SRDP实验报告范文

srdpsrdp 实验报告范文实验报告范文 一 一 实验目的实验目的 测定酸模 香蒲 毛茛 青岛藨草 绿萝 5 种湿地植物在 污水净化过程中根内酸性磷酸酶 碱性磷酸酶和脲酶活力 二 实验方法二 实验方法 1 磷酸酶测定方法 1 根中酸性磷酸酶的测定 2 根中碱性磷酸酶 3 水中酸性 磷酸酶 4 水中碱性磷酸酶 2 脲酶测定方法 1 1 1 根中脲酶活性 奈氏试剂显色法 2 水中脲酶活性 同根中脲酶活性测定方法 但酶液是直接取 0 5 ml 的污水 三 三 实验材料及试剂实验材料及试剂 1 实验材料 实验室条件下用自制污水培养的 5 种湿地植物 自移植至实 验室新生出的根系要达到一定量 2 实验中使用的污水是自配污水 配方如下 水 1l 淀粉 0 067g 葡萄糖 0 05g 蛋白胨 0 033g 牛肉膏 0 017g na2co3 10h2o 无水 0 02g 0 067g nahco30 02g na3po40 017g 尿素 0 022g nh4 2so4 0 028g 3 实验试剂 磷酸酶 脲酶测定过程中需要试剂 0 2mol l ph7 8 磷酸缓冲液 0 2mol l 1 ph 5 8 醋酸钠缓冲液 称取醋酸钠 16 406g 容量瓶定容至 1l 用 0 3 mol l 的醋 酸溶液调节 ph 5 8 用 ph 计校正 3n naoh 溶液 0 05mol l 1 ph 8 7tris 盐酸缓冲液缓冲液 称取 12 114 克 tris 容量瓶定容至 1l 取 50 毫升 0 1m 三 羟甲基氨基甲烷 tris 溶液与 10 3 毫升 0 1n 盐酸混匀后 加水 稀释至 100 毫升 再用 ph 计校正 奈氏试剂 称取 7g 碘化钾溶于 10 ml 水中 将 10g 碘化 汞溶于其中 在 100ml 容量瓶中配置氢氧化钾溶液 称取 24 4g 加入含有 70 ml 水的容量瓶中 放置冷却 把配好的碘化钾和 碘化汞溶液缓缓加入容量瓶 加入的同时要慢慢摇动 加水稀 释至刻度 然后摇匀 将溶液盛放在棕色玻璃瓶中置暗处保存 两天后再使用 10 三氯乙酸 10 酒石酸钾钠 4 实验仪器 高温消解器 紫外分光光度计 离心机 恒温水浴锅 ph 计 研钵 高压灭菌锅 50ml 具塞 磨口 刻度管 四 四 实验过程实验过程 1 系统设置 取 30 个 1l 容量的大烧杯 洗净 将生长态势比较一致的 5 种植物从清水中取出 植物根部用 15 的双氧水灭菌处理 10 分钟后 用蒸馏水清洗干净 按照每组湿地植物湿重相等的原 则 放入大烧杯 将烧杯分成 5 组 分别栽种香蒲 绿萝 青 岛藨草 酸模 毛茛 每一组由两小组组成 栽种香蒲的两小 组编号为 x 和 x0 栽种绿萝的两小组编号为 l 和 l0 栽种青岛 藨草的两小组编号为 q 和 q0 栽种酸模的两小组编号为 s 和 s0 栽种毛茛的两小组编号为 m 和 m0 每组中前者中加入 250ml 自配污水 后者作为对照加入等量的自来水 2 测定方法 2 1 磷酸酶测定方法 2 1 1 根中酸性磷酸酶 酶液提取 称取植物根系材料 0 1g 放入研钵 再向其中 加入 1ml 磷酸缓冲液 ph7 8 小心研磨至匀浆 再将其全部吸 入离心管中 在 0 下 1200r min 转速的条件下 离心 30min 上清液为待测液 取 0 5 ml 具体方法 取配置好的 ph 为 5 8 的 0 2mol l 1 醋酸钠缓 冲液 70ml 以之为溶剂配成浓度为 0 15g l 1 对硝基苯磷酸二 钠 pnpp 酶反应液 加入 0 5 ml 酶液后将其用黑纸包裹 置于 25 下培养 1 小时 向其中加入 1ml3n naoh 溶液 以终止酶 促反应 使用 1860s 紫外可见分光光度计在 405nm 波长处进 行比色测定 在单位时间内单位重量鲜根水解 pnpp 生成的 pnp 量来表示酶活性 g h 1 g 1 鲜根 2 1 2 根中碱性磷酸酶 测定方法与酸性磷酸酶的类似 唯 一的区别是酶反应液是由 tris hcl 缓冲液 ph 8 7 配制的 2 1 3 水中酸性磷酸酶 取 0 5 ml 污水作为水中酸性磷酸酶 的酶液 具体方法同根中酸性磷酸酶 2 1 4 水中碱性磷酸酶 取 0 5 ml 污水作为水中碱性磷酸酶 的酶液 具体方法同根中碱性磷酸酶 2 2 脲酶测定方法 2 2 1 根中脲酶活性 奈氏试剂显色法 酶液提取 称取植物根系材料 0 1g 放入研钵 再向其中 加入 1ml 磷酸缓冲液 ph7 小心研磨至匀浆 再将其全部吸入 离心管中 在 0 下 1200r min 转速的条件下 离心 30min 上 清液为待测液 取 0 5 ml 具体方法 取适量的干净试管 并给试管编号 依次向其 中加入 2 ml 0 3 mol l 尿素 0 05 mol l 磷酸盐缓冲溶液 ph 7 然后将试管放入 37 恒温水浴锅中 并预热 5 min 1 号管作 为空白对照 向其中加入 0 5 ml 水 向其余试管分别加入 0 5 ml 酶液 将所有试管混匀后在 37 水浴锅中恒温水浴条件下 反应 5 min 在反应结束后向各个试管加入 1 5 ml 10 三氯乙酸 使反应终止 取其中的 1 ml 反应液 加入 9ml 蒸馏水稀释反 应液 摇匀后先加入 0 5 ml 10 酒石酸钾钠反应一会 再加入 1 0 ml 奈氏试剂显色 在波长 420 nm 时测定各管溶液的吸光 度 1 号管作对照 最后做出硫酸铵浓度标准曲线 据此方程 计算酶活 测得铵浓度与吸光度关系拟合方程为 od420 0 006c 0 0082 r2 0 9991 2 2 2 水中脲酶活性 同根中脲酶活性测定方法 但酶液是 直接取 0 5 ml 的污水 五五 实验结果及分析实验结果及分析 同样每隔 48 小时测定湿地植物根内及水体中的酸性磷酸酶 碱性磷酸酶和脲酶活力变化情况见图 2 1 图 2 15 由图 2 1 可知 不同湿地植物根中碱性磷酸酶活性的变化 趋势不同 同一种湿地植物的污水处理组和空白对照组中的碱 性磷酸酶活性的变化趋势一致 且空白对照组中的该酶的活性 高于污水处理组中的活性 两者之间的差距随时间增大 毛茛 和绿萝的空白对照组及污水处理组的根中碱性磷酸酶活性变化 趋势相似 均先剧烈下降后缓慢增多或保持较小幅度的变化 在香蒲 青岛藨草和酸模的空白对照组及污水处理组中该酶活 性波动较小 香蒲和青岛藨草中的趋势是先增加后降低 酸模 中的趋势是随时间延长缓慢增加 在后期增幅较大 总体上 5 种植物根中碱性磷酸酶活性进行排序 绿萝中最高 香蒲次之 然后是青岛藨草 接着是毛茛 最后是酸模 图 2 2 可知 整体上 5 种植物根中脲酶活性的变化趋势较 一致 大体上呈增加的趋势 且在 96 小时至 144 小时之间根中 脲酶活性增加显著 5 种植物的空白对照组中的根中脲酶随时 间延长呈递增趋势 与空白对照组相比 5 种植物的污水处理 组的根中脲酶活性波动较大 毛茛 香蒲 青藨和酸模的污水 处理组中的根中脲酶活性先升高后下降然后再增加 而绿萝的 污水处理组中的根中脲酶活性先下降后增高再略有下降 总体 上对 5 种植物根中脲酶活性进行排序 绿萝中最高 香蒲次之 然后是酸模 接着是青岛藨草 最后是毛茛 由图 2 3 可知 5 种植物的水体中酸性磷酸酶活性没有统一 的变化趋势 而每种植物的污水处理组和空白对照组中酸性磷 酸酶的变化趋势基本一致 在毛茛 酸模和绿萝的空白对照组 及污水处理组中 水体中酸性磷酸酶活性均呈先升高后下降的 趋势 香蒲和青岛藨草的空白对照组及污水处理组中 除了香蒲 的污水处理组中出现先下降再升高 水体中酸性磷酸酶活性均 随时间延长在逐渐增大 由图 2 4 可知 5 种植物的水体中碱性磷酸酶活性没有统一 的变化趋势 而每种植物的污水处理组和空白对照组中变化趋 势基本一致 毛茛和绿萝的污水处理组中 水体中碱性磷酸酶 活性呈下降趋势 毛茛和绿萝的空白对照组和酸模 青岛藨草的 污水处理组及空白对照组中 该酶活性均呈先上升后下降的趋 势 香蒲的空白对照组和污水处理组中 该酶活性均呈上升趋势 由图 2 6 和 2 7 可知 总体上 除了酸模的空白对照组在后 期出现下降 5 种湿地植物的空白对照组和污水处理组中 水 体中脲酶活性均有