度安排。会议对工作组讨论稿的框架、条款、技术参数等进行了讨论，修改形成征求意见稿第一稿。2、征求意见稿第二稿2019年8月，以已颁布的规范性文件为参考，如：LY/T 2359陆生野生动物疫源疫病监测规范、NY/T541动物疫病实验室检验采样方法、NY/T 768高致病性禽流感人员防护技术规范、GB/T 18635 动物防疫基本术语，结合动物园对野生动物疫病采样技术的工作经验，修改本标准，并向科研院校、野生动物救护中心、动物园等单位的专家咨询意见，组内讨论提出完善修改意见，形成了征求意见稿第二稿。3、形成征求意见稿第三稿2019年12月，通过网络等途径面向社会征求意见，召开征求意见会，主要起草人员对收集的意见进行汇总讨论，并对征求意见稿第二稿进行补充和完善，形成征求意见稿第三稿。六、标准主要内容及说明马尾松采脂技术规程主要内容包括五个方面：1 样品采样的一般原则；2 采样前的准备；3 样品采样；4 不同检测目的的样品采样基本要求；5样品包装和采样单、送样单的填写；6.样品保存和运输；7.废弃物的无害化处置。 第1章说明了标准的主要技术内容和适用范围；第2章标注了引用的林业行业标准11项；第3章规范了野生动物疫病采样的定义；第4章规定了野生动物疫病采样的原则；第5章规范了野生动物疫病采样的基本条件； 第6章规定了疫病采样技术；第7章规定了不同检测目的的采样要求；第8章规范了样品的包装和采样单、送样单的填写要求；第九章规定了样品保存和运输要求；第十章规定了废弃物的无害化处置方法。（一）样本采集的一般原则规定了适合野生动物疫病采样部门、采样审批、采样强度、采样地点、采样动物、采样时间范围与条件。经过1997年始至2019年分别在南宁市动物园和广西壮族自治区野生动物救护研究和疫源疫病监测中心的样本采集工作研究，经验表明样本质量和安全与采样部门技术等级、采样强度、采样动物、采样部位、采样时间、采样数量有密切关系，动物疫病采样资质需要审批，对于禁止解剖的动物疫病严禁采样，重大动物疫情的采样由上级野生动物疫源疫病监测管理机构指导和组织采样，对于国家级或升级重点保护野生动物，紧急情况下实行死亡动物采样与报批同步；死亡动物样本采集时间夏季应在死亡6h内，冬季应在24h内；检测疫苗保护效价采样时间应在免疫后10-15d内；采集的样本至少一式2份以上。（二）采样前的准备规定了样本采集箱、解剖器械箱、其他物品、记录材料、防护用品、消毒要求、人员防护措施7个方面准备工作。（三）样本采集从血液样本、其他组织样本、内容物或粪便、胃液及内容物、拭子样本采集与保存、胎儿、脑和脊髓、液体样本、环境样本9个方面进行了规定和阐述。（1）血液样本血液样本采集规定了采血部位、采血方法以及不同血液样本的处理方法。采集血液样本需加入抗凝剂，采样时连续缓慢充分混合；采集血清样本不用抗凝剂，采集的血液在离心管中放在室温下静置至血液凝固，血清析出；采集血浆样本需加入抗凝剂，采集血液后，使血液和抗凝剂充分混合，然后以2500-3000rpm恒温低速离心3min，抽取上清液即为血浆。（2）其他组织样本使用消毒的器械直接采集皮肤及其皮肤附属组织、肌肉及其内脏组织，采集肠道组织时使用生理盐水冲洗弃去内容物后取样。（3）内容物或粪便烧烙组织表面，用1.2mm针头的一次性灭菌注射器抽取肠内容物，直接采集新鲜粪便，放入灭菌的30%甘油磷酸缓冲液保存送检。（4）胃液和内容物规范了单胃动物、反刍动物、死亡动物的采样方法，直接使用灭菌注射器采样。（5）拭子样本采集与保存规范了呼吸道、肛门或泄殖腔、生殖道、眼睛拭子的采样技术和样本保存方法。（6）其他样本规范了采集胎儿、脑和脊髓、环境样本的采集送检方法。（7）液体样本规范了胆汁、脓液、粘液、关节液、乳汁、精液、尿液的采样技术，培养和涂片检查的样本采集方法。（四） 不同检测目的的样本采集基本要求规定了病原分离样本、基因测序样本、组织病理检查样本、寄生虫检查样本的采集技术内容。（五） 样品包装和采样单、送样单的填写规定了样品的包装要求，规范了采样单、送样单填写的要求。（六） 样品保存和运输规定了样品保存和运输条件。（七） 废弃物的无害化处置规范了动物残骸、采样废弃物、器械等的无害化处置方法。七、贯彻标准的要求、措施和建议广西作为全国野生动物物种第二丰富的边境地区，疫情防控形势较为严峻。标准颁布后，建议相关部门组织有关疫情监测的管理和巡查人员学习、掌握疫病采样技术的要求，切实做好贯彻工作。同时建议各级林业主管部门加强宣传和管理，让群众看到疫情的危害和防控重要意义，从而自觉遵守规程。八、引用的标准及参考的文献（一）引用标准标准编写过程中，引用的现行有效的国家标准如下：（1）GB/T18935 口蹄疫诊断技术（2）GB/T18936 高致病性禽流感诊断技术（3）GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术（4）GB/T18645 动物结核病诊断技术（5）GB16550 新城疫检疫技术规范（6）NY/T561 动物炭疽诊断技术（7）NY/T557 马鼻疽诊断技术（8）NY/T541 动物疫病实验室检验采样方法（9）NY/T 768 高致病性禽流感人员防护技术规范（10）LY/T2359 陆生野生动物疫源疫病监测技术规范（11）GB/T 18635 动物防疫基本术语（12）LY/T 1959陆生野