传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响

传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响 实验目的实验目的 1 掌握离体平滑肌的实验方法 2 观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用 教学时数教学时数 2 学时 实验原理实验原理 一 离体实验 1 所用组织 心脏 膀胱 子宫 气管 肺 肠等均可用于离体实验 2 特点 实验条件易于控制 操作简便 结果准确 节省时间 可进行大 量药物的筛选 3 要求 离体实验需在一定生理环境下进行 模拟体内环境 1 温度 38 0 5 2 通氧气 1 2 气泡 s 3 营养液 含有一定离子和葡萄糖的溶液 不同的组织所选用 的营养液不同 二 离体肠管实验 1 肠管的选择 根据实验目的的不同进行选择 1 小肠 十二指肠 空肠 回肠 2 自律性 频率较慢 起博点位于十二指肠 自律性自上而下渐弱 3 空肠多做定性实验 回肠多做定量实验 2 肠内受体及作用原理 1 受体 家兔小肠平滑肌上存在 M 受体 2 作用 受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张 M 受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋 而收缩 3 药品对受体的作用 1 氯化乙酰胆碱 Ach M 受体激动剂 乙酰胆碱可兴奋 M 受体 使小肠收缩幅度 增加 蠕动加强 2 阿托品 Atro M 受体阻断药 为竞争性拮抗剂 单独用药对肠管无作用 可阻断 M 受体 对抗乙酰胆碱的 M 样作用 使肠管收缩幅度降低 3 肾上腺素 Ad 受体激动剂 可激活 受体 主要是 2受体 受体激动可产生与 M 受体激动相反的效应 表现为肠管舒张 小肠蠕动 减弱 4 氯化钙 Bacl2 Ba2 进入细胞与钙调蛋白结合 使平滑肌收缩 Ba2 可使细 胞膜发生去极化 所以加入 Bacl2肠管会发生强直性收缩 Bacl2并非作用于受 体 所以阿托品不能对抗这一作用 实验材料实验材料 1 动物 家兔 2 药品 5X10 4氯化乙酰胆碱 0 5 硫酸阿托品 0 1 盐酸肾上腺素 20 BaCL2 3 器材 RM6240 多媒体化生物信号记录分析系统 PC80586 计算机 张 力传感器 保温式麦氏浴槽 超级恒温水浴 L 型通气钩 高位吊瓶 量 筒 烧杯 培养器 氧气瓶 外科剪刀 眼科剪刀 眼科镊子 缝衣针 棉线 注射器 台式营养器 实验方法实验方法 一 首先调试 RM6240 系统 使进入肌张力测定状态 1 在主菜单中用鼠标选择中的 选择系统显示 2 在界面右侧控制参数区选择 选择 3g 扫描速度 1 0s div 确定信号 输入 选择 通道 2 在工具菜单选择快速归零 空载时钩上无任何东西 3 在主菜单中选择 示波 进入示波状态 4 在主菜单中工具栏选择 网格切换 对背景网格进行切换为细格 并在 选项中选择波形颜色红色 此时肌张力测试调试完毕 二 调节仪器 将超级恒温水浴温度调至 38 5 0 5 向麦氏浴槽中加 30ml 台氏液 通 入氧气 1 2 个气泡 秒 并制备家兔肠管标本 三 正式试验 将肠管标本两端用缝针各穿一线 一端打一空结 约 lcm 小套 另一端穿 上长线打结 用眼科镊钳住空结固定于通气钩上 放入麦氏浴槽中 将另端长 线的尽端打一空结 挂在张力换能器的小钩上 调节换能器高度 使前负荷为 1 g 稳定标本 20 分钟 在主菜单下按键选择 记录状态 先描记一段正常曲线 然后按下列顺序 给药 向麦氏浴槽内加入 5X10 4MAch0 2ml 同时用标记框在屏幕上作给药标记 观察肠段反应 当反应最明显时 用暂停键 将计算机转入 示波状态 用 台氏液冲洗肠管 3 遍 稳定标本 15 分钟 加入下列药物 将系统重新转入 记录状态 描记一段正常曲线后 向麦氏浴槽中加 0 5 阿托品 0 2ml 并作标记 观察曲线变化 1 分钟后加 5X10 4MAch0 2ml 并标记 观察肠段反应 将计算机转入 示波状态 后 用台氏液冲洗肠管 3 遍 稳定标本 15 分钟 将系统重新转入 记录状态 描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加 0 01 Adr0 1ml 并作标记 观察曲线变化 将计算机转入 示波状态 下冲洗肠管 稳定标本 加下列药物 将系统重新转入 记录状态 描记一段正常曲线后 向麦氏浴槽中加 20 BaCl2 0 2ml 并作标记 观察曲线变化 在主菜单下选择 结束实验 激活工具栏 系统进入分析状态 实验结果处理实验结果处理 在主菜单下分析项可选择区域测量 标记查询 开始反演 鼠标捕捉 测 量后按工具栏中取消标志线 测出正常曲线 加 Ach 后 加阿托品回复后 加 Adr 后加 BaCl2 后肠管的收缩张力 分别求出加 Ach Adr BaCl2 所引起的张 力变化值及 Atro 对 Ach 拮抗的张力回缩值 以全班数据进行统计 作 t 检验 并判断各药的作用是否显著 在主菜单下打印项进行打印模式设置 可倒入测量信息 学生实验 实验信 息后 预览 打印 注意事项注意事项 1 操作时应避免牵拉肠管 造成肠管活性不好 2 肠管两端穿线采用十字交